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公开(公告)号：CN112457409A
公开(公告)日：2021-03-09
申请号：CN202011132302.6
申请日：2020-10-21
申请人： 天津农学院
IPC分类号： C07K19/00 , C12N9/36 , C12N15/70 , A61K38/17 , A61K38/47 , A61K47/55 , A61K39/00 , A61P31/04
摘要： 本发明涉及一种hLYZ‑TLN‑58基因融合蛋白，构建步骤如下：⑴根据TLN‑58基因碱基序列GI：AP02750和hLYZ基因标准序列GI：NC_000012.10，优化得到在小鼠体内高效表达的hLYZ‑TLN‑58基因SEQ ID NO.9；⑵PCR扩增hLYZ‑TLN‑58基因；⑶重组原核表达载体pGEX‑4T‑1‑hLYZ‑TLN‑58表达纯化获得hLYZ‑TLN‑58基因融合蛋白。本发明构建的重组原核质粒所表达的蛋白对实验菌株表现出良好的抑菌活性，为临床预防和治疗细菌性疾病提供了新的治疗思路和实验依据。
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公开(公告)号：CN109439686A
公开(公告)日：2019-03-08
申请号：CN201811405595.3
申请日：2018-11-23
申请人： 天津农学院
摘要： 本发明公开了一种重组减毒沙门氏菌LH430及其制备方法和用途，利用蜂毒肽MEL基因和肿瘤靶向肽RGD基因，将目的基因克隆到pMD-18-T载体中，线性化重组穿梭载体后构建重组真核表达载体pEGFP-RGD-MEL，将其转化至感受态LH430，构建了包含上述目的基因的重组减毒沙门氏菌LH430；用重组减毒沙门氏菌LH430侵染黑色素瘤细胞B16，使其表达RGD-MEL基因；评价RGD-MEL基因共表达的减毒沙门氏菌LH430对B16细胞的抑瘤效果。
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公开(公告)号：CN112458115B
公开(公告)日：2022-06-07
申请号：CN202011130455.7
申请日：2020-10-21
申请人： 天津农学院
IPC分类号： C12N15/85 , C12N15/66 , C12N15/40 , C12N15/38 , A61K39/12 , A61K39/245 , A61P31/14 , A61P31/22
摘要： 本发明涉及一种PRRSV GP5片段、表位预测序列GRE及PRV gB基因三联表位基因重组真核表达质粒pEGFP‑GRE‑GP5gB，其构建步骤如下：⑴GRE基因序列的设计与合成，PRV gB基因的偏好性密码子优化；⑵构建重组穿梭载体pEGFP‑GRE‑GP5gB；⑶在Marc145及PK15细胞中转染重组质粒pEGFP‑GRE‑GP5gB，能表达目的蛋白，即得重组真核表达质粒pEGFP‑GRE‑GP5gB。本发明旨在构建可以预防针对多株PRRSV，同时可以预防PRV的重组真核质粒，为畜牧业两种疾病的防治提供一定的试验依据。
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公开(公告)号：CN112457409B
公开(公告)日：2022-05-03
申请号：CN202011132302.6
申请日：2020-10-21
申请人： 天津农学院
IPC分类号： C07K19/00 , C12N9/36 , C12N15/70 , A61K38/17 , A61K38/47 , A61K47/55 , A61K39/00 , A61P31/04
摘要： 本发明涉及一种hLYZ‑TLN‑58基因融合蛋白，构建步骤如下：⑴根据TLN‑58基因碱基序列GI：AP02750和hLYZ基因标准序列GI：NC_000012.10，优化得到在小鼠体内高效表达的hLYZ‑TLN‑58基因SEQ ID NO.9；⑵PCR扩增hLYZ‑TLN‑58基因；⑶重组原核表达载体pGEX‑4T‑1‑hLYZ‑TLN‑58表达纯化获得hLYZ‑TLN‑58基因融合蛋白。本发明构建的重组原核质粒所表达的蛋白对实验菌株表现出良好的抑菌活性，为临床预防和治疗细菌性疾病提供了新的治疗思路和实验依据。
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公开(公告)号：CN112458115A
公开(公告)日：2021-03-09
申请号：CN202011130455.7
申请日：2020-10-21
申请人： 天津农学院
IPC分类号： C12N15/85 , C12N15/66 , C12N15/40 , C12N15/38 , A61K39/12 , A61K39/245 , A61P31/14 , A61P31/22
摘要： 本发明涉及一种PRRSV GP5片段、表位预测序列GRE及PRV gB基因三联表位基因重组真核表达质粒pEGFP‑GRE‑GP5gB，其构建步骤如下：⑴GRE基因序列的设计与合成，PRV gB基因的偏好性密码子优化；⑵构建重组穿梭载体pEGFP‑GRE‑GP5gB；⑶在Marc145及PK15细胞中转染重组质粒pEGFP‑GRE‑GP5gB，能表达目的蛋白，即得重组真核表达质粒pEGFP‑GRE‑GP5gB。本发明旨在构建可以预防针对多株PRRSV，同时可以预防PRV的重组真核质粒，为畜牧业两种疾病的防治提供一定的试验依据。
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公开(公告)号：CN109439686B
公开(公告)日：2022-07-01
申请号：CN201811405595.3
申请日：2018-11-23
申请人： 天津农学院
摘要： 本发明公开了一种重组减毒沙门氏菌LH430及其制备方法和用途，利用蜂毒肽MEL基因和肿瘤靶向肽RGD基因，将目的基因克隆到pMD‑18‑T载体中，线性化重组穿梭载体后构建重组真核表达载体pEGFP‑RGD‑MEL，将其转化至感受态LH430，构建了包含上述目的基因的重组减毒沙门氏菌LH430；用重组减毒沙门氏菌LH430侵染黑色素瘤细胞B16，使其表达RGD‑MEL基因；评价RGD‑MEL基因共表达的减毒沙门氏菌LH430对B16细胞的抑瘤效果。
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公开(公告)号：CN112251389A
公开(公告)日：2021-01-22
申请号：CN202010970300.8
申请日：2020-09-16
申请人： 天津农学院
摘要： 本发明属重组减毒沙门菌领域，具体涉及一种RGD、TAT、GEL三基因重组减毒沙门菌LH430及其构建方法和应用。构建方法包括下述步骤：1)设计基因；2)PCR扩增；3)将获得的目的基因克隆到pMD‑18‑T载体中，构建了包含上述目的基因的重组减毒沙门菌LH430。本发明将RGD对肿瘤细胞的靶向性、TAT对细胞的穿透性、GEL基因的细胞凋亡作用和减毒沙门菌LH430可携带外源基因靶向肿瘤微环境的厌氧区的特性结合起来，构建出能够融合表达上述基因的重组减毒沙门菌，使得RGD‑TAT‑GEL基因能够更好地发挥靶向性及抑制凋亡的作用。
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公开(公告)号：CN112251389B
公开(公告)日：2022-05-03
申请号：CN202010970300.8
申请日：2020-09-16
申请人： 天津农学院
摘要： 本发明属重组减毒沙门菌领域，具体涉及一种RGD、TAT、GEL三基因重组减毒沙门菌LH430及其构建方法和应用。构建方法包括下述步骤：1)设计基因；2)PCR扩增；3)将获得的目的基因克隆到pMD‑18‑T载体中，构建了包含上述目的基因的重组减毒沙门菌LH430。本发明将RGD对肿瘤细胞的靶向性、TAT对细胞的穿透性、GEL基因的细胞凋亡作用和减毒沙门菌LH430可携带外源基因靶向肿瘤微环境的厌氧区的特性结合起来，构建出能够融合表达上述基因的重组减毒沙门菌，使得RGD‑TAT‑GEL基因能够更好地发挥靶向性及抑制凋亡的作用。
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