公开(公告)号：CN116515769A

公开(公告)日：2023-08-01

申请号：CN202310426670.9

申请日：2023-04-20

申请人： 哈尔滨维科生物技术有限公司 ,  中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)

发明人： 高宏雷 ,  张峣 ,  付海兵 ,  王晓龙 ,  鞠妍 ,  王青竹 ,  于德斌 ,  张莎 ,  张义爽 ,  庞宁 ,  李婉莹 ,  刘景利 ,  蔡雪辉

IPC分类号： C12N7/00 ,  C12N5/071 ,  C12R1/93

摘要： 一种规模化培养细胞源禽流感病毒的方法，属于流感病毒培养技术领域。为解决细胞源禽流感病毒生产过程中存在细胞密度过大，进而导致抗原纯化及浓缩困难的问题，提供了一种利用PK‑15细胞规模化培养禽流感病毒的方法，具体包括利用无血清培养基快速全悬浮驯化PK‑15细胞；全悬浮PK‑15细胞生物反应器放大培养；利用全悬浮PK‑15细胞培养禽流感病毒。本发明所述方法操作简单，极大降低了病毒培养过程中的细胞密度，为规模化生产细胞源禽流感病毒提供了新方法。

公开(公告)号：CN116694577A

公开(公告)日：2023-09-05

申请号：CN202210183913.6

申请日：2022-02-24

申请人： 哈尔滨维科生物技术有限公司 ,  中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)

发明人： 张峣 ,  王晓龙 ,  王青竹 ,  鞠妍 ,  王洪峰 ,  高艳 ,  高宏雷 ,  刘景利 ,  时洪艳 ,  冯力

IPC分类号： C12N7/00 ,  C12N5/071 ,  A61K39/215 ,  A61K39/225 ,  A61K39/245 ,  A61K39/15 ,  A61P31/14 ,  A61P31/22

摘要： 本发明公开了一种利用WAVE波浪式生物反应器培养猪病病毒的方法。属于猪病病毒培养领域。为了提供一种利用WAVE波浪式生物反应器驯化PK‑15悬浮细胞并培养猪病病毒的方法。本发明提供的方法为：1)利用WAVE波浪式生物反应器驯化全悬浮PK‑15细胞；2)全悬浮PK‑15细胞WAVE波浪式生物反应器放大培养；3)利用全悬浮PK‑15细胞在WAVE波浪式生物反应器上培养猪病病毒，所述猪病病毒为猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒、伪狂犬病毒或猪轮状病毒。本发明为利用悬浮细胞系培养和增殖猪病病毒提供了可能性。

公开(公告)号：CN113061166B

公开(公告)日：2022-04-12

申请号：CN202110381614.9

申请日：2021-04-09

申请人： 哈尔滨维科生物技术有限公司

发明人： 王青竹 ,  鞠妍 ,  高宏雷 ,  刘景利 ,  王晓龙 ,  张峣 ,  孙振峰 ,  朱庆虎 ,  王子敬 ,  牛卉颖

IPC分类号： C07K14/08 ,  C07K1/14 ,  C07K1/34

摘要： 一种病毒VP2蛋白分离纯化的规模化生产方法，属于生物制品技术领域。为解决利用大肠杆菌表达传染性法氏囊VP2蛋白生产鸡传染性法氏囊病疫苗会产生内毒素的问题，本发明提供了一种病毒VP2蛋白分离纯化的规模化生产方法，该方法为将大肠杆菌破碎后，加入一定比例的脱氧胆酸钠，然后加入有机磷酸盐缓冲液作为螯合剂，调节适当的pH，同时在溶液中加入一定浓度的NaCl，充分混匀后，利用中空纤维柱的切向流过滤功能，将内毒素单体去除。本发明所述生产方法既能生产出高浓度的法氏囊VP2蛋白，又能符合新版兽药GMP生产要求，具备低生产成本的特点。

公开(公告)号：CN113061166A

公开(公告)日：2021-07-02

申请号：CN202110381614.9

申请日：2021-04-09

申请人： 哈尔滨维科生物技术有限公司

发明人： 王青竹 ,  鞠妍 ,  高宏雷 ,  刘景利 ,  王晓龙 ,  张峣 ,  孙振峰 ,  朱庆虎 ,  王子敬 ,  牛卉颖

IPC分类号： C07K14/08 ,  C07K1/14 ,  C07K1/34

摘要： 一种病毒VP2蛋白分离纯化的规模化生产方法，属于生物制品技术领域。为解决利用大肠杆菌表达传染性法氏囊VP2蛋白生产鸡传染性法氏囊病疫苗会产生内毒素的问题，本发明提供了一种病毒VP2蛋白分离纯化的规模化生产方法，该方法为将大肠杆菌破碎后，加入一定比例的脱氧胆酸钠，然后加入有机磷酸盐缓冲液作为螯合剂，调节适当的pH，同时在溶液中加入一定浓度的NaCl，充分混匀后，利用中空纤维柱的切向流过滤功能，将内毒素单体去除。本发明所述生产方法既能生产出高浓度的法氏囊VP2蛋白，又能符合新版兽药GMP生产要求，具备低生产成本的特点。

公开(公告)号：CN112125950A

公开(公告)日：2020-12-25

申请号：CN202010909516.3

申请日：2020-09-02

申请人： 哈尔滨维科生物技术有限公司

发明人： 鞠妍 ,  王青竹 ,  涂亚斌 ,  高允乐 ,  高宏雷 ,  刘景利 ,  张峣 ,  王晓龙

IPC分类号： C07K1/34 ,  C07K1/30 ,  C07K1/18 ,  C07K1/20 ,  C07K1/14 ,  C07K1/36

摘要： 本发明公开了一种蛋白质分离纯化的规模化生产方法，属于蛋白质生物工程技术领域。本发明解决现有硫酸铵沉淀方法分离纯化蛋白质无法实现产业化的问题。本发明采用中空纤维柱式超滤装置循环替代硫酸铵沉淀后的离心和沉淀复溶的操作步骤，使硫酸铵沉淀在生产中更容易被放大且提高其纯化效率，去除更多杂质蛋白,在满足高纯度蛋白质制备的同时，达到大量蛋白质的分离纯化目的。解决了在大规模化分离纯化蛋白质时存在的除硫酸铵沉淀法外其他粗纯方法很难将含有多种蛋白质的样品进行有效分离，对后续离子交换层析造成负担，进而导致后续纯化效率低或难以进行的问题，以及现有硫酸铵沉淀在大规模化生产中存在的较大成本投入以及后续维护成本高的问题。

公开(公告)号：CN115125217A

公开(公告)日：2022-09-30

申请号：CN202210818329.3

申请日：2022-07-12

申请人： 哈尔滨维科生物技术有限公司

发明人： 高艳 ,  高宏雷 ,  张峣 ,  王晓龙 ,  刘景利

IPC分类号： C12N7/00 ,  C12N5/09

摘要： 本发明公开一种I群8型禽腺病毒全悬浮的培养方法，属于病毒扩增生物技术领域。为了提高禽腺病毒的培养后的活力。一种I群8型禽腺病毒全悬浮的培养方法是将I群8型禽腺病毒接种于LMH细胞无血清悬浮细胞系中，利用WAVETM波浪式生物反应器进行培养。该方法可以大量降低生产成本，而且生产周期短、病毒含量高，提高了培养过程中的传氧系数，减少生产耗时，提高了生产效率和疫苗的产量及质量。