公开(公告)号：CN107338289A

公开(公告)日：2017-11-10

申请号：CN201710471433.9

申请日：2017-06-20

Applicant: 复旦大学附属华山医院 ,  复旦大学 ,  中国科学院苏州生物医学工程技术研究所 ,  上海速创诊断产品有限公司

Inventor： 曹国君 ,  关明 ,  方雪恩 ,  周连群 ,  张威 ,  康志华 ,  邓萱 ,  赵缜 ,  邢志芳 ,  孔继烈

IPC: C12Q1/68 ,  C12N15/11

CPC classification number: C12Q1/6844 ,  C12Q2531/119 ,  C12Q2525/307 ,  C12Q2527/125 ,  C12Q2527/101 ,  C12Q2521/101

Abstract: 本发明公开了一种锁核酸修饰的LAMP引物组合物，在该LAMP引物组合物中，锁核酸的修饰位置为FIP引物和BIP引物3’端最外侧的3个碱基中的至少一个；本发明还涉及一种含有上述LAMP引物组合物的LAMP反应体系，该体系还包括甲酰胺和热启动酶；本发明还涉及一种采用上述LAMP引物组合物的扩增方法，其扩增温度为58℃-72℃。本发明针对LAMP的非特异性扩增问题，采用上述技术方案，在小幅提高扩增效率的同时，大幅降低非特异性扩增，显著提高了LAMP反应体系的稳定性和特异性，此对于LAMP技术的进一步完善和临床应用的推广具有重要意义。

公开(公告)号：CN107164538B

公开(公告)日：2021-03-02

申请号：CN201710560138.0

申请日：2017-07-11

Applicant: 复旦大学附属华山医院 ,  中国科学院苏州生物医学工程技术研究所

Inventor： 曹国君 ,  关明 ,  周连群 ,  张威 ,  马玮哲 ,  康志华 ,  张心菊 ,  黄秀 ,  邓萱 ,  许笑 ,  邢志芳

IPC: C12Q1/6858 ,  C12Q1/6886 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明涉及一种检测CALR基因突变的内参扩增引物组合物，其包括SEQ ID NO：1‑SEQ ID NO：6所示序列的引物；本发明还涉及一种含有上述内参扩增引物组合物的内参扩增体系及其试剂盒和检测方法，以及由上述内参扩增引物组合物扩增的CALR基因突变的靶序列，该靶序列为SEQ ID NO：7所示序列。本发明所述的内参扩增体系及其检测方法与CALR基因的突变体系配套使用，其既可以对突变型的CALR基因进行快速检测，也可以对野生型的CALR基因进行扩增，作为CALR突变检测试剂盒的内参质控体系，在质量控制的提升方面具有重要意义。

公开(公告)号：CN107164538A

公开(公告)日：2017-09-15

申请号：CN201710560138.0

申请日：2017-07-11

Applicant: 复旦大学附属华山医院 ,  中国科学院苏州生物医学工程技术研究所

Inventor： 曹国君 ,  关明 ,  周连群 ,  张威 ,  马玮哲 ,  康志华 ,  张心菊 ,  黄秀 ,  邓萱 ,  许笑 ,  邢志芳

IPC: C12Q1/68 ,  C12N15/11

CPC classification number: C12Q1/6858 ,  C12Q1/6886 ,  C12Q2600/156 ,  C12Q2600/166 ,  C12Q2531/119 ,  C12Q2545/101

Abstract: 本发明涉及一种检测CALR基因突变的内参扩增引物组合物，其包括SEQ ID NO：1‑SEQ ID NO：6所示序列的引物；本发明还涉及一种含有上述内参扩增引物组合物的内参扩增体系及其试剂盒和检测方法，以及由上述内参扩增引物组合物扩增的CALR基因突变的靶序列，该靶序列为SEQ ID NO：7所示序列。本发明所述的内参扩增体系及其检测方法与CALR基因的突变体系配套使用，其既可以对突变型的CALR基因进行快速检测，也可以对野生型的CALR基因进行扩增，作为CALR突变检测试剂盒的内参质控体系，在质量控制的提升方面具有重要意义。

公开(公告)号：CN111057798A

公开(公告)日：2020-04-24

申请号：CN202010067653.7

申请日：2020-01-20

Applicant: 复旦大学附属华山医院

Inventor： 邢志芳 ,  关明 ,  曹国君 ,  康志华 ,  许笑 ,  吴之源 ,  马艳春 ,  秦欢欢 ,  许育

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6844 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了一种检测新型冠状病毒的LAMP引物组合和试剂盒，该引物组合选自如SEQ ID NO:3～SEQ ID NO:6所示的引物组1、如SEQ ID NO:7～SEQ ID NO:10所示的引物组2、如SEQ ID NO:11～SEQ ID NO:14所示的引物组3、如SEQ ID NO:15～SEQ ID NO:18所示的引物组4、如SEQ ID NO:19～SEQ ID NO:22所示的引物组5、如SEQ ID NO:24～SEQ ID NO:27所示的引物组6、如SEQ ID NO:28～SEQ ID NO:31所示的引物组7、如SEQ ID NO:32～SEQ ID NO:35所示的引物组8中的任一种或几种。本发明将上述引物组合与LAMP技术结合，不但可以通过肉眼观察到检测结果，无需复杂的辅助设备，简单易用，而且可通过荧光染料法实现检测结果半定量，检测灵敏度高，为该新型冠状病毒相关疾病的诊断以及治疗药物的研究提供了便利而快速的手段。

公开(公告)号：CN107841536A

公开(公告)日：2018-03-27

申请号：CN201711002034.4

申请日：2017-10-24

Applicant: 复旦大学附属华山医院

Inventor： 关明 ,  曹国君 ,  许笑 ,  唐宜桂 ,  张心菊 ,  康志华 ,  邓萱 ,  马玮哲 ,  王俨 ,  马艳春

IPC: C12Q1/6844 ,  C12Q1/6886 ,  C12N15/11

CPC classification number: C12Q1/6844 ,  C12Q1/6886 ,  C12Q2600/156 ,  C12Q2531/119 ,  C12Q2525/107 ,  C12Q2525/307

Abstract: 本发明涉及一种检测JAK2 V617F基因突变的引物组合物，其含有SEQ ID NO：2-SEQ ID NO：6所示序列的引物和SEQ ID NO：7所示序列的PNA探针；本发明还涉及一种含有上述引物组合物的试剂盒及其检测方法。本发明所述的试剂盒及其检测方法具有良好的特异性和稳定性，梯度突变负荷浓度的样本用所建立的LAMP反应体系进行扩增，发现突变负荷检出敏感性可达到1％，与探针法实时PCR的效果相当，且其可对JAK2 V617F基因突变进行可视化检测，与传统的检测方法相比，该方法对设备和环境要求低，检测速度更快，检测灵敏度更高，有助于将来POCT(床旁检测)的实现。