用于全基因组甲基化重亚硫酸氢盐测序的文库构建方法

    公开(公告)号:CN105349528A

    公开(公告)日:2016-02-24

    申请号:CN201510857413.6

    申请日:2015-11-30

    IPC分类号: C12N15/10 C12Q1/68 C40B50/06

    摘要: 本发明提供一种用于全基因组甲基化重亚硫酸氢盐测序的文库构建方法,其适用于中量级别(5~200ng)的起始样本量。该文库构建方法包括从5~200ng的基因组DNA得到片段化的基因组DNA;对上述片段化的基因组DNA进行重亚硫酸氢盐处理,得到单链的重亚硫酸氢盐处理产物;以上述单链的重亚硫酸氢盐处理产物为模板,使用含生物素标记的oligo1引物合成第一条链;使用核酸外切酶消化第一条链合成后体系中的单链DNA;使用链亲和素磁珠调取生物素标记的第一条链;以上述生物素标记的第一条链为模板,使用oligo2引物合成第二条链;以及,以所述第二条链作为模板进行PCR扩增,从而构建二代测序用DNA文库。