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公开(公告)号:CN115044599B
公开(公告)日:2024-03-22
申请号:CN202110258126.9
申请日:2021-03-09
申请人: 广东省农业科学院动物卫生研究所 , 广东顺安丰泰水产科技有限公司
摘要: 本发明涉及一种essC基因敲除的无乳链球菌菌株ΔessC及其构建方法和应用,所述essC基因序列如SEQIDNO.1所示,或为与SEQIDNO.1完全互补配对的序列,或为如SEQIDNO.1所示的核苷酸序列经取代、缺失和/或添加一个或多个核苷酸,且能编码相同功能蛋白质的核苷酸序列,或为编码氨基酸序列如SEQIDNO.2所示的核苷酸序列。经研究发现essC基因缺失造成了分泌免疫原性胞外蛋白ESAT6产生分泌障碍,从而降低了无乳链球菌株毒性。同时,本发明所构建的无乳链球菌基因敲除菌株ΔessC与野生株生长速率基本一致,且具有明显减毒特征,本研究对无乳链球菌Ⅶ型分泌系统的研究提供了理论基础,为寻找抗无乳链球菌基因蛋白药物的作用靶点提供关键性线索。
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公开(公告)号:CN115044599A
公开(公告)日:2022-09-13
申请号:CN202110258126.9
申请日:2021-03-09
申请人: 广东省农业科学院动物卫生研究所 , 广东顺安丰泰水产科技有限公司
摘要: 本发明涉及一种essC基因敲除的无乳链球菌菌株ΔessC及其构建方法和应用,所述essC基因序列如SEQIDNO.1所示,或为与SEQIDNO.1完全互补配对的序列,或为如SEQIDNO.1所示的核苷酸序列经取代、缺失和/或添加一个或多个核苷酸,且能编码相同功能蛋白质的核苷酸序列,或为编码氨基酸序列如SEQIDNO.2所示的核苷酸序列。经研究发现essC基因缺失造成了分泌免疫原性胞外蛋白ESAT6产生分泌障碍,从而降低了无乳链球菌株毒性。同时,本发明所构建的无乳链球菌基因敲除菌株ΔessC与野生株生长速率基本一致,且具有明显减毒特征,本研究对无乳链球菌Ⅶ型分泌系统的研究提供了理论基础,为寻找抗无乳链球菌基因蛋白药物的作用靶点提供关键性线索。
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公开(公告)号:CN109971710A
公开(公告)日:2019-07-05
申请号:CN201910340218.4
申请日:2019-04-25
申请人: 广东省农业科学院动物卫生研究所
摘要: 本发明提供一种建鲤脑细胞系及其应用,通过建鲤的脑组织,并采用合适的浓度的胰酶以及设置合理的消化条件,原代分离得到建鲤脑细胞,经传代培养后首次建立了建鲤脑细胞系CCB‑J,其主要表现为上皮样细胞,可以稳定传代超过60代,本发明的建鲤脑细胞系在病毒学、毒理、生理、分子遗传学以及发育生物学领域具有很高的研究及应用价值,例如:在病毒的鉴定与毒株分离中的应用,在制备预防或治疗建鲤病毒的疫苗中的应用,作为用于药物筛选、药物制备、药物评价的生物模型中的应用等。
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公开(公告)号:CN108178787A
公开(公告)日:2018-06-19
申请号:CN201711461888.9
申请日:2017-12-28
申请人: 广东省农业科学院动物卫生研究所
IPC分类号: C07K14/03 , C07K16/08 , C12N15/38 , C12N15/70 , G01N33/569
摘要: 本发明公开了pORF131重组蛋白及其制备方法和应用,pORF131重组蛋白依次由SEQ ID NO.7—SEQ ID NO.10所示氨基酸序列通过连接子连接而成,所述连接子为4-7个分子量小的、极性且亲水的氨基酸构成。经ELISA显示,本发明所述pORF131重组蛋白可以作为包被抗原,能很好地用以检测CyHV-3 ORF131完整编码序列构建的DNA疫苗免疫锦鲤后产生的血清特异性抗体,以及诊断锦鲤是否感染鲤疱疹病毒3型。
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公开(公告)号:CN107502622A
公开(公告)日:2017-12-22
申请号:CN201610415590.3
申请日:2016-06-14
申请人: 广东省农业科学院动物卫生研究所
CPC分类号: C12N15/85 , A61K39/09 , A61K2039/53 , C07K14/315 , C12N15/66 , C12N2800/106
摘要: 本发明公开了一种Sip基因重组载体、壳聚糖-PLGA包裹Sip基因DNA疫苗及其制备方法和应用;采用限制性核酸内切酶HindⅢ和BamHⅠ酶切罗非鱼无乳链球菌Sip基因和pcDNA3.1(+)质粒,然后构建罗非鱼无乳链球菌Sip真核表达重组质粒;以PLGA、PVA、壳聚糖为原料,采用乳化扩散法包裹重组质粒,即得壳聚糖-PLGA包裹Sip基因DNA疫苗。本发明方法制备的疫苗免疫罗非鱼,其有效免疫保护率在50%-100%之间,最高血清效价达1:256。而且该疫苗的本质是含重组质粒的纳米颗粒,因此易于保存和运输。
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公开(公告)号:CN104031143A
公开(公告)日:2014-09-10
申请号:CN201410231937.X
申请日:2014-05-28
申请人: 广东省农业科学院动物卫生研究所
摘要: 本发明公开了一种抗鲤科疱疹病毒3型鸡卵黄抗体的制备方法,以鲤科疱疹病毒3型作为抗原,免疫蛋鸡,测定卵黄抗体效价后,收集免疫卵,分离卵黄,纯化后获得抗鲤科疱疹病毒3型鸡卵黄抗体。还公开了由上述方法制成的抗鲤科疱疹病毒3型鸡卵黄抗体及该卵黄抗体在制备检测、预防或治疗鲤科疱疹病毒3型感染引起的相关疾病的药物中的应用及在制备预防和/或治疗鲤科疱疹病毒3型感染引起的相关疾病的饲料添加剂中的应用;本发明方法采用差速离心方法纯化的鲤科疱疹病毒3型具有较高的回收率和较好的囊膜完整性,适于大规模纯化病毒;本发明制备的抗鲤科疱疹病毒3型鸡卵黄抗体纯度高,易于产业化,可显著降低鲤科疱疹病毒3型感染造成的锦鲤死亡率。
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公开(公告)号:CN112899404B
公开(公告)日:2022-12-27
申请号:CN202110282705.7
申请日:2021-03-16
申请人: 广东省农业科学院动物卫生研究所
IPC分类号: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11
摘要: 本发明公开了鳜蛙虹彩病毒的Nested‑RAA检测引物对及其应用和检测方法,所述检测引物对包括一对外侧引物对和一对内侧引物对。本发明的检测方法在原有一步法RAA的基础上大大提高了检测灵敏度,提高了临床检出率和重复率,最低检测浓度可达3.37×10‑14ng,可在30min内完成检测反应。且与临床常见水生病毒和细菌病未发生交叉反应,在鳜蛙虹彩病毒的快速检测中具有明显的优势,适用于临床快速检测,具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号:CN110042174A
公开(公告)日:2019-07-23
申请号:CN201910280122.3
申请日:2019-04-09
申请人: 广东省农业科学院动物卫生研究所
IPC分类号: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12R1/93
摘要: 本发明的一种海鲈虹彩病毒的检测方法和试剂盒,通过引物自身的序列结构设计和引物间浓度比例的合理设置,同时结合对反应体系中的Mg2+浓度、dNTPs浓度、DNA聚合酶浓度、反应温度和时间的合理设置以及从以上各因素整体角度的合理配合,实现了海鲈虹彩病毒CPA检测特异性和灵敏度。最低检测限度可达到102copies/μL,检测灵敏度较常规PCR高约10倍,且不与其他常见的水生病毒及水生常见细菌发生交叉反应,在待测样品的快速筛选检测方面具有明显优势。
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公开(公告)号:CN104893994B
公开(公告)日:2017-09-01
申请号:CN201510314111.4
申请日:2015-06-09
申请人: 广东省农业科学院动物卫生研究所
CPC分类号: Y02A40/818
摘要: 本发明涉及一种长孢娄徳酵母(Lodderomyces elongisporus),其保藏编号为CCTCC NO:M 2015301。该长孢娄徳酵母(Lodderomyces elongisporus)的富硒培养方法,包括以下步骤:将上述的长孢娄徳酵母接种于所述YEPD培养基中培养,5%‑10%接种量;于对数期6h,9h,12h时分3次加硒,硒在培养基中的终浓度为10‑20μg/mL,培养24h‑48h。本发明所述的长孢娄徳酵母,富硒效率高,富硒性能良好,具有生产有机硒的可行性,可作为富硒酵母菌株,在有机硒动物饲料添加剂的产品开发中具有良好应用前景。
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公开(公告)号:CN103911433A
公开(公告)日:2014-07-09
申请号:CN201410081651.8
申请日:2014-03-06
申请人: 广东省农业科学院动物卫生研究所
CPC分类号: C12Q1/6844 , C12Q2531/113
摘要: 本发明公开了一种嗜水气单胞菌的LAMP检测引物组,包括一对外引物AH-F3和AH-B3、一对内引物AH-FIP和AH-BIP以及一对环引物AH-LF和AH-LB,其中AH-F3的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.1所示,AH-B3的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.2所示,AH-FIP的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.3所示,AH-BIP的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.4所示,AH-LF的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.5所示,AH-LB的核苷酸序列SEQ?ID?NO.6所示。本发明的试剂盒操作简便快速,适合现场检测;具有特异性强、检测灵敏度高,可达到46fg/mL、准确率高、可靠等特点,具有广泛的应用前景。
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