多靶向siRNA分子及其抗肿瘤的应用

    公开(公告)号:CN103937801A

    公开(公告)日:2014-07-23

    申请号:CN201410200512.2

    申请日:2014-05-13

    摘要: 本发明提供了一种多靶向siRNA分子及其抗肿瘤的应用。所述的多靶向siRNA分子其特征在于,由正义链、反义链1、反义链2和反义链3组成,其序列为:正义链:5’-CCACAAUGGCUGAGCACUUGGAACAAGACCGAAUGGAUACGGAUGACUGAGUACCUGAANn-3’,反义链1:5’-AAGUGCUCAGCCAUUGUGGNn-3’;反义链2:5’-UAUCCAUUCGGUCUUGUUCNn-3’;反义链3:5’-UUCAGGUACUCAGUCAUCCNn-3’。其中,N是胞嘧啶C、鸟嘌呤G、腺嘌呤A、胸腺嘧啶T、脱氧胞嘧啶dC、脱氧鸟嘌呤dG、脱氧腺嘌呤dA或脱氧胸腺嘧啶dT;n代表N的个数,n是6~2的整数。本发明可以用于制备同时调节细胞中NET-1、EMS1和Bcl2基因基因功能的药物,诱导肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤细胞转移和侵袭,达到治疗肿瘤的目的。

    靶向多基因的siRNA分子及其抑制肿瘤的应用

    公开(公告)号:CN103937800A

    公开(公告)日:2014-07-23

    申请号:CN201410200302.3

    申请日:2014-05-13

    摘要: 本发明提供了一种靶向多基因的siRNA分子及其抑制肿瘤的应用。所述的靶向多基因的siRNA分子由正义链、反义链1、反义链2和反义链3组成,其中正义链为 :5’-CCACAAUGGCUGAGCACUUGGAACAAGACCGAAUGGAUACGGAGUACCCUGAUGAGAUCNn-3’,反义链1:5’-AAGUGCUCAGCCAUUGUGGNn-3’;反义链2:5’-UAUCCAUUCGGUCUUGUUCNn-3’;反义链3:5’-GAUCUCAUCAGGGUACUCCNn-3’,其中,N是胞嘧啶C、鸟嘌呤G、腺嘌呤A、胸腺嘧啶T、脱氧胞嘧啶dC、脱氧鸟嘌呤dG、脱氧腺嘌呤dA或脱氧胸腺嘧啶dT;n代表N的个数,n是0~2的整数。本发明可以用于制备同时调节细胞中NET-1、EMS1和VEGF基因基因功能的药物,诱导肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤细胞转移和侵袭,达到治疗肿瘤的目的。

    一种siRNA分子及其抗肿瘤应用

    公开(公告)号:CN103243100A

    公开(公告)日:2013-08-14

    申请号:CN201310206799.5

    申请日:2013-05-29

    摘要: 本发明提供了一种靶向VEGF和NET-1基因的双靶向siRNA双链分子,其特征在于,其序列由如下正义链和反义链1、2组成,其中正义链为5’-GCUUCCUACAGCACAACAAACCACAAUGGCUGAGCACUUNn-3’,反义链1为5’-UUGUUGUGCUGUAGGAAGCNn-3’,反义链2为5’-AAGUGCUCAGCCAUUGUGGNn-3’;上述siRNA分子中,N是4种DNA碱基及其脱氧形式中的任何一种,即胞嘧啶C、鸟嘌呤G、腺嘌呤A、胸腺嘧啶T、脱氧胞嘧啶dC、脱氧鸟嘌呤dG、脱氧腺嘌呤dA或脱氧胸腺嘧啶dT;n代表N的个数,n是0~2的整数。本发明的siRNA分子可以应用于制备调节细胞中NET-1基因和VEGF基因功能的药物中发挥RNA干扰的作用,诱导肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤细胞转移和侵袭,达到抗肿瘤的目的。

    一种构建和生产限制性内切酶Ecop15I的方法

    公开(公告)号:CN101538579B

    公开(公告)日:2013-12-04

    申请号:CN200810019839.4

    申请日:2008-03-19

    摘要: 本发明提供了一种构建和生产重组III型限制性内切酶Ecop15I的方法。III型限制性内切酶Ecop15I在基因表达系列分析具有重要作用,而传统方法难以实现大规模的表达和纯化。本发明利用基因重组的方法,人工合成融合有纯化标签的Ecop15I的2个亚基片段,分别克隆到原核共表达载体pACYCDuet-1的两个独立表达单元中。在IPTG诱导下,具有独立的T7启动子、核糖体结合位点、起始密码子和终止密码子表达单元在大肠杆菌中,同时独立表达酶的2个亚基,并折叠成具有生物学活性的复合结构。再通过Ni亲和层析和DEAE离子交换层析的方法进行纯化。最终得到了产量较高,活力和稳定性较好的重组型Ecop15I内切酶,从而为大规模生产提供了有效的途径。