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公开(公告)号:CN107338289A
公开(公告)日:2017-11-10
申请号:CN201710471433.9
申请日:2017-06-20
Applicant: 复旦大学附属华山医院 , 复旦大学 , 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所 , 上海速创诊断产品有限公司
CPC classification number: C12Q1/6844 , C12Q2531/119 , C12Q2525/307 , C12Q2527/125 , C12Q2527/101 , C12Q2521/101
Abstract: 本发明公开了一种锁核酸修饰的LAMP引物组合物,在该LAMP引物组合物中,锁核酸的修饰位置为FIP引物和BIP引物3’端最外侧的3个碱基中的至少一个;本发明还涉及一种含有上述LAMP引物组合物的LAMP反应体系,该体系还包括甲酰胺和热启动酶;本发明还涉及一种采用上述LAMP引物组合物的扩增方法,其扩增温度为58℃-72℃。本发明针对LAMP的非特异性扩增问题,采用上述技术方案,在小幅提高扩增效率的同时,大幅降低非特异性扩增,显著提高了LAMP反应体系的稳定性和特异性,此对于LAMP技术的进一步完善和临床应用的推广具有重要意义。
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公开(公告)号:CN107164474A
公开(公告)日:2017-09-15
申请号:CN201710364251.1
申请日:2017-05-22
Applicant: 复旦大学附属华山医院 , 复旦大学 , 上海速创诊断产品有限公司
Abstract: 本发明涉及一种用于检测CALR基因2型突变的引物组合物,其包括含有SEQ ID NO:2‑SEQ ID NO:7所示序列的引物;本发明还涉及一种含有上述引物组合物的试剂盒及其检测方法,以及上述引物组合物扩增的CALR基因2型突变的靶序列,该靶序列为SEQ ID NO:1所示序列。本发明所述的试剂盒及其检测方法具有良好的特异性和稳定性,梯度突变负荷浓度的样本用所建立的LAMP反应体系进行扩增,发现突变负荷检出敏感性可达到3%,几乎与探针法实时PCR的效果相当,且其可对CALR基因2型突变进行可视化检测,与传统的检测方法相比,该方法对设备和环境要求低,检测速度更快,检测灵敏度更高。
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公开(公告)号:CN107164474B
公开(公告)日:2020-09-04
申请号:CN201710364251.1
申请日:2017-05-22
Applicant: 复旦大学附属华山医院 , 复旦大学 , 上海速创诊断产品有限公司
IPC: C12Q1/6886 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 本发明涉及一种用于检测CALR基因2型突变的引物组合物,其包括含有SEQ ID NO:2‑SEQ ID NO:7所示序列的引物;本发明还涉及一种含有上述引物组合物的试剂盒及其检测方法,以及上述引物组合物扩增的CALR基因2型突变的靶序列,该靶序列为SEQ ID NO:1所示序列。本发明所述的试剂盒及其检测方法具有良好的特异性和稳定性,梯度突变负荷浓度的样本用所建立的LAMP反应体系进行扩增,发现突变负荷检出敏感性可达到3%,几乎与探针法实时PCR的效果相当,且其可对CALR基因2型突变进行可视化检测,与传统的检测方法相比,该方法对设备和环境要求低,检测速度更快,检测灵敏度更高。
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公开(公告)号:CN107164473B
公开(公告)日:2020-08-25
申请号:CN201710363814.5
申请日:2017-05-22
Applicant: 复旦大学附属华山医院 , 复旦大学 , 上海速创诊断产品有限公司
IPC: C12Q1/6886 , C12N15/11
Abstract: 本发明涉及一种检测CALR基因1型突变的引物组合物,其包括含有SEQ ID NO:2‑SEQ ID NO:7所示序列的引物和SEQ ID NO:8所示序列的PNA探针;本发明还涉及一种含有上述引物组合物的试剂盒及其检测方法,以及上述引物组合物扩增的CALR基因1型突变的靶序列,该靶序列为SEQ ID NO:1所示序列。本发明所述的试剂盒及其检测方法具有良好的特异性和稳定性,梯度突变负荷浓度的样本用所建立的LAMP反应体系进行扩增,发现突变负荷检出敏感性可达到1%,与探针法实时PCR的效果相当,且其可对CALR基因1型突变进行可视化检测,与传统的检测方法相比,该方法对设备和环境要求低,检测速度更快,检测灵敏度更高。
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公开(公告)号:CN107164473A
公开(公告)日:2017-09-15
申请号:CN201710363814.5
申请日:2017-05-22
Applicant: 复旦大学附属华山医院 , 复旦大学 , 上海速创诊断产品有限公司
Abstract: 本发明涉及一种检测CALR基因1型突变的引物组合物,其包括含有SEQ ID NO:2‑SEQ ID NO:7所示序列的引物和SEQ ID NO:8所示序列的PNA探针;本发明还涉及一种含有上述引物组合物的试剂盒及其检测方法,以及上述引物组合物扩增的CALR基因1型突变的靶序列,该靶序列为SEQ ID NO:1所示序列。本发明所述的试剂盒及其检测方法具有良好的特异性和稳定性,梯度突变负荷浓度的样本用所建立的LAMP反应体系进行扩增,发现突变负荷检出敏感性可达到1%,与探针法实时PCR的效果相当,且其可对CALR基因1型突变进行可视化检测,与传统的检测方法相比,该方法对设备和环境要求低,检测速度更快,检测灵敏度更高。
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公开(公告)号:CN114107019B
公开(公告)日:2024-01-12
申请号:CN202111412079.5
申请日:2021-11-25
Applicant: 复旦大学 , 上海速创诊断产品有限公司 , 上海速芯生物科技有限公司
IPC: C12M1/34 , C12M1/40 , C12M1/00 , C12Q1/70 , C12Q1/689 , C12Q1/6895 , C12Q1/6844 , G01N33/543 , G01N33/558 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种同时检测核酸和蛋白质的微流控芯片、检测方法及用途。本发明提供了一种同时检测核酸和蛋白质的微流控芯片,其包括:样品加载腔室;以及样本流动通道,其包括流道检测区,流道检测区用于侧向免疫层析反应;在流道检测区中,沿流体在微流控芯片中的流动方向,依次设置有捕获区、第一检测区和第二检测区;捕获区包括包被有捕获抗体的荧光微粒和包被有与第一修饰物特异性结合的分子的荧光微粒;第一检测区和第二检测区分别包括与第二生物样品中待测蛋白质特异性结合的分子和/或与第二修饰物特异性结合的分子。本发明提供了
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公开(公告)号:CN107365684B
公开(公告)日:2019-03-01
申请号:CN201710576618.6
申请日:2017-07-14
Applicant: 复旦大学 , 上海速创诊断产品有限公司
IPC: C12N15/10 , C12Q1/70 , C12Q1/6806 , C12Q1/6844 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及一种纸微流控芯片,该纸微流控芯片可以实现将核酸的提取纯化、等温扩增和结果判读整合为一体,其检测全程时间仅需要30分钟,并且不需要泵,离心机或热循环仪等设备,结果以肉眼判读的方式实现。利用该纸微流控芯片检测A群轮状病毒感染标本的最低检测限为103copies/ml,利用48例临床标本验证其灵敏度和特异性达到了100%。本发明所述的微流控芯片具有便捷高效,低成本,检测性能良好等优点,其提取和纯化核酸仅需要5分钟,其可替代传统的核酸提取方法(如磁珠法,核酸提取需1小时),有效缩短检测时间,本发明所述的纸微流控芯片可以在中心实验室或者床旁进行,可成为检测相关病原体(如A群轮状病毒)的有力工具。
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公开(公告)号:CN106701944A
公开(公告)日:2017-05-24
申请号:CN201611239399.4
申请日:2016-12-28
Applicant: 上海市东方医院 , 上海速创诊断产品有限公司 , 复旦大学
CPC classification number: C12Q1/6895 , C12Q1/6844 , C12Q2531/119 , C12Q2563/107
Abstract: 本发明公开了一种用于检测光滑假丝酵母菌的LAMP引物组合物、基于该引物组合物的检测试剂盒及检测方法,试剂盒中包括LAMP引物组合物、Bst DNA聚合酶和显色剂等;显色剂为荧光染料SYBGreen或荧光指示剂Syto 9;本发明的LAMP引物组合物在光滑假丝酵母菌的特异内源性基因处设计了四条引物,具有很强的品系特异性,保证了反应的顺利进行。此外本发明的试剂盒还具有操作简便、反应快速高效、特异性和灵敏度高、鉴定方法多样等优点,适合在临床中推广应用。
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公开(公告)号:CN106521009A
公开(公告)日:2017-03-22
申请号:CN201611237046.0
申请日:2016-12-28
Applicant: 上海市东方医院 , 上海速创诊断产品有限公司 , 复旦大学
CPC classification number: C12Q1/6895 , C12Q1/6844 , C12Q2531/119 , C12Q2563/107
Abstract: 本发明公开了一种用于检测克柔假丝酵母菌的LAMP引物组合物、基于该引物组合物的检测试剂盒及检测方法,试剂盒中包括LAMP引物组合物、BstDNA聚合酶,dNTP,10×Isothermal Amplification反应缓冲液,MgSO4,H2O和显色剂;显色剂包括荧光染料SYBGreen或荧光指示剂Syto 9。本发明的LAMP引物组合物在克柔假丝酵母菌的特异内源性基因处设计了四条引物,具有很强的品系特异性,保证了反应的顺利进行。此外本发明的试剂盒还具有操作简便、反应快速高效、特异性和灵敏度高、鉴定方法多样等优点,适合在临床中推广应用。
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公开(公告)号:CN107365684A
公开(公告)日:2017-11-21
申请号:CN201710576618.6
申请日:2017-07-14
Applicant: 复旦大学 , 上海速创诊断产品有限公司
CPC classification number: C12N15/1003 , C12Q1/6806 , C12Q1/6844 , C12Q1/701 , C12Q2531/119 , C12Q2563/107
Abstract: 本发明涉及一种纸微流控芯片,该纸微流控芯片可以实现将核酸的提取纯化、等温扩增和结果判读整合为一体,其检测全程时间仅需要30分钟,并且不需要泵,离心机或热循环仪等设备,结果以肉眼判读的方式实现。利用该纸微流控芯片检测A群轮状病毒感染标本的最低检测限为103copies/ml,利用48例临床标本验证其灵敏度和特异性达到了100%。本发明所述的微流控芯片具有便捷高效,低成本,检测性能良好等优点,其提取和纯化核酸仅需要5分钟,其可替代传统的核酸提取方法(如磁珠法,核酸提取需1小时),有效缩短检测时间,本发明所述的纸微流控芯片可以在中心实验室或者床旁进行,可成为检测相关病原体(如A群轮状病毒)的有力工具。
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