公开(公告)号：CN110029068B

公开(公告)日：2022-03-25

申请号：CN201910283994.5

申请日：2019-04-10

申请人： 天津科技大学 ,  南京师范大学

发明人： 刘浩 ,  周宇涛 ,  黄和 ,  徐永学 ,  徐晴 ,  曹威

IPC分类号： C12N1/15 ,  C12N15/31 ,  C12N15/80 ,  C12N15/66 ,  C12P7/46 ,  C12P7/48 ,  C12R1/685

摘要： 本发明涉及一种低溶氧条件下高产有机酸的黑曲霉(Aspergillus niger)基因工程菌株，所述基因工程菌株的构建步骤如下：步骤1，构建异源表达vhb基因质粒；所述基因vhb序列片段由黑曲霉3‑磷酸甘油脱氢酶基因启动子PgpdA控制；步骤2，异源表达vhb基因菌株的获得，即得低溶氧条件下高产有机酸的黑曲霉(Aspergillus niger)基因工程菌株。本发明基于黑曲霉产生有机酸的天然特性，通过遗传重组改造黑曲霉的生理特性，获得了一种黑曲霉基因工程菌株，经过实验证实，该黑曲霉基因工程菌株在低溶氧情况下生产有机酸的能力显著提升，为微生物发酵法制备有机酸提供了优良菌种。

公开(公告)号：CN111218408B

公开(公告)日：2021-05-04

申请号：CN202010069216.9

申请日：2020-01-21

申请人： 天津科技大学 ,  南京师范大学

发明人： 刘浩 ,  徐永学 ,  徐晴 ,  黄和 ,  曹威

IPC分类号： C12N1/15 ,  C12N15/80 ,  C12N15/66 ,  C12N15/65 ,  C12P7/46 ,  C12R1/685

摘要： 本发明涉及一株高效生产苹果酸的黑曲霉基因工程菌株，所述黑曲霉基因工程菌株是敲除了柠檬酸转运蛋白基因cexA，并过表达了黑曲霉来源的葡萄糖转运蛋白基因mstC、己糖激酶基因hxkA、磷酸果糖激酶基因pfkA和丙酮酸激酶基因pkiA的黑曲霉基因工程菌株。本发明黑曲霉基因工程菌株生产苹果酸的效率显著提高，经发酵罐分批补料发酵第八天的产量达到195.72～210g/L，苹果酸对葡萄糖的转化率达到1.59～1.64mol/mol，发酵周期较出发菌株缩短一天，由原来的9天缩短至8天。为微生物发酵法制备苹果酸提供了优良菌种。

公开(公告)号：CN111218408A

公开(公告)日：2020-06-02

申请号：CN202010069216.9

申请日：2020-01-21

申请人： 天津科技大学 ,  南京师范大学

发明人： 刘浩 ,  徐永学 ,  徐晴 ,  黄和 ,  曹威

IPC分类号： C12N1/15 ,  C12N15/80 ,  C12N15/66 ,  C12N15/65 ,  C12P7/46 ,  C12R1/685

摘要： 本发明涉及一株高效生产苹果酸的黑曲霉基因工程菌株，所述黑曲霉基因工程菌株是敲除了柠檬酸转运蛋白基因cexA，并过表达了黑曲霉来源的葡萄糖转运蛋白基因mstC、己糖激酶基因hxkA、磷酸果糖激酶基因pfkA和丙酮酸激酶基因pkiA的黑曲霉基因工程菌株。本发明黑曲霉基因工程菌株生产苹果酸的效率显著提高，经发酵罐分批补料发酵第八天的产量达到195.72～210g/L，苹果酸对葡萄糖的转化率达到1.59～1.64mol/mol，发酵周期较出发菌株缩短一天，由原来的9天缩短至8天。为微生物发酵法制备苹果酸提供了优良菌种。

公开(公告)号：CN110029068A

公开(公告)日：2019-07-19

申请号：CN201910283994.5

申请日：2019-04-10

申请人： 天津科技大学 ,  南京师范大学

发明人： 刘浩 ,  周宇涛 ,  黄和 ,  徐永学 ,  徐晴 ,  曹威

IPC分类号： C12N1/15 ,  C12N15/31 ,  C12N15/80 ,  C12N15/66 ,  C12P7/46 ,  C12P7/48 ,  C12R1/685

摘要： 本发明涉及一种低溶氧条件下高产有机酸的黑曲霉(Aspergillus niger)基因工程菌株，所述基因工程菌株的构建步骤如下：步骤1，构建异源表达vhb基因质粒；所述基因vhb序列片段由黑曲霉3-磷酸甘油脱氢酶基因启动子PgpdA控制；步骤2，异源表达vhb基因菌株的获得，即得低溶氧条件下高产有机酸的黑曲霉(Aspergillus niger)基因工程菌株。本发明基于黑曲霉产生有机酸的天然特性，通过遗传重组改造黑曲霉的生理特性，获得了一种黑曲霉基因工程菌株，经过实验证实，该黑曲霉基因工程菌株在低溶氧情况下生产有机酸的能力显著提升，为微生物发酵法制备有机酸提供了优良菌种。

公开(公告)号：CN109207383A

公开(公告)日：2019-01-15

申请号：CN201810985901.9

申请日：2018-08-28

申请人： 天津科技大学

发明人： 刘浩 ,  徐永学

IPC分类号： C12N1/15 ,  C12N15/80 ,  C12N15/90 ,  C12N15/52 ,  C12N15/53 ,  C12N15/55 ,  C12N15/31 ,  C12P7/46 ,  C12R1/685

摘要： 本发明提供一种高产L-苹果酸的黑曲霉(Aspergillus niger)基因工程菌株。本发明还提供一种上述基因工程菌株的构建方法。该方法利用基因敲除技术破坏黑曲霉草酰乙酸水解酶基因(oahA)从而获得了苹果酸高产菌株S2。经过7天摇瓶发酵，可将100g/L的葡萄糖转化成120.4±2.8g/L L-苹果酸，苹果酸对葡萄糖的转化率达到1.62mol/mol，达到理论最高转化率的81％。为苹果酸的工业化生产提供了优良的菌株。

公开(公告)号：CN109207383B

公开(公告)日：2020-08-04

申请号：CN201810985901.9

申请日：2018-08-28

申请人： 天津科技大学

发明人： 刘浩 ,  徐永学

IPC分类号： C12N1/15 ,  C12N15/80 ,  C12N15/90 ,  C12N15/52 ,  C12N15/53 ,  C12N15/55 ,  C12N15/31 ,  C12P7/46 ,  C12R1/685

摘要： 本发明提供一种高产L‑苹果酸的黑曲霉(Aspergillus niger)基因工程菌株。本发明还提供一种上述基因工程菌株的构建方法。该方法利用基因敲除技术破坏黑曲霉草酰乙酸水解酶基因(oahA)从而获得了苹果酸高产菌株S2。经过7天摇瓶发酵，可将100g/L的葡萄糖转化成120.4±2.8g/L L‑苹果酸，苹果酸对葡萄糖的转化率达到1.62mol/mol，达到理论最高转化率的81％。为苹果酸的工业化生产提供了优良的菌株。