一种HPLC法测定辅酶I纯度的方法
    1.
    发明公开

    公开(公告)号:CN118425364A

    公开(公告)日:2024-08-02

    申请号:CN202410553817.5

    申请日:2024-05-07

    摘要: 本发明公开了一种HPLC法测定辅酶I纯度的方法,涉及辅酶I检测技术领域,包括样品制备、标样制备、样品处理、样品测定和数据分析,采用高效液相色谱法,色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,且规格为5um,首先配制不同浓度的辅酶I标准溶液,并建立工作曲线,将辅酶I晶体溶解在溶剂中,然后通过0.45um的滤膜过滤,将制备好的辅酶I溶液和标样分别进样到HPLC仪中分析,记录色谱图,并根据标样的浓度和色谱图中的峰面积,绘制工作曲线,计算样品中辅酶I的浓度,并评估测定方法的精密度和准确度。本发明选用高效液相色谱法,并筛选出适宜的测定条件,可以准确的进行辅酶I纯度的测定,以面积归一化法进行计算,更加全面的监控辅酶I的质量。

    一种发酵控制方法及利用其发酵产烟酰胺腺嘌呤二核苷酸

    公开(公告)号:CN117965816A

    公开(公告)日:2024-05-03

    申请号:CN202410144992.9

    申请日:2024-02-01

    IPC分类号: C12Q3/00 C12P19/36

    摘要: 本发明涉及一种发酵控制方法及利用其发酵产烟酰胺腺嘌呤二核苷酸,包括所述方法一种发酵控制方法,其特征在于:所述发酵控制方法用于提高烟酰胺单核苷酸腺苷转移酶的浓度,所述发酵控制方法包括:添加诱导剂:控制温度30℃以下,添加诱导剂;控制溶氧:添加诱导剂后诱后溶氧控制在20‑40%;控制补糖:底糖耗完后开始补糖,初始补糖速度40ml/h,前4h每隔2h提高糖速5ml/h,4h后每隔2h提高糖速10ml/h。通过本发明所述的技术方案,得到的大肠杆菌菌体得率高,OD600值可达到168左右,菌体湿重达62‑100g/L。本发明的目的蛋白表达水平高,目的蛋白占菌体总蛋白的水平可达35‑49%。