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公开(公告)号：CN108103180B
公开(公告)日：2021-07-30
申请号：CN201611051061.6
申请日：2016-11-24
IPC分类号： C12Q1/6883 , C40B40/08 , C40B50/06
摘要： 本发明提供一种可用于无创产前单基因病检测的DNA文库的构建方法。本发明的构建测序用DNA文库的方法将加接头DNA片段进行PCR扩增、得到第一次扩增产物的步骤，将所述第一次扩增产物用所述限制性内切酶进行酶切、得到酶切产物的步骤，以及将所述酶切产物进行自身连接、得到包含双链环化产物的DNA混合物的步骤。
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公开(公告)号：CN106609299B
公开(公告)日：2020-08-28
申请号：CN201510695128.9
申请日：2015-10-22
IPC分类号： C12Q1/6851 , C12N15/11
摘要： 本发明提供一种可用于测定孕妇血浆中胎儿游离DNA浓度的试剂盒，该试剂盒包含用于对从孕妇血浆中提取的游离DNA进行消化的甲基化酶；用于测定从孕妇血浆中提取的游离DNA的浓度的试剂；以及，用于测定经所述甲基化酶消化后的从孕妇血浆中提取的游离DNA的浓度的试剂。采用本发明的试剂盒对孕妇血浆中胎儿游离DNA的浓度进行测定时，测定值与真实值之间具有良好的相关性。本发明的引物组由上游引物及下游引物组成，所述上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，所述下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示。
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公开(公告)号：CN105349528B
公开(公告)日：2019-06-28
申请号：CN201510857413.6
申请日：2015-11-30
IPC分类号： C12N15/10 , C12Q1/6806 , C40B50/06
摘要： 本发明提供一种用于全基因组甲基化重亚硫酸氢盐测序的文库构建方法，其适用于中量级别(5～200ng)的起始样本量。该文库构建方法包括从5～200ng的基因组DNA得到片段化的基因组DNA；对上述片段化的基因组DNA进行重亚硫酸氢盐处理，得到单链的重亚硫酸氢盐处理产物；以上述单链的重亚硫酸氢盐处理产物为模板，使用含生物素标记的oligo1引物合成第一条链；使用核酸外切酶消化第一条链合成后体系中的单链DNA；使用链亲和素磁珠调取生物素标记的第一条链；以上述生物素标记的第一条链为模板，使用oligo2引物合成第二条链；以及，以所述第二条链作为模板进行PCR扩增，从而构建二代测序用DNA文库。
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公开(公告)号：CN106283198B
公开(公告)日：2021-08-13
申请号：CN201610701005.6
申请日：2016-08-22
摘要： 本发明提供了一种单细胞全基因组重亚硫酸氢盐测序用文库的构建方法。具体地涉及一种改进的重亚硫酸氢盐测序用文库的构建方法。该建库方法包括：单细胞裂解；重亚硫酸氢盐处理；以重亚硫酸氢盐处理产物为模板的一链及二链合成；以及以二链合成产物为模板构建测序用文库。其中在重亚硫酸氢盐处理后的纯化步骤中，加入了tRNA，提高了处理产物的纯化及回收效率。采用本发明的文库构建方法，减少了样本的损失，提高了测序数据的比对率。
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公开(公告)号：CN106701748B
公开(公告)日：2019-08-09
申请号：CN201510789800.0
申请日：2015-11-17
摘要： 本发明提供一种对于各种来源的人线粒体基因组均能够高品质地进行PCR扩增的引物组、包含该引物组的PCR扩增用试剂盒以及使用该引物组的PCR扩增方法。本发明的引物组由上游引物及下游引物组成，所述上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，所述下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示。
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公开(公告)号：CN108103180A
公开(公告)日：2018-06-01
申请号：CN201611051061.6
申请日：2016-11-24
IPC分类号： C12Q1/6883 , C40B40/08 , C40B50/06
摘要： 本发明提供一种可用于无创产前单基因病检测的DNA文库的构建方法。本发明的构建测序用DNA文库的方法将加接头DNA片段进行PCR扩增、得到第一次扩增产物的步骤，将所述第一次扩增产物用所述限制性内切酶进行酶切、得到酶切产物的步骤，以及将所述酶切产物进行自身连接、得到包含双链环化产物的DNA混合物的步骤。
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公开(公告)号：CN108103052B
公开(公告)日：2021-05-07
申请号：CN201611050351.9
申请日：2016-11-24
IPC分类号： C12N15/10 , C40B50/06 , C12Q1/6844
摘要： 本发明提供一种提高基因组覆盖度的单细胞全基因组扩增及文库构建方法。本发明的单细胞基因组扩增方法，采用多重置换扩增方法对单细胞基因组进行扩增，其包括：使一组引物、DNA聚合酶和单细胞基因组在溶液中接触；以及对所述溶液进行扩增，使得进行所述单细胞基因组的扩增反应；其中，所述扩增的时间为0.5小时以上且2小时以下。
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公开(公告)号：CN105506084B
公开(公告)日：2019-02-15
申请号：CN201511001306.X
申请日：2015-12-28
IPC分类号： C12Q1/6806 , C12N15/10 , C40B50/06
摘要： 本发明提供一种快速高效地检测基因组DNA羟甲基化的方法及试剂盒。该方法包括：用限制性内切酶MspI酶切基因组DNA，得到酶切片段；在所述酶切片段的两端分别连接P5接头和P7接头，得到加接头的酶切片段；对所述加接头的酶切片段进行糖基化处理，使其中的羟甲基化碱基转化为糖基羟甲基化碱基，得到包含糖基羟甲基化碱基的酶切片段；将所述包含糖基羟甲基化碱基的酶切片段再次用限制性内切酶MspI酶切，得到二次酶切产物；对所述二次酶切产物进行PCR扩增，得到测序用DNA文库；以及，对所述测序用DNA文库进行二代测序。与传统的RRHP方法相比，该方法无需使用包含双脱氧核糖核苷酸的接头。
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公开(公告)号：CN108103052A
公开(公告)日：2018-06-01
申请号：CN201611050351.9
申请日：2016-11-24
IPC分类号： C12N15/10 , C40B50/06 , C12Q1/6844
摘要： 本发明提供一种提高基因组覆盖度的单细胞全基因组扩增及文库构建方法。本发明的单细胞基因组扩增方法，采用多重置换扩增方法对单细胞基因组进行扩增，其包括：使一组引物、DNA聚合酶和单细胞基因组在溶液中接触；以及对所述溶液进行扩增，使得进行所述单细胞基因组的扩增反应；其中，所述扩增的时间为0.5小时以上且2小时以下。
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公开(公告)号：CN107217310A
公开(公告)日：2017-09-29
申请号：CN201710650277.2
申请日：2017-08-01
申请人： 安诺优达基因科技(北京)有限公司
IPC分类号： C40B50/06
CPC分类号： C12Q1/6806 , C12N15/1093 , C40B50/06 , C12Q2525/191 , C12Q2525/173 , C12Q2531/113
摘要： 本发明提供一种用于染色体异常检测的文库构建方法，通过对反应体系及反应条件的优化，实现了对羊水、脐血等少量样本的文库构建，缩短患者在临床染色体异常检测的等待时间。
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