-
公开(公告)号：CN106674354B
公开(公告)日：2020-10-16
申请号：CN201710078269.5
申请日：2017-02-14
申请人： 华南农业大学
摘要： 本发明属于一种生物工程技术领域干扰素融合制剂鸡λ、α干扰素基因融合表达及其生产方法和临床应用。该生物工程干扰素融合制剂通过提取CEF细胞总RNA，设计特异性引物，克隆鸡λ、α干扰素基因，通过互补疏水性柔性氨基酸接头将其融合，获得完整的鸡λ、α干扰素融合基因，将其克隆至19‑T载体使其大量克隆表达成功后，再使其连接pET‑32a载体大量表达；对产物鉴定，确定其在包涵体表达后，进行变性，纯化及复性；对其抗病毒活性检测以及临床应用效果评价。本发明成功构建了重组融合鸡λ、α干扰素原核表达质粒pET32a‑chIFN‑λ+α，实现了鸡λ、α干扰素在大肠杆菌原核表达系统上1:1融合表达。
-
公开(公告)号：CN106892976A
公开(公告)日：2017-06-27
申请号：CN201710078270.8
申请日：2017-02-14
申请人： 华南农业大学
摘要： 本发明属于生物工程技术领域中的干扰素领域，具体涉及一种重组鸡干扰素λ(rChIFN‑λ)基因的克隆表达及其制备方法和应用。将重组鸡干扰素λ(rChIFN‑λ)基因从POLY(I:C)刺激的CEF细胞所制得的模板中提取出来，克隆至pET32a表达载体，获得重组质粒pET32a‑rChIFN‑λ；将pET32a‑rChIFN‑λ重组质粒转化至BL21感受态，扩大培养，将包涵体变型、纯化与复性后，制得所需重组鸡干扰素λ(rChIFN‑λ)蛋白。
-
公开(公告)号：CN106674354A
公开(公告)日：2017-05-17
申请号：CN201710078269.5
申请日：2017-02-14
申请人： 华南农业大学
摘要： 本发明属于一种生物工程技术领域干扰素融合制剂鸡λ、α干扰素基因融合表达及其生产方法和临床应用。该生物工程干扰素融合制剂通过提取CEF细胞总RNA，设计特异性引物，克隆鸡λ、α干扰素基因，通过互补疏水性柔性氨基酸接头将其融合，获得完整的鸡λ、α干扰素融合基因，将其克隆至19‑T载体使其大量克隆表达成功后，再使其连接pET‑32a载体大量表达；对产物鉴定，确定其在包涵体表达后，进行变性，纯化及复性；对其抗病毒活性检测以及临床应用效果评价。本发明成功构建了重组融合鸡λ、α干扰素原核表达质粒pET32a‑chIFN‑λ+α，实现了鸡λ、α干扰素在大肠杆菌原核表达系统上1:1融合表达。
-
公开(公告)号：CN105251001A
公开(公告)日：2016-01-20
申请号：CN201510547261.X
申请日：2015-08-31
申请人： 华南农业大学
摘要： 本发明公开了一种高效新城疫DNA疫苗的分子佐剂及其制备方法和应用，属于疫苗技术领域。所述的高效新城疫DNA疫苗的分子佐剂为将鸡白细胞介素12的构建到真核表达载体pCAGGS中，获得重组鸡白细胞介素12的真核表达载体pCAGGS-IL12。本发明成功地构建了重组鸡白细胞介素12的单链双亚基真核表达质粒，不仅可保证P40、P35两亚基以1∶1比率表达，而且柔性氨基酸接头可使两个亚基充分延展、正确折叠，从而获得最大的生物学活性。pCAGGS-IL12与pCAGGS-F核酸疫苗通过电穿孔方法在SPF鸡体内共免疫，可显著增强核酸疫苗的免疫效果，发挥理想的基因佐剂功能。
-
公开(公告)号：CN107058329B
公开(公告)日：2020-06-19
申请号：CN201610719675.0
申请日：2016-08-24
申请人： 华南农业大学
IPC分类号： C12N15/115 , C12N15/10 , G01N33/569
摘要： 本发明公开了一种特异性结合新城疫病毒的核酸适配体及其筛选方法和应用。所述核酸适配体是利用SELEX技术筛选获得的特异性适配体B53。具体地，是在体外构建合成随机单链DNA文库和引物，以原核表达的新城疫HN蛋白和新城疫病毒GM株为靶分子，经过筛选、PCR扩增、正向和反向筛选，将筛选得到的特异性结合新城疫病毒GM株的单链DNA文库进行克隆测序，得到特异性适配体B53。该适配体B53具有抑制病毒复制、病毒血凝活性和形成蚀斑的能力，能够特异性识别新城疫病毒HN蛋白和新城疫病毒GM株，而对禽流感病毒、传染性法氏囊病毒和SPF鸡胚尿囊液无反应性，可用于检测新城疫病毒。
-
公开(公告)号：CN108362875A
公开(公告)日：2018-08-03
申请号：CN201810022726.3
申请日：2018-01-10
申请人： 华南农业大学
IPC分类号： G01N33/569 , G01N33/558 , G01N21/31
摘要： 本发明属于生物技术领域的免疫学检测方法，具体涉及新城疫病毒的非结构蛋白V的特有羧基端结构域在鉴别新城疫病毒感染与免疫中的应用。更具体地，本发明提供了一种能够鉴别诊断新城疫灭活疫苗免疫与野毒感染的方法，其通过大肠杆菌原核表达系统表达V蛋白特有羧基端结构域的重组蛋白，并将该重组蛋白作为抗原，通过间接ELISA检测方法，鉴别新城疫灭活疫苗免疫与野毒感染。本发明的方法具有高特异性，能够快速和有效区分新城疫野毒感染与灭活疫苗免疫，进而有效控制病新城疫病毒的快速传播。
-
公开(公告)号：CN107058329A
公开(公告)日：2017-08-18
申请号：CN201610719675.0
申请日：2016-08-24
申请人： 华南农业大学
IPC分类号： C12N15/115 , C12N15/10 , G01N33/569
摘要： 本发明公开了一种特异性结合新城疫病毒的核酸适配体及其筛选方法和应用。所述核酸适配体是利用SELEX技术筛选获得的特异性适配体B53。具体地，是在体外构建合成随机单链DNA文库和引物，以原核表达的新城疫HN蛋白和新城疫病毒GM株为靶分子，经过筛选、PCR扩增、正向和反向筛选，将筛选得到的特异性结合新城疫病毒GM株的单链DNA文库进行克隆测序，得到特异性适配体B53。该适配体B53具有抑制病毒复制、病毒血凝活性和形成蚀斑的能力，能够特异性识别新城疫病毒HN蛋白和新城疫病毒GM株，而对禽流感病毒、传染性法氏囊病毒和SPF鸡胚尿囊液无反应性，可用于检测新城疫病毒。
-
-
-
-
-
-
搜索结果
7 条记录 (耗时 0.025 秒)
