公开(公告)号：CN117363547A

公开(公告)日：2024-01-09

申请号：CN202311599883.8

申请日：2023-11-28

Applicant: 广东省农业科学院农业生物基因研究中心 ,  广东益朗生物科技有限公司

Inventor： 邓俊劲 ,  徐家华 ,  李家洲 ,  王志林

IPC: C12N1/20 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种大肠杆菌化学合成培养基，其包括：硫酸镁、氯化钾、磷酸氢二钾、氯化钠、硫酸铵、硫酸铁、氯化钙、烟酸、泛酸、维生素B1、生物素、维生素B6、叶酸、维生素B12、吡哆醛、吡多胺、腺嘌呤、鸟嘌呤、胞嘧啶、黄嘌呤、吐温‑80、乙醇、精氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、苏氨酸、丝氨酸、甲硫氨酸、酪氨酸、甘氨酸、赖氨酸、丙氨酸、组氨酸、半胱氨酸、色氨酸、异亮氨酸、天门冬氨酸、天冬酰胺、羟脯氨酸、谷氨酸、葡萄糖、蛋白质小肽、胸腺嘧啶、尿嘧啶、脂肪。本发明提供的培养基有利于各种天然抗原的分离的同时，又能够保证大肠杆菌的繁殖菌体量。

公开(公告)号：CN115417926A

公开(公告)日：2022-12-02

申请号：CN202210350779.4

申请日：2022-04-02

Applicant: 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司 ,  广东益朗生物科技有限公司 ,  华南农业大学

Inventor： 刘郁夫 ,  徐家华 ,  冯少珍 ,  陈瑞爱

IPC: C07K14/78 ,  C12P21/06 ,  C07K1/34 ,  C07K1/14 ,  C12N5/071 ,  C12N5/00

Abstract: 本发明公开了一种大规模提取筋腱中胶原的方法及应用，首先将动物筋腱绞碎，先将动物筋腱置于碱液中浸泡，过滤，收集筋腱，重复浸泡和过滤若干次后，过滤得到含有胶原的溶液，再进行过滤，得到胶原浓缩液；在胶原浓缩液中加入缓冲液进行稀释，重复过滤稀释和浓缩步骤若干次，过滤浓缩后得到胶原溶液，再调节pH，然后进行酶解，酶解后进行过滤；再进行稀释，继续重复过滤浓缩和稀释步骤若干次，过滤后得到胶原蛋白溶液。该提取方法将碱法提取、酸法提取和酶法提取结合，能有效提取动物筋腱中的胶原蛋白且不损害有效成分，适合产业化大规模提取。利用上述提取方法得到胶原蛋白生物活性高，能够很好地促进细胞贴壁和延伸，适用于细胞培养。

公开(公告)号：CN114703122A

公开(公告)日：2022-07-05

申请号：CN202210350780.7

申请日：2022-04-02

Applicant: 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司 ,  广东益朗生物科技有限公司 ,  华南农业大学

Inventor： 陈瑞爱 ,  徐家华 ,  冯少珍 ,  刘郁夫

IPC: C12N5/071

Abstract: 本发明公开了一种使PK‑15细胞形成团块和传代培养的方法，具体步骤为：先对PK‑15细胞进行复苏，再进行细胞传代，然后配制特定的悬浮培养基，将PK‑15细胞与悬浮培养基混合倒入摇瓶中，再将摇瓶置于摇床进行悬浮培养，悬浮培养一段时间后再取样观察细胞生长状况，进行细胞计数，再进行细胞传代，得到团块状细胞，继续对团块状细胞进行细胞传代；连续传代并观察PK‑15细胞状态，得到成球形团块状的PK‑15细胞。本发明的培养方法在在不进行细胞驯化和基因改造的情况下，能直接悬浮PK‑15细胞，使得PK‑15细胞形成球形团生长，球形团块直径为20～80μm，还能够连续传15代以上。