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公开(公告)号：CN117044833A
公开(公告)日：2023-11-14
申请号：CN202311144951.1
申请日：2023-09-06
Applicant: 广东省农业科学院动物科学研究所 , 广东省农业科学院农业生物基因研究中心
IPC: A23K20/158 , A23K20/121 , A23K20/111 , A23K50/75
Abstract: 本发明公开了一种改善肉鸡生长和肉质风味平衡油脂及其制备方法与应用。属于肉鸡饲养技术领域。该平衡油脂包括如下质量份数的组分：大豆磷脂45～50份、棕榈油30～35份、椰子油10～20份、亚麻籽油5～10份、茴香油2～3份、吐温80 1～2份、改性磷脂1～2份和特丁基对苯二酚2～4份。本发明提供的平衡油脂须依次添加至肉鸡育雏期、生长期及育成期饲料中，饲喂后不仅能够满足肉鸡必需脂肪酸的需求，保障营养供给，促进生长，降低料重比，提升养殖生产成绩，还能改善鸡肉的品质风味。
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公开(公告)号：CN108359712A
公开(公告)日：2018-08-03
申请号：CN201810135075.9
申请日：2018-02-09
Applicant: 广东省农业科学院农业生物基因研究中心
IPC: C12Q1/6811
Abstract: 本发明公开了一种快速高效筛选SgRNA靶向DNA序列的方法，该方法基于SgRNA靶向DNA序列框架，设计多条SgRNA靶向引物；然后以SgRNA载体为模板，通过PCR的方法获得hU6启动子序列+靶向SgRNA序列的DNA片段；接着将其转染到稳定表达Cas9细胞中，48小时后提取基因组；再通过PCR扩增获得含SgRNA靶点的基因组DNA片段，经双向测序分析，从而筛选SgRNA靶向DNA序列切割活性位点。本发明的筛选方法极大地缩短了筛选基因靶点时间，并降低了Crispr-Cas9系统的操作难度，具有操作性强、重复性好、成功率高、使用简单方便、可流程化操作等优点，适合试剂盒的研发。
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公开(公告)号：CN105907721A
公开(公告)日：2016-08-31
申请号：CN201610322402.2
申请日：2016-05-13
Applicant: 广东省农业科学院农业生物基因研究中心
IPC: C12N5/10 , C12N15/867
CPC classification number: C12N5/10 , C12N15/867 , C12N5/0679 , C12N15/86 , C12N2510/00 , C12N2740/15043 , C12N2800/107
Abstract: 本发明公开了一种稳定表达Cas9蛋白的猪肠道上皮细胞系，是以新生仔猪非转化肠道上皮细胞系IPEC?J2为宿主细胞，转染含Cas9的慢病毒表达载体，经过20μg/mL的Blasticidin筛选得到的能够稳定表达Cas9蛋白的转化体。其构建方法为：(1)含Cas9的慢病毒表达载体的构建；(2)转化HEK293T细胞；(3)转染IPEC?J2细胞；(4)单克隆筛选。本发明的猪肠道上皮细胞系IPEC?J2?Cas9，能够稳定表达Cas9蛋白，生长曲线和未转化的IPEC?J2细胞相同，细胞形态与IPEC?J2细胞相同。本发明在研究仔猪肠道上皮细胞生长、分化以及应对外源物质刺激方面具有重要的应用价值。
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公开(公告)号：CN105624194A
公开(公告)日：2016-06-01
申请号：CN201610087909.4
申请日：2016-02-16
Applicant: 广东省农业科学院农业生物基因研究中心
IPC: C12N15/867 , C12N5/10
CPC classification number: C12N15/86 , C12N5/0605 , C12N2740/15043
Abstract: 本发明公开了一种条件性诱导Cas9表达的猪滋养层细胞系及其建立方法和应用，其是将Tet-on系统控制Cas9基因表达的慢病毒载体进行病毒包装，浓缩、纯化；慢病毒与特征的猪滋养层细胞系孵育后换液，添加嘌呤霉素进行药物筛选，将细胞稀释至单个细胞进行培养，得到单个细胞来源的Tet-on调控Cas9表达的猪滋养层细胞系。本发明的猪滋养层细胞系操作简单，使用方便，对于研究一些滋养层细胞的关键功能基因和猪基因靶点的筛选具有潜在的使用价值，这个细胞系将成为研究猪胎盘发育的一个重要的细胞材料，可应用于猪早期胎盘发育和子宫妊娠机制的相关研究，同时对于人类早期胚胎发育的研究也具有很大的参考价值。
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公开(公告)号：CN109480070A
公开(公告)日：2019-03-19
申请号：CN201811634926.0
申请日：2018-12-29
Applicant: 广东省农业科学院农业生物基因研究中心 , 广东省农业科学院动物科学研究所
Abstract: 本发明公开一种饲用益生菌颗粒制剂及其制备方法，属于饲用益生菌加工领域。该颗粒制剂包括由以下按质量份计的组分制成：益生菌粉5～20份、益生菌营养剂5～40份、酸碱调节剂10～20份、崩解剂10～40份、凝胶赋型剂0～10份、粘合剂5～15份、填充剂0～20份、润滑剂0.1～0.5份。本发明的益生菌颗粒制剂可减少颗粒内益生菌细胞与外界接触面积，提高益生菌颗粒储藏稳定性。此外，颗粒制剂可减缓热传导速率，提高益生菌在饲料制粒高温条件下的成活率。本发明提供的制粒技术具有成本低、出料快、工艺稳定，重现性好等优点，适合规模化生产。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN109439584A
公开(公告)日：2019-03-08
申请号：CN201811371823.X
申请日：2018-11-15
Applicant: 广东省农业科学院农业生物基因研究中心
Abstract: 本发明公开一种从大肠杆菌发酵液中快速回收大肠杆菌细胞的方法，属于生化工程后处理技术领域。本发明首先将大肠杆菌发酵液pH值调整至合适范围，然后加入天然安全无毒絮凝剂和促凝剂溶液，充分搅拌使絮凝剂与发酵液中细胞结合并絮凝成团，静置一段时间后移去上层清液，回收下层富含细菌的絮团沉积液。通过这种絮凝沉积方法，可使大肠杆菌发酵液浓缩至原体积1/5～1/10，细菌回收率达90％以上，最高可达98％。本发明通过往发酵液中添加絮凝剂方式使发酵液中大肠杆菌细胞絮凝成团并快速沉降浓缩，可从发酵液中快速回收高浓度菌体，该方法可减少传统喷雾干燥工艺蒸发量，可大大减少设备投资，节省后处理时间，降低生产成本。
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公开(公告)号：CN105886616B
公开(公告)日：2020-08-07
申请号：CN201610248143.3
申请日：2016-04-20
Applicant: 广东省农业科学院农业生物基因研究中心
IPC: C12Q1/6888 , C12N15/113 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种用于猪基因编辑的高效特异性sgRNA识别位点引导序列及其筛选方法，所述筛选方法包括步骤：功能基因筛选及ORF分析、功能基因sgRNA识别位点引导序列预测、全基因组脱靶位点检测、依据脱靶信息与靶位点位置对预测的靶位点打分，排序、结果筛选与统计、算法优化与软件开发。本发明的猪的特异性sgRNA识别位点引导序列经过了严格的筛选与检验，包含所有猪蛋白编码基因的用于CRISPR‑Cas9基因编辑的sgRNA识别位点引导序列；本发明中对特异性sgRNA识别的鉴定、打分和检验算法，以及算法对应的用于预测和评估猪的功能基因sgRNA识别位点引导序列的软件可广泛用于具有全基因组序列的非模式物种的sgRNA特异位点预测。
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公开(公告)号：CN108359712B
公开(公告)日：2020-06-26
申请号：CN201810135075.9
申请日：2018-02-09
Applicant: 广东省农业科学院农业生物基因研究中心
IPC: C12Q1/6811
Abstract: 本发明公开了一种快速高效筛选SgRNA靶向DNA序列的方法，该方法基于SgRNA靶向DNA序列框架，设计多条SgRNA靶向引物；然后以SgRNA载体为模板，通过PCR的方法获得hU6启动子序列+靶向SgRNA序列的DNA片段；接着将其转染到稳定表达Cas9细胞中，48小时后提取基因组；再通过PCR扩增获得含SgRNA靶点的基因组DNA片段，经双向测序分析，从而筛选SgRNA靶向DNA序列切割活性位点。本发明的筛选方法极大地缩短了筛选基因靶点时间，并降低了Crispr‑Cas9系统的操作难度，具有操作性强、重复性好、成功率高、使用简单方便、可流程化操作等优点，适合试剂盒的研发。
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公开(公告)号：CN109666648A
公开(公告)日：2019-04-23
申请号：CN201811541828.2
申请日：2018-12-17
Applicant: 广东省农业科学院农业生物基因研究中心
IPC: C12N5/10 , C12N15/113 , C12N15/867 , C12N15/65
Abstract: 本发明具体涉及一种条件性诱导猪滋养层细胞Aqp11基因敲除细胞系构建方法及应用。所述条件性诱导猪滋养层细胞Aqp11基因敲除细胞系及其构建方法，包括：分别以pLX-sgRNA-EGFP载体为模板，扩增得到hU6和Aqp11靶向sgRNA序列；以hU6和Aqp11靶向sgRNA序列为模板，SEQIDNo:3和SEQIDNo:6为引物进行重叠PCR扩增，得到hU6-Aqp11-sgRNA片段；XhoI和NheI两个酶双酶切pLX-sgRNA-EGFP载体和hU6-Aqp11-sgRNA片段，得到pLX-sgRNA-EGFP载体骨架和hU6-Aqp11-sgRNA粘性末端片段，连接、转化，构建得到pLX-Aqp11-sgRNA-EGFP质粒；pLX-Aqp11-sgRNA-EGFP质粒进行纯化、包装得到携带靶向Aqp11-sgRNA-EGFP的慢病毒，利用该慢病毒侵染条件性表达Cas9的猪滋养层细胞系，即构建得到所述条件性诱导猪滋养层细胞Aqp11基因敲除细胞系。
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公开(公告)号：CN109294959A
公开(公告)日：2019-02-01
申请号：CN201811360957.1
申请日：2018-11-15
Applicant: 广东省农业科学院农业生物基因研究中心
Abstract: 本发明公开一种从芽孢杆菌发酵液中快速回收芽孢杆菌细胞的方法，属于微生物后处理技术领域。本发明首先将芽孢杆菌发酵液pH值调整至合适范围，然后加入天然安全无毒絮凝剂和促凝剂溶液，充分搅拌使絮凝剂与发酵液中细胞结合并絮凝成团，静置一段时间后移去上层清液，回收下层富含细菌的絮团沉积液。通过这种絮凝沉积方法，可使芽孢杆菌发酵液浓缩至原体积1/5～1/9，细菌回收率达90％以上，最高可达97％。本发明通过往发酵液中添加絮凝剂方式使发酵液中芽孢杆菌细胞絮凝成团并快速沉降浓缩，可从发酵液中快速回收高浓度菌体，该方法可减少传统喷雾干燥工艺蒸发量，可大大减少设备投资，节省后处理时间，降低生产成本。
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