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公开(公告)号：CN118356484A
公开(公告)日：2024-07-19
申请号：CN202410472407.8
申请日：2024-04-19
申请人： 华南农业大学 , 广东温氏大华农生物科技有限公司 , 肇庆大华农生物药品有限公司 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心
IPC分类号： A61K39/255 , C12N7/00 , C12N5/077 , A61P31/22 , C12R1/93
摘要： 本申请属于生物制药技术领域，公开了一种MD疫苗的制备方法，该方法先挑选鸡胚、消毒、取鸡胚细胞并培养，得到鸡胚成纤维细胞；再将病毒毒株接种至鸡胚成纤维细胞培养并收获感染细胞，随后将收获得到的感染细胞配苗、分装、冻存，其中冻存时使用程序降温仪冻存，所述程序降温仪的程序为：将箱体预冻至4℃，放入安瓿瓶预冷30min，以0.8～1.2℃/min的速率将苗温降至‑40℃；再以8～12℃/min的速率将苗温降至‑100℃，移入液氮保存，本申请通过上述设计得到了一种MD疫苗的制备方法，该方法具有制备速度快，疫苗数量大等优点，更加适合MD疫苗的大规模制备，此外，本申请还公开了一种MD疫苗。
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公开(公告)号：CN108635574A
公开(公告)日：2018-10-12
申请号：CN201810461794.X
申请日：2018-05-15
申请人： 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司 , 华南农业大学 , 肇庆大华农生物药品有限公司 , 甘肃健顺生物科技有限公司
IPC分类号： A61K39/145 , A61P31/16 , A61K39/12 , A61P31/14 , C12N7/00
CPC分类号： A61K39/12 , A61K2039/5252 , A61K2039/552 , A61K2039/70 , A61P31/14 , A61P31/16 , C12N7/00 , C12N2760/16134 , C12N2760/16151 , C12N2770/24034 , C12N2770/24051 , A61K2300/00
摘要： 本发明公开一种生产鸭坦布苏、禽流感二联灭活疫苗的方法及其产品，该方法包括以下步骤：用EB66传代细胞分别接种鸭坦布苏、禽流感病毒株；在病毒ELD50或EID50效价达到最高时分别收获鸭坦布苏、禽流感病毒并保存；分别灭活鸭坦布苏、禽流感病毒；将灭活后的鸭坦布苏和禽流感病毒在吐温-80中完全混合，得到病毒混合液，在病毒混合液中加入已灭菌的油相佐剂，混合乳化，配制成鸭坦布苏、禽流感二联灭活疫苗。本发明通过采用EB66传代细胞系分别进行鸭坦布苏和禽流感病毒的培养，然后制备成的鸭坦布苏、禽流感二联疫苗具有生产工艺稳定、批间差异小、质量可控、产量和质量显著提高等优点。
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公开(公告)号：CN107058243A
公开(公告)日：2017-08-18
申请号：CN201710179331.X
申请日：2017-03-23
申请人： 华南农业大学 , 肇庆大华农生物药品有限公司
CPC分类号： C12N7/00 , C12N2710/16351
摘要： 本发明公开了一种马立克氏病毒的悬浮培养方法，包括步骤：1)鸡胚源DF‑1细胞系的传代与培养；2)细胞毒种的繁殖：用稀释液将马立克氏病毒种稀释，将病毒和DF‑1细胞一起接入含细胞培养液的培养瓶中培养，收获病毒作为毒种；3)制苗用病毒的吸附培养：将毒种稀释为病毒液，和新的鸡胚源DF‑1细胞一起接入含有微载体和悬浮培养液的培养瓶中，进行悬浮吸附培养；4)病毒的增殖培养及收获：弃去悬浮培养液，加入病毒增殖培养液进行悬浮增殖培养；当接入的细胞病变率达80％以上时，收获病毒液并保存；该方法用微载体结合悬浮的方式对马立克氏病毒进行培养，克服了传统疫苗生产受制于鸡胚的供应的缺点，避免了感染外源病毒的风险。
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公开(公告)号：CN106868216A
公开(公告)日：2017-06-20
申请号：CN201710184042.9
申请日：2017-03-24
申请人： 华南农业大学 , 肇庆大华农生物药品有限公司
CPC分类号： C12Q1/701 , C12Q1/686 , C12Q2545/113
摘要： 本发明公开了一种禽白血病病毒PCR检测引物组及包括该检测引物组的试剂盒，禽白血病病毒PCR检测引物组包括：引物P1、P2、P3和P4；其中P1为上游通用检测引物；P2为检测ALV‑A亚型病毒的下游引物；P3为检测ALV‑B亚型病毒的下游引物；P4为检测ALV‑J亚型病毒的下游引物；该诊断试剂盒，包括：如上所述的禽白血病病毒PCR检测引物组、ALV‑A亚型病毒阳性对照质粒、ALV‑B亚型病毒阳性对照质粒、ALV‑J亚型病毒阳性对照质粒和阴性对照；禽白血病病毒PCR检测引物组能够快速、准确地检测禽类是否患有白血病该亚型病毒。
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公开(公告)号：CN108261543A
公开(公告)日：2018-07-10
申请号：CN201810128488.4
申请日：2018-02-08
申请人： 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司 , 华南农业大学 , 肇庆大华农生物药品有限公司 , 甘肃健顺生物科技有限公司
IPC分类号： A61K39/17 , A61K39/215 , A61K39/145 , C12N7/00 , A61P31/14 , A61P31/16 , C12R1/09
CPC分类号： A61K39/12 , A61K2039/5252 , A61K2039/70 , C12N7/00 , C12N2760/16134 , C12N2760/16152 , C12N2760/18134 , C12N2760/18152 , C12N2770/20034 , C12N2770/20052
摘要： 本发明提供了一种传代细胞源鸡新城疫、传染性支气管炎、禽流感三联灭活疫苗的制备方法及其应用，包括步骤如下：取EB66细胞于生物反应器中进行生长培养，用于病毒接种；采用二阶培养法，向EB66细胞接种新城疫病毒、传染性支气管炎病毒或禽流感病毒；在接毒24h后，病毒EID50达到最高时收获病毒并保存，得到病毒液；重复上述步骤以分别获得新城疫病毒、传染性支气管炎病毒和禽流感病毒液并灭活；将灭活后的新城疫病毒、传染性支气管炎病毒和禽流感病毒液混合，制备灭活疫苗。本发明采用EB66传代细胞系进行鸡新城疫病毒、传染性支气管炎和禽流感病毒的培养，避免了使用鸡胚造成胚体异源蛋白和外源病毒污染的风险，提高病毒的生产品质，简化病毒的生产工艺。
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公开(公告)号：CN106916842A
公开(公告)日：2017-07-04
申请号：CN201710184041.4
申请日：2017-03-24
申请人： 华南农业大学 , 肇庆大华农生物药品有限公司
IPC分类号： C12N15/70 , C07K14/435 , C07K1/113 , C07K1/22 , C07K1/34
CPC分类号： C12N15/70 , C07K14/4359
摘要： 本发明公开一种猫桎首蚤跳蚤唾液过敏原FSA1的表达方法，包括以下步骤：1)使用如SEQ ID No.1和PCR SEQ ID No.2所示的引物对进行PCR扩增；2)构建原核表达载体；3)筛选；4)诱导表达；5)纯化和6)复性。该方法各步骤操作简单，快速高效，是一种针对跳蚤唾液过敏原FSA1原核表达蛋白的纯化工艺，该工艺克服了已有工艺复性后复性浓度小，蛋白易聚集的缺陷，并且大大提高生产效率，降低生产成本，适合工业化大规模生产。
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公开(公告)号：CN108300704A
公开(公告)日：2018-07-20
申请号：CN201810129825.1
申请日：2018-02-08
申请人： 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司 , 华南农业大学 , 肇庆大华农生物药品有限公司 , 甘肃健顺生物科技有限公司
摘要： 本发明提供了一种用传代细胞系悬浮培养传染性支气管炎病毒的方法，包括：步骤1：取EB66细胞进行复苏与传代培养；步骤2：对步骤1所得EB66细胞进行鸡传染性支气管炎病毒的接种培养；步骤3：接毒后的EB66细胞每隔6-12h进行取样，测定病毒的EID50，在病毒EID50达到最高时收获病毒并保存，得到培养后的鸡传染性支气管炎病毒。本发明采用EB66细胞作为鸡传染性支气管炎病毒的培养基质，利用提供用全悬浮传代细胞系EB66细胞进行高效的病毒生产，有效提高支气管炎病毒的培育滴度，从而为实现鸡传染性支气管炎病毒疫苗的大规模培养，降低病毒的培育成本。
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公开(公告)号：CN108300704B
公开(公告)日：2022-04-05
申请号：CN201810129825.1
申请日：2018-02-08
申请人： 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司 , 华南农业大学 , 肇庆大华农生物药品有限公司 , 甘肃健顺生物科技有限公司
摘要： 本发明提供了一种用传代细胞系悬浮培养传染性支气管炎病毒的方法，包括：步骤1：取EB66细胞进行复苏与传代培养；步骤2：对步骤1所得EB66细胞进行鸡传染性支气管炎病毒的接种培养；步骤3：接毒后的EB66细胞每隔6‑12h进行取样，测定病毒的EID50，在病毒EID50达到最高时收获病毒并保存，得到培养后的鸡传染性支气管炎病毒。本发明采用EB66细胞作为鸡传染性支气管炎病毒的培养基质，利用提供用全悬浮传代细胞系EB66细胞进行高效的病毒生产，有效提高支气管炎病毒的培育滴度，从而为实现鸡传染性支气管炎病毒疫苗的大规模培养，降低病毒的培育成本。
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公开(公告)号：CN106916842B
公开(公告)日：2020-10-30
申请号：CN201710184041.4
申请日：2017-03-24
申请人： 华南农业大学 , 肇庆大华农生物药品有限公司
IPC分类号： C12N15/70 , C07K14/435 , C07K1/113 , C07K1/22 , C07K1/34
摘要： 本发明公开一种猫桎首蚤跳蚤唾液过敏原FSA1的表达方法，包括以下步骤：1)使用如SEQ ID No.1和PCR SEQ ID No.2所示的引物对进行PCR扩增；2)构建原核表达载体；3)筛选；4)诱导表达；5)纯化和6)复性。该方法各步骤操作简单，快速高效，是一种针对跳蚤唾液过敏原FSA1原核表达蛋白的纯化工艺，该工艺克服了已有工艺复性后复性浓度小，蛋白易聚集的缺陷，并且大大提高生产效率，降低生产成本，适合工业化大规模生产。
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公开(公告)号：CN109593729A
公开(公告)日：2019-04-09
申请号：CN201811638643.3
申请日：2018-12-29
申请人： 肇庆大华农生物药品有限公司 , 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司 , 华南农业大学 , 甘肃健顺生物科技有限公司
IPC分类号： C12N7/00 , C12N7/02 , A61K39/235 , A61P31/20
摘要： 一种禽减蛋综合征病毒全悬浮培养方法，包括以下步骤：(1)在EB66悬浮传代细胞系中驯化禽减蛋综合征病毒，得到种毒；(2)将EB66细胞接种至生物反应器，使其在pH＝7.20±0.1的条件下进行悬浮培养；(3)按禽减蛋综合征病毒与细胞培养基体积比2/1000的比例，将步骤(1)所得种毒接种EB66细胞，培养pH＝7.40±0.1，在病毒效价达到最高时收获病毒液并保存。采用上述方法制得病毒液具有高纯度、高滴度的特点，将其灭活后制备的禽减蛋综合征疫苗具有生产工艺稳定、批间差异小、质量可控、产量和质量显著提高等优点。
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