一种纳米抗体合成库及其构建方法

    公开(公告)号:CN114808147A

    公开(公告)日:2022-07-29

    申请号:CN202210082569.1

    申请日:2022-01-24

    Abstract: 本发明公开了一种纳米抗体合成库及其构建方法。本发明的构建方法是选择一种高表达量及高热稳定性纳米抗体骨架区作为合成库的基础抗体框架,再通过纳米抗体序列收集,数据统计分析,确定了随机化区域,随机化策略采用NNK简并密码子引入序列多样性,通过Klenow酶扩增合成片段,以及多次重叠延伸拼接后得到完整的含随机化位点的纳米抗体序列,用于构建高容量、高多样性的纳米抗体合成库。其中,所述框架的表达量大于20mg/L,热稳定性指在50~90℃下加热5~60min仍可维持同室温相近的活性;设计三种长度的CDR3区,并对三个CDR区都进行随机化,最终构建了三种长度不同的纳米抗体合成库,增加文库的序列多样性和结构多样性。

    一种诱导大豆下胚轴外植体的不定芽再生的方法

    公开(公告)号:CN102754597B

    公开(公告)日:2013-12-04

    申请号:CN201210207072.4

    申请日:2012-06-21

    Abstract: 本发明属于植物生物技术领域。在以大豆下胚轴作为外植体诱导不定芽再生时,一般是在大豆种子萌发培养基或/和下胚轴外植体不定芽再生培养基中添加细胞分裂素,在这种条件下胚轴外植体的不定芽再生效率很低,芽体的质量也较差。本发明,在种子萌发培养基和不定芽再生培养基中都不添加BA,在取得外植体后,配制显著高浓度的BA溶液对大豆下胚轴外植体形态学上端切口附近进行短期浸泡处理,给予该部位具有分化能力的细胞较强的不定芽分化刺激作用,因此,也就可以获得数量较多和质量较好的不定芽。应用本发明可以极显著地提高大豆下胚轴外植体不定芽再生的效率和质量,使下胚轴成为大豆遗传转化的理想受体。

    应用于大豆下胚轴外植体转化受体系统的农杆菌局部侵染方法和装置

    公开(公告)号:CN102827756A

    公开(公告)日:2012-12-19

    申请号:CN201210209693.6

    申请日:2012-06-25

    CPC classification number: C12M23/10 C12M23/38

    Abstract: 本发明公开一种应用于大豆下胚轴外植体转化受体系统的农杆菌局部侵染的装置和侵染方法。为了抑制外植体表面的农杆菌在培养基上的过旺增殖以防止植物材料的腐烂并且不使用抗生素,本发明提供了一种设计简单的装置成功应用于大豆下胚轴外植体转化受体系统的农杆菌侵染,避免把整个外植体浸泡在农杆菌菌液中,只对有再生不定芽潜能的下胚轴上端切口附近进行农杆菌侵染处理。本发明进一步对侵染方法条件进行了优化。应用本发明可以降低大豆下胚轴外植体遗传转化受体系统的药剂成本和提高转化工作效率。

    应用于大豆下胚轴外植体转化受体系统的农杆菌局部侵染方法和装置

    公开(公告)号:CN102827756B

    公开(公告)日:2014-04-09

    申请号:CN201210209693.6

    申请日:2012-06-25

    CPC classification number: C12M23/10 C12M23/38

    Abstract: 本发明公开一种应用于大豆下胚轴外植体转化受体系统的农杆菌局部侵染的装置和侵染方法。为了抑制外植体表面的农杆菌在培养基上的过旺增殖以防止植物材料的腐烂并且不使用抗生素,本发明提供了一种设计简单的装置成功应用于大豆下胚轴外植体转化受体系统的农杆菌侵染,避免把整个外植体浸泡在农杆菌菌液中,只对有再生不定芽潜能的下胚轴上端切口附近进行农杆菌侵染处理。本发明进一步对侵染方法条件进行了优化。应用本发明可以降低大豆下胚轴外植体遗传转化受体系统的药剂成本和提高转化工作效率。

    一种诱导大豆下胚轴外植体的不定芽再生的方法

    公开(公告)号:CN102754597A

    公开(公告)日:2012-10-31

    申请号:CN201210207072.4

    申请日:2012-06-21

    Abstract: 本发明属于植物生物技术领域。在以大豆下胚轴作为外植体诱导不定芽再生时,一般是在大豆种子萌发培养基或/和下胚轴外植体不定芽再生培养基中添加细胞分裂素,在这种条件下胚轴外植体的不定芽再生效率很低,芽体的质量也较差。本发明,在种子萌发培养基和不定芽再生培养基中都不添加BA,在取得外植体后,配制显著高浓度的BA溶液对大豆下胚轴外植体形态学上端切口附近进行短期浸泡处理,给予该部位具有分化能力的细胞较强的不定芽分化刺激作用,因此,也就可以获得数量较多和质量较好的不定芽。应用本发明可以极显著地提高大豆下胚轴外植体不定芽再生的效率和质量,使下胚轴成为大豆遗传转化的理想受体。

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