基于生物素连接酶的蛋白邻近标记系统、方法及应用

    公开(公告)号:CN117363639A

    公开(公告)日:2024-01-09

    申请号:CN202311656709.2

    申请日:2023-12-06

    IPC分类号: C12N15/70 C12N15/52 C07K14/00

    摘要: 本发明提供基于生物素连接酶的蛋白邻近标记系统、方法及应用,该蛋白邻近标记系统包括含有生物素连接酶TurboID编码核苷酸序列的重组质粒、含有目标蛋白编码核苷酸序列的重组质粒以及用于诱导表达生物素连接酶TurboID和目标蛋白的细胞系。本发明利用含有生物素连接酶TurboID编码核苷酸序列的重组质粒和含有目标蛋白编码核苷酸序列的重组质粒在大肠杆菌中共表达,在体内进行邻近标记,纯化后直接获得一种Biotin‑EFTu(生物素标记的目标蛋白),经质谱鉴定,该生物素标记时为单一位点标记,标记效率高,表达完即标记完,不需要进行额外的操作,工艺简单,操作便捷,可为高通量表达与筛选蛋白提供思路。

    K亚群禽白血病病毒RT-PCR检测引物及检测方法

    公开(公告)号:CN109338012A

    公开(公告)日:2019-02-15

    申请号:CN201810923129.8

    申请日:2018-08-14

    IPC分类号: C12Q1/70 C12Q1/686 C12N15/11

    摘要: 本发明涉及分子生物学检测技术领域,具体涉及一种K亚群禽白血病病毒RT-PCR检测引物及检测方法。本发明所述引物为:ALVKF:CAGGGAACCTTTGGATTA;ALVKR:AAGCGTGTCAATGCTCC。本发明的K亚群禽白血病病毒RT-PCR检测方法,包括如下操作:(1)RNA模板制备;(2)扩增目的片段;(3)电泳鉴定扩增产物。本发明的引物特异性高,且扩展片段较短,整个PCR鉴定过程可以在2~2.5h内完成,不需经过测序就能快速鉴定出K亚群禽白血病病毒,为临床K亚群禽白血病的诊断节约大量时间。本发明方法操作简单,使用的仪器普通实验容易配置,检测费用低,便于临床推广应用。