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公开(公告)号：CN110684673B
公开(公告)日：2022-02-15
申请号：CN201911068722.X
申请日：2019-11-05
摘要： 本发明涉及L‑苹果酸高产菌株及其应用，其分类命名为黑曲霉（Aspergillus niger）L01，保藏编号为CCTCC NO：M 2019458。本发明以购买自中国工业微生物菌种保藏中心（CICC）的黑曲霉Aspergillus niger CICC NO：40567为出发菌株，采用ARTP物理诱变结合自然筛选得到高产L‑苹果酸的突变株Aspergillus nigerL01，该突变株L‑苹果酸的产量高，不仅能解决黄曲霉菌株发酵过程中产生黄曲霉毒素的问题，而且黑曲霉产柠檬酸的工艺目前在工业上已经成熟，可直接利用现有过剩的柠檬酸生产装置，助推企业的转型升级。
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公开(公告)号：CN110734865A
公开(公告)日：2020-01-31
申请号：CN201911210535.0
申请日：2019-12-02
摘要： 本发明涉及一种低pH条件下高产苹果酸的黑曲霉基因工程菌株，步骤如下：获得pexG基因敲除菌株S914；获得表达苹果酸合酶基因mas*菌株S1016；过表达黑曲霉苹果酸转运蛋白基因dct1，经转化子筛选和潮霉素抗性基因重组获得无筛选标记的过表达dct1菌株S1140，即为低pH条件下高产苹果酸的黑曲霉基因工程菌株。本菌株基于黑曲霉耐酸且产生有机酸的天然特性，通过遗传重组改造黑曲霉的生理特性而获得的，经过实验证实，该黑曲霉基因工程菌株在低pH下生产苹果酸的能力显著提升，为微生物发酵法制备苹果提供了优良菌种。
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公开(公告)号：CN110029068B
公开(公告)日：2022-03-25
申请号：CN201910283994.5
申请日：2019-04-10
摘要： 本发明涉及一种低溶氧条件下高产有机酸的黑曲霉(Aspergillus niger)基因工程菌株，所述基因工程菌株的构建步骤如下：步骤1，构建异源表达vhb基因质粒；所述基因vhb序列片段由黑曲霉3‑磷酸甘油脱氢酶基因启动子PgpdA控制；步骤2，异源表达vhb基因菌株的获得，即得低溶氧条件下高产有机酸的黑曲霉(Aspergillus niger)基因工程菌株。本发明基于黑曲霉产生有机酸的天然特性，通过遗传重组改造黑曲霉的生理特性，获得了一种黑曲霉基因工程菌株，经过实验证实，该黑曲霉基因工程菌株在低溶氧情况下生产有机酸的能力显著提升，为微生物发酵法制备有机酸提供了优良菌种。
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公开(公告)号：CN111218408B
公开(公告)日：2021-05-04
申请号：CN202010069216.9
申请日：2020-01-21
摘要： 本发明涉及一株高效生产苹果酸的黑曲霉基因工程菌株，所述黑曲霉基因工程菌株是敲除了柠檬酸转运蛋白基因cexA，并过表达了黑曲霉来源的葡萄糖转运蛋白基因mstC、己糖激酶基因hxkA、磷酸果糖激酶基因pfkA和丙酮酸激酶基因pkiA的黑曲霉基因工程菌株。本发明黑曲霉基因工程菌株生产苹果酸的效率显著提高，经发酵罐分批补料发酵第八天的产量达到195.72～210g/L，苹果酸对葡萄糖的转化率达到1.59～1.64mol/mol，发酵周期较出发菌株缩短一天，由原来的9天缩短至8天。为微生物发酵法制备苹果酸提供了优良菌种。
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公开(公告)号：CN111218408A
公开(公告)日：2020-06-02
申请号：CN202010069216.9
申请日：2020-01-21
摘要： 本发明涉及一株高效生产苹果酸的黑曲霉基因工程菌株，所述黑曲霉基因工程菌株是敲除了柠檬酸转运蛋白基因cexA，并过表达了黑曲霉来源的葡萄糖转运蛋白基因mstC、己糖激酶基因hxkA、磷酸果糖激酶基因pfkA和丙酮酸激酶基因pkiA的黑曲霉基因工程菌株。本发明黑曲霉基因工程菌株生产苹果酸的效率显著提高，经发酵罐分批补料发酵第八天的产量达到195.72～210g/L，苹果酸对葡萄糖的转化率达到1.59～1.64mol/mol，发酵周期较出发菌株缩短一天，由原来的9天缩短至8天。为微生物发酵法制备苹果酸提供了优良菌种。
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公开(公告)号：CN110684673A
公开(公告)日：2020-01-14
申请号：CN201911068722.X
申请日：2019-11-05
摘要： 本发明涉及L-苹果酸高产菌株及其应用，其分类命名为黑曲霉（Aspergillus niger）L01，保藏编号为CCTCC NO：M 2019458。本发明以购买自中国工业微生物菌种保藏中心（CICC）的黑曲霉Aspergillus niger CICC NO：40567为出发菌株，采用ARTP物理诱变结合自然筛选得到高产L-苹果酸的突变株Aspergillus nigerL01，该突变株L-苹果酸的产量高，不仅能解决黄曲霉菌株发酵过程中产生黄曲霉毒素的问题，而且黑曲霉产柠檬酸的工艺目前在工业上已经成熟，可直接利用现有过剩的柠檬酸生产装置，助推企业的转型升级。
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公开(公告)号：CN110029068A
公开(公告)日：2019-07-19
申请号：CN201910283994.5
申请日：2019-04-10
摘要： 本发明涉及一种低溶氧条件下高产有机酸的黑曲霉(Aspergillus niger)基因工程菌株，所述基因工程菌株的构建步骤如下：步骤1，构建异源表达vhb基因质粒；所述基因vhb序列片段由黑曲霉3-磷酸甘油脱氢酶基因启动子PgpdA控制；步骤2，异源表达vhb基因菌株的获得，即得低溶氧条件下高产有机酸的黑曲霉(Aspergillus niger)基因工程菌株。本发明基于黑曲霉产生有机酸的天然特性，通过遗传重组改造黑曲霉的生理特性，获得了一种黑曲霉基因工程菌株，经过实验证实，该黑曲霉基因工程菌株在低溶氧情况下生产有机酸的能力显著提升，为微生物发酵法制备有机酸提供了优良菌种。
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公开(公告)号：CN118755750A
公开(公告)日：2024-10-11
申请号：CN202411239470.3
申请日：2024-09-05
申请人： 南京师范大学
IPC分类号： C12N15/80 , C12N15/113 , C12N9/22 , G01N30/02 , C12Q1/6869 , C12Q1/6895 , C12P7/42 , C12N1/15 , C12R1/645
摘要： 本发明涉及微生物基因改造技术，公开了一种微生物基因改造靶点的鉴定方法及其应用。该鉴定方法包括以下步骤：将外源Cas效应蛋白表达框整合到原始菌株中得到改造工程菌，合成靶向原始菌株的基因组编码区的sgRNA文库；将所述sgRNA文库导入所述改造工程菌中获得多个突变菌株；将多个所述突变菌株进行发酵筛选得到目标产物产量高于原始菌株的突变菌株作为目标菌株；对目标菌株进行基因测序，鉴定提高原始菌株合成目标产物能力的基因组靶点。该靶点鉴定方法能够方便、快捷地鉴定出微生物的新靶点，获得高产目标产物的突变菌株，为微生物菌株的代谢工程改造提供了新的平台。
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公开(公告)号：CN117821417B
公开(公告)日：2024-09-24
申请号：CN202410058726.4
申请日：2024-01-16
IPC分类号： C12N9/14 , C12N15/55 , C12N1/21 , C12N15/70 , C12P41/00 , C12P7/22 , C12P17/02 , C12P17/14 , C12R1/19
摘要： 本发明公开了一种卤醇脱卤酶突变体、编码基因、质粒、基因工程菌及其应用，本发明制得的基因工程菌在催化合成(R)‑1‑氯‑3‑苯氧基‑2‑丙醇、(S)‑邻硝基苯基缩水甘油醚、(S)‑对硝基苯基缩水甘油醚、(S)‑4‑(苯氧基甲基)‑2‑恶唑烷酮，(S)‑4‑(2‑硝基苯氧基甲基)‑2‑恶唑烷酮，(S)‑4‑(4‑硝基苯氧基甲基)‑2‑恶唑烷酮时的立体选择性较高，相较卤醇脱卤原始酶的催化合成拆分的纯度和收率更高，反应时间更快，有利于工业生产。
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公开(公告)号：CN118294661B
公开(公告)日：2024-09-10
申请号：CN202410726479.0
申请日：2024-06-06
申请人： 南京师范大学
IPC分类号： G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/58 , B01L3/00 , C12N15/115
摘要： 本发明涉及微生物筛选技术，公开了一种基于双乳液体系的高通量筛选微生物菌株的方法及其应用。该方法包括：建立微生物突变体库，构建微流控双乳液芯片；利用微流控双乳液芯片对微生物突变体库中的菌株进行包埋形成双乳液液滴，液滴的内相含有微生物突变体库菌株的培养液与具有生物相容性的溶液的混合物、中间相含有能够特异性结合目标产物的靶标结合元件、外相为含有表面活性剂的氟化油；将双乳液液滴固化成核壳微球后进行培养，利用微球中靶标结合元件与目标产物结合形成指示信号，以对微球进行微流控分选。该高通量筛选方法保证了菌株生长的环境，筛选信号稳定准确，大大提高了筛选的精确性，且适用于小分子有机物的检测。
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