一种飞蝗ObstructorC和ObstructorD1基因dsRNA及其应用

    公开(公告)号:CN117965553A

    公开(公告)日:2024-05-03

    申请号:CN202410168763.0

    申请日:2024-02-06

    申请人: 山西大学

    摘要: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种飞蝗ObstructorC和ObstructorD1基因dsRNA及其应用,所述ObstructorC基因片段的核苷酸序列为SEQ ID NO:5所示的序列,所述ObstructorD1基因片段的核苷酸序列为SEQ ID NO:6所示的序列,本发明将由飞蝗ObstructorC和ObstructorD1基因片段合成的dsRNA在飞蝗卵期浆膜表皮形成开始前分别注射进入不同的飞蝗卵的卵孔处,出现表皮变薄导致飞蝗卵停止发育并死亡和表皮出现两种差异较大的表型最终导致飞蝗卵膨大死亡,最终死亡率都为100%,同时在这两种表型下飞蝗卵的抗干燥能力也都发生了显著下降。本发明飞蝗ObstructorC和ObstructorD1基因片段合成的dsRNA对飞蝗具有较高的致死率,对于害虫防治具有重要的现实意义,可为害虫防治提供新的途径。

    酸枣仁水提物中9种入血成分的同时定量测定方法

    公开(公告)号:CN109239224B

    公开(公告)日:2021-07-02

    申请号:CN201811209768.4

    申请日:2018-10-17

    IPC分类号: G01N30/02 G01N30/06

    摘要: 本发明属中成药体内代谢研究技术领域,为解决目前酸枣仁入血成分定量分析中HPLC‑UV灵敏度低时间过长,不适合分析血浆中微量成分;LC‑MS/MS仅用于测定单一成分的药动学,不利于中药药动学的研究的问题,提供一种酸枣仁水提物中9种入血成分的同时定量测定方法。用UHPLC‑Q Exactive Orbitrap HR/MS同时定量测定酸枣仁水提物中9种入血成分;提高检测灵敏度,缩短分析时间;实现了对黄酮、皂苷和生物碱类三种极性化合物的同时定量分析;为酸枣仁在正常与PCPA失眠模型大鼠体内的药代动力学研究提供分析技术保障,为其他口服中药多组分同时定量分析提供参考。

    一种飞蝗LmCDA2纯合突变体及其制备方法、RNP复合物和应用

    公开(公告)号:CN118222639A

    公开(公告)日:2024-06-21

    申请号:CN202410255648.7

    申请日:2024-03-06

    申请人: 山西大学

    摘要: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种飞蝗LmCDA2纯合突变体及其制备方法、RNP复合物和应用,一种制备飞蝗LmCDA2纯合突变体的方法,包括以下步骤:S1,构建LmCDA2基因敲除RNP复合物,其包括从5’端到3’端的以下可操作性连接的元件:T7启动子,LmCDA2基因敲除靶点和tracRNA‑crRNA转录而成的sgRNA,Cas9蛋白;S2,将步骤S1所述的LmCDA2基因敲除RNP复合物共转新鲜飞蝗卵,孵化,得G0代,发育至3龄若虫时通过PCR及测序,从G0代飞蝗中筛选出G0代突变体,将G0代与野生型杂交得到G1代,发育至3龄若虫时通过PCR及测序,从G1代飞蝗中筛选出G1代突变体;S3,将步骤S2得到的G1代突变体自交,得到G2代,从G2代飞蝗中筛选出G2代突变体,即为飞蝗LmCDA2纯合突变体。本发明通过CRISPR/Cas9技术,首次构建并获得了飞蝗LmCDA2纯合突变体,该突变体卵期浆膜表皮的形成和功能被显著,且导致其在卵期死亡,致死率为100%。

    飞蝗脱水抗性基因LmDesi及其dsRNA的应用

    公开(公告)号:CN113512557A

    公开(公告)日:2021-10-19

    申请号:CN202110407479.0

    申请日:2021-04-15

    申请人: 山西大学

    IPC分类号: C12N15/54 C12N15/113 A01P7/04

    摘要: 本发明涉及生物技术领域,具体涉及一种飞蝗脱水抗性基因LmDesi及其dsRNA的应用。飞蝗脱水抗性基因LmDesi的全长序列的核苷酸序列为SEQ IDNO:1。以所述脱水抗性基因LmDesi克隆载体为模板,根据SEQ ID NO:1设计上游引物SEQID NO:3和下游引物SEQ ID NO:4,通过PCR扩增获得SEQID NO:2,其产物含有T7启动子;产物经纯化后按照试剂盒说明体外转录合成dsRNA,合成的dsRNA应用在飞蝗干燥适应中。

    一种基于改性生物炭的土壤重金属移除方法

    公开(公告)号:CN109622592A

    公开(公告)日:2019-04-16

    申请号:CN201811409648.9

    申请日:2018-11-23

    申请人: 山西大学

    发明人: 刘爽 刘勇 张敏 石伟

    IPC分类号: B09C1/08

    CPC分类号: B09C1/08 B09C2101/00

    摘要: 一种基于改性生物炭的土壤重金属移除方法,属于土壤重金属污染修复技术领域,其特征在于:将装有改性生物炭的网袋埋入重金属污染的土壤中,放置20~60天从土壤中取出,重金属附着改性生物炭从土壤中移除。本发明使作物秸秆、畜禽粪便等农业废弃物得到有效利用,原料充足易获取,且生产成本低廉,技术简单易操作,修复所需时间短,便于大范围的推广使用。

    酸枣仁水提物中9种入血成分的同时定量测定方法

    公开(公告)号:CN109239224A

    公开(公告)日:2019-01-18

    申请号:CN201811209768.4

    申请日:2018-10-17

    IPC分类号: G01N30/02 G01N30/06

    摘要: 本发明属中成药体内代谢研究技术领域,为解决目前酸枣仁入血成分定量分析中HPLC-UV灵敏度低时间过长,不适合分析血浆中微量成分;LC-MS/MS仅用于测定单一成分的药动学,不利于中药药动学的研究的问题,提供一种酸枣仁水提物中9种入血成分的同时定量测定方法。用UHPLC-Q Exactive Orbitrap HR/MS同时定量测定酸枣仁水提物中9种入血成分;提高检测灵敏度,缩短分析时间;实现了对黄酮、皂苷和生物碱类三种极性化合物的同时定量分析;为酸枣仁在正常与PCPA失眠模型大鼠体内的药代动力学研究提供分析技术保障,为其他口服中药多组分同时定量分析提供参考。

    Retroactive基因及其dsRNA在害虫防治中的应用

    公开(公告)号:CN104789571B

    公开(公告)日:2017-12-05

    申请号:CN201510160194.6

    申请日:2015-04-07

    申请人: 山西大学

    摘要: 本发明提供一种Retroactive基因及其dsRNA在害虫防治中的应用。具体为从飞蝗转录组数据库中搜索获得Retroactive基因片段,对其进行全长克隆,测序后获得Retroactive基因全长cDNA序列,其核苷酸及其编码的氨基酸序列分别为SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2,进一步设计核苷酸序列为SEQ ID NO:7的片段合成相应dsRNA,并将其注射进入飞蝗体腔中,飞蝗出现无法蜕去旧表皮最终死亡,致死率达到91.2%。由于其高效的致死率,为害虫防治提供新的分子靶标位点,对于害虫有效控制具有重要的意义。

    Retroactive基因及其dsRNA在害虫防治中的应用

    公开(公告)号:CN104789571A

    公开(公告)日:2015-07-22

    申请号:CN201510160194.6

    申请日:2015-04-07

    申请人: 山西大学

    摘要: 本发明提供一种Retroactive基因及其dsRNA在害虫防治中的应用。具体为从飞蝗转录组数据库中搜索获得Retroactive基因片段,对其进行全长克隆,测序后获得Retroactive基因全长cDNA序列,其核苷酸及其编码的氨基酸序列分别为SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2,进一步设计核苷酸序列为SEQ ID NO:7的片段合成相应dsRNA,并将其注射进入飞蝗体腔中,飞蝗出现无法蜕去旧表皮最终死亡,致死率达到91.2%。由于其高效的致死率,为害虫防治提供新的分子靶标位点,对于害虫有效控制具有重要的意义。

    昆虫几丁质去乙酰基酶基因1及其在害虫防治中的应用

    公开(公告)号:CN104630247A

    公开(公告)日:2015-05-20

    申请号:CN201510080636.6

    申请日:2015-02-13

    申请人: 山西大学

    摘要: 本发明提供一种昆虫几丁质去乙酰基酶基因1(CDA1)全长序列及其在农业害虫防治中的应用。具体为通过生物信息学方法,从飞蝗转录组中获取几丁质去乙酰基酶基因1片段,进一步调取获得序列为SEQ ID NO:1基因全长。依据SEQ ID NO:1,设计并合成该基因的dsRNA,将其注射进入飞蝗体腔后可以特异性沉默靶标基因,从而使飞蝗难以脱去旧表皮导致死亡。多次实验表明其致死率达到94.7%以上。由于本发明的特异性及高效的致死率,对于害虫防治具有重要的现实意义,可以为害虫防治提供新的途径。

    一种飞蝗ObstructorA1和ObstructorA2基因dsRNA及其应用

    公开(公告)号:CN118147155A

    公开(公告)日:2024-06-07

    申请号:CN202410168766.4

    申请日:2024-02-06

    申请人: 山西大学

    摘要: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种飞蝗ObstructorA1和ObstructorA2基因dsRNA及其应用,所述飞蝗ObstructorA1基因片段的核苷酸序列为SEQ ID NO:5所示的序列;所述飞蝗ObstructorA2基因片段的核苷酸序列为SEQ ID NO:6所示的序列,本发明将飞蝗ObstructorA1和ObstructorA2基因片段合成的dsRNA在飞蝗卵期浆膜表皮形成前分别注射进入不同的飞蝗卵孔处,出现浆膜表皮几乎未生成并最终都使得卵期发育停滞死亡,且死亡率都为100%,同时飞蝗卵的抗干燥能力也都发生了显著下降。本发明飞蝗ObstructorA1和ObstructorA2基因片段合成的dsRNA对飞蝗都具有较高的致死率,对于害虫防治具有重要的现实意义,可为害虫防治提供新的途径。