一种纳米抗体合成库及其构建方法

    公开(公告)号:CN114808147A

    公开(公告)日:2022-07-29

    申请号:CN202210082569.1

    申请日:2022-01-24

    Abstract: 本发明公开了一种纳米抗体合成库及其构建方法。本发明的构建方法是选择一种高表达量及高热稳定性纳米抗体骨架区作为合成库的基础抗体框架,再通过纳米抗体序列收集,数据统计分析,确定了随机化区域,随机化策略采用NNK简并密码子引入序列多样性,通过Klenow酶扩增合成片段,以及多次重叠延伸拼接后得到完整的含随机化位点的纳米抗体序列,用于构建高容量、高多样性的纳米抗体合成库。其中,所述框架的表达量大于20mg/L,热稳定性指在50~90℃下加热5~60min仍可维持同室温相近的活性;设计三种长度的CDR3区,并对三个CDR区都进行随机化,最终构建了三种长度不同的纳米抗体合成库,增加文库的序列多样性和结构多样性。

    一种抗异细交链孢菌酮酸纳米抗体免疫吸附剂和免疫亲和柱的制备与应用

    公开(公告)号:CN119555926A

    公开(公告)日:2025-03-04

    申请号:CN202411494102.3

    申请日:2024-10-24

    Abstract: 本发明公开了一种抗异细交链孢菌酮酸纳米抗体免疫吸附剂和免疫亲和柱的制备与应用。本发明提供的免疫吸附剂包括含有蛋白质交联剂的固相载体,以及与固相载体进行定向偶联的、在C端带有半胱氨酸标签的抗异细交链孢菌酮酸纳米抗体。将纳米抗体与半胱氨酸标签进行融合表达,实现与固相载体的定向偶联,克服了传统偶联存在的抗原结合位点占用问题,提高其吸附能力,所制备的免疫亲和柱的柱含量达905.06ng,较非定向偶联的免疫亲和柱的柱吸附量提高202.40ng,重复使用次数也有提高。同时,将其与质谱联用检测异细交链孢菌酮酸具有良好的准确度和精密度,其检测限和定量限更低,不仅简化样品前处理过程,还降低了检测成本。

    一种亲和力成熟的抗喹硫磷纳米抗体及其应用

    公开(公告)号:CN114507288B

    公开(公告)日:2023-09-19

    申请号:CN202210271305.0

    申请日:2022-03-18

    Abstract: 本发明公开了一种亲和力成熟的抗喹硫磷纳米抗体及其应用。本发明通过噬菌体展示及生物淘筛技术对抗喹硫磷纳米抗体进行了亲和力成熟,获得了一种对喹硫磷亲和力相较野生型纳米抗体更高的纳米抗体,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。该纳米抗体能够特异性识别喹硫磷农药,相比原来的纳米抗体灵敏度提高了18%,最低检测限降低了25%;将本发明提供的纳米抗体用于检测喹硫磷农药的酶联免疫分析方法中,其IC50为18.62ng/mL,最低检测限为1.93ng/mL,线性范围为5.14‑67.45ng/mL,该方法的检测结果准确、灵敏度更高、效果好、稳定性好,可以更加广泛的应用于喹硫磷农药残留的检测。

    一种金刚烷胺免疫磁珠及其制备方法与应用

    公开(公告)号:CN114563563A

    公开(公告)日:2022-05-31

    申请号:CN202210225703.9

    申请日:2022-03-07

    Abstract: 本发明属于食品安全检测技术领域,具体涉及一种金刚烷胺免疫磁珠及其制备方法与应用。本发明的免疫磁珠能特异性富集金刚烷胺,在短时间内迅速、有选择地将样品中的金刚烷胺富集与纯化;并且可以避免有机溶剂的大量使用,绿色环保;还能有效地减少样品中其他杂质的干扰,提高了检测的准确性和精准性;与胶体金结合检测金刚烷胺的过程中,检测的灵敏度高,精密性好,大大降低了最低检测限,且操作简便,成本低,可广泛应用于饲料、肉制品、动物组织中金刚烷胺的纯化、富集与分离,符合市场需求,对食品中金刚烷胺的安全检测和初筛具有重要的意义。

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