猪伪狂犬gE基因缺失病毒灭活疫苗的生产方法

    公开(公告)号:CN107137705B

    公开(公告)日:2018-01-23

    申请号:CN201710317063.3

    申请日:2017-05-08

    摘要: 本发明涉及用BHK细胞系生产猪伪狂犬gE基因缺失病毒灭活疫苗的方法,其包括以下步骤:将BHK21细胞复苏后接入转瓶中培养至细胞长成片后,接入猪伪狂犬gE基因缺失病毒,继续培养,待细胞病变CPE达90%以上,收获细胞毒液,将收获的病毒液进行浓缩、灭活、除菌,制成成品,即得。采用本发明提供的疫苗生产方法收获的猪伪狂犬gE基因缺失病毒液的病毒含量高,达≥107.2TCID50/mL,且具有较强的免疫原性,不需要添加免疫增强剂即可达到好的免疫效果,经免疫后可促进体内分泌中和抗体,免疫保护率达到100%,完全达到疫苗效力评价标准。

    一种全悬浮细胞培养生产猪伪狂犬病毒抗原的方法

    公开(公告)号:CN107142249B

    公开(公告)日:2018-01-23

    申请号:CN201710318022.6

    申请日:2017-05-08

    IPC分类号: C12N7/00 A61K39/245 A61P31/22

    摘要: 本发明涉及一种全悬浮细胞培养生产猪伪狂犬病毒抗原的方法,其包括以下步骤:1)将BHK21细胞进行复苏,用摇瓶悬浮培养扩增,接种至反应器中采用低血清培养基进行悬浮培养,得到悬浮培养细胞液;2)将悬浮培养细胞液中的低血清培养基换成无血清培养基,继续培养,接毒进行病毒培养;3)继续培养BHK21悬浮细胞96~144h,直至死细胞数量达到90%以上,收获细胞悬液,冻融,离心,收集上清,即得病毒液;4)将病毒液进行浓缩、灭活、除菌,即得。本发明所得的猪伪狂犬病毒抗原疫苗效价高,稳定在108.5TCID50/mL以上,且纯度高,质量稳定,显著改善产品品质。

    一种鸭星状病毒疫苗及其制备方法

    公开(公告)号:CN109692329B

    公开(公告)日:2022-05-17

    申请号:CN201910150093.9

    申请日:2019-02-27

    摘要: 本发明公开一种鸭星状病毒疫苗,其是在传代细胞系BHK‑21细胞上接种鸭星状病毒Ⅰ型和Ⅲ型毒种得到的灭活疫苗。用BHK‑21传代细胞进行鸭星状病毒Ⅰ型和Ⅲ型增殖,利用Reed‑Muench方法测定其病毒滴度可以稳定达到106.5‑107.0TCID50/0.1mL。抗原的稳定生产和高滴度是制备疫苗最关键因素,用BHK‑21细胞进行鸭星状病毒Ⅰ型和Ⅲ型增殖其病毒滴度是常规鸭胚法及原代细胞法的10倍以上,如采用生物反应器进行病毒增殖,其病毒滴度可以达到100倍水平。本专利公开的鸭星状病毒(Ⅰ型+Ⅲ型)灭活疫苗,产量高,品质稳定,免疫鸭能产生高水平血清中和抗体,免疫效果好,具有巨大的应用前景。