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公开(公告)号：CN106701842B
公开(公告)日：2020-10-16
申请号：CN201611110169.8
申请日：2016-12-06
申请人： 枣庄市杰诺生物酶有限公司 , 华东理工大学
摘要： 本发明提供了一种生物法制备苯乙酸的方法，其包括如下步骤：将苯乙腈分为若干批次，每批次的体积相等，每隔一定时间将一批次苯乙腈加入转化液中，然后在pH为6.0‐9.0和温度为20‐40℃的条件下反应，待上一批次的苯乙腈的转化率达到一定程度后再加入下一批次，待最后批次的苯乙腈的转化率达到一定程度后终止反应，得到苯乙酸；该转化液中包括含有用于分泌MG腈水解酶的E.coli工程菌；本发明由于采用了MG腈水解酶和分批次加入苯乙腈相结合的方法制备苯乙酸，不仅工艺路线简单、反应条件温和以及没有污染，而且苯乙酸的积累浓度高达1M，具有良好的工业化应用前景。
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公开(公告)号：CN106676140A
公开(公告)日：2017-05-17
申请号：CN201611110170.0
申请日：2016-12-06
申请人： 枣庄市杰诺生物酶有限公司 , 华东理工大学
摘要： 本发明提供了一种生物法合成(R)‐邻氯扁桃酸的方法，其包括如下步骤：将邻氯扁桃腈流加入转化液中，在pH为7.0‐9.0和温度为20‐40℃的条件下反应8‐12h，停止流加并继续反应1‐4h，得到(R)‐邻氯扁桃酸；该转化液中包括含有MG腈水解酶的E.coli工程菌；本发明由于采用了MG腈水解酶和流加邻氯扁桃腈相结合的方法制备(R)‐邻氯扁桃酸，不仅工艺路线简单、反应条件温和以及没有污染，而且单批次反应(R)‐邻氯扁桃酸的积累浓度高达600mM，ee值大于98％，具有良好的工业化应用前景。
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公开(公告)号：CN106701842A
公开(公告)日：2017-05-24
申请号：CN201611110169.8
申请日：2016-12-06
申请人： 枣庄市杰诺生物酶有限公司 , 华东理工大学
摘要： 本发明提供了一种生物法制备苯乙酸的方法，其包括如下步骤：将苯乙腈分为若干批次，每批次的体积相等，每隔一定时间将一批次苯乙腈加入转化液中，然后在pH为6.0‐9.0和温度为20‐40℃的条件下反应，待上一批次的苯乙腈的转化率达到一定程度后再加入下一批次，待最后批次的苯乙腈的转化率达到一定程度后终止反应，得到苯乙酸；该转化液中包括含有用于分泌MG腈水解酶的E.coli工程菌；本发明由于采用了MG腈水解酶和分批次加入苯乙腈相结合的方法制备苯乙酸，不仅工艺路线简单、反应条件温和以及没有污染，而且苯乙酸的积累浓度高达1M，具有良好的工业化应用前景。
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公开(公告)号：CN113969268B
公开(公告)日：2024-05-17
申请号：CN202110475238.X
申请日：2021-04-29
申请人： 永农生物科学有限公司 , 华东理工大学 , 宁夏永农生物科学有限公司
摘要： 本申请涉及Glu/Leu/Phe/Val脱氢酶突变体及其在制备L‑草铵膦中的应用。所述Glu/Leu/Phe/Val脱氢酶突变体当与包含SEQ ID NO.5所示序列的Glu/Leu/Phe/Val脱氢酶的氨基酸序列比对时，所述Glu/Leu/Phe/Val脱氢酶突变体的氨基酸序列包含对应于第91位和/或第168位的氨基酸残基的替换，所述第91位和第168位是参照SEQ ID NO.5限定的，并且所述Glu/Leu/Phe/Val脱氢酶突变体的氨基酸序列与SEQ ID NO.5所示序列具有至少90％的同一性。
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公开(公告)号：CN116875576A
公开(公告)日：2023-10-13
申请号：CN202310642532.4
申请日：2023-06-01
申请人： 华东理工大学
摘要： 本发明公开了一种亮氨酸脱氢酶突变体及其在制备L‑苯甘氨酸中的应用。该亮氨酸脱氢酶突变体为：以SEQ ID NO.1所示的野生型亮氨酸脱氢酶MsLDH为模板，第332位的天冬氨酸D突变为谷氨酸E，第333位的甘氨酸G突变为谷氨酸E，第334位的亮氨酸L突变为精氨酸R所得的突变体MsLDH‑EER，氨基酸基序列如SEQ ID NO.2所示。本发明通过分子改造获得一种催化活力和pH稳定性均提高的亮氨酸脱氢酶突变体MsLeuDH，相较于野生型MsLeuDH在200mM底物浓度下4h时转化率为68.0％，根据本发明提供的突变体MsLDH‑EER在3h时转化率达到99.5％，产物e.e.值大于99％。
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公开(公告)号：CN116694592A
公开(公告)日：2023-09-05
申请号：CN202310642692.9
申请日：2023-06-01
申请人： 华东理工大学
摘要： 本发明公开了一种(R)‑3‑氨基丁醇生成能力提高的转氨酶突变体及其应用。该转氨酶突变体包括：将SEQ ID NO.1所示氨基酸序列的第160位亮氨酸突变为缬氨酸所得的突变体L160V；将SEQ ID NO.1所示氨基酸序列的第162位缬氨酸突变为亮氨酸所得的突变体V162L；将SEQ ID NO.3所示氨基酸序列的第162位缬氨酸突变为亮氨酸所得的突变体L160V/V162L。本发明通过土壤宏基因组挖掘技术获得一株天然进化的新型转氨酶，并通过对活性口袋进行半理性设计改造后，获得一种(R)‑3‑氨基丁醇合成能力进一步增强的突变酶，对于绿色高效的制备(R)‑3‑氨基丁醇具有重要的工业应用潜力。
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公开(公告)号：CN113174378B
公开(公告)日：2023-07-07
申请号：CN202110334184.5
申请日：2021-03-29
申请人： 华东理工大学
摘要： 本发明提供一种谷氨酸脱氢酶突变体及其编码基因、基因工程菌以及在制备L‑2‑氨基丁酸中的应用，该突变体为下列之一：以SEQ ID NO.1所示野生型的谷氨酸脱氢酶为模板，第76位氨基酸残基突变为甘氨酸G或丙氨酸A或缬氨酸V或亮氨酸L或异亮氨酸I；第180位氨基酸残基突变为丝氨酸S或半胱氨酸C；第76位氨基酸突变为亮氨酸，第180位氨基酸残基突变为半胱氨酸C。本发明通过分子改造方法，显著提高了AtGluDH对非天然底物2‑酮丁酸的催化活力，解决了还原胺化法制备L‑2‑氨基丁酸工艺中酶催化活力低的问题，在使用全细胞催化时，无需额外添加外源辅酶即可成功转化1M底物，具有极大的工业应用价值。
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公开(公告)号：CN112481229B
公开(公告)日：2022-12-30
申请号：CN202011346097.3
申请日：2020-11-25
申请人： 华东理工大学
摘要： 本发明提供了一种ω转氨酶及其突变体、重组质粒、基因工程菌及其应用。该ω转氨酶的氨基酸序列如SEQ ID No：2所示，ω转氨酶突变体由ω转氨酶的氨基酸序列突变得到，与SEQ ID No：2具有至少90％的同源性。本发明从瘤状伯克霍尔德菌中提取了ω转氨酶基因，实现了该ω转氨酶基因的异源表达，所产生的ω转氨酶菌株对一系列芳基烷基类底物展示了优良的催化活性。本发明还将该ω转氨酶进行突变获得一系列ω转氨酶突变体，通过将该ω转氨酶突变体偶联不同的酶，应用于生物酶法不对称合成(S)‑1‑苯丙胺和其它手性胺类产品的生产中，具有经济环保、手性选择性高的特点，为转氨酶的工业应用提供了一个潜在的选择。
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公开(公告)号：CN112410383B
公开(公告)日：2022-07-12
申请号：CN202011496575.9
申请日：2020-12-17
申请人： 永农生物科学有限公司 , 华东理工大学 , 宁夏永农生物科学有限公司
IPC分类号： C12P13/04
摘要： 本申请涉及一种利用生物多酶偶联法制备L‑草铵膦的方法，其包括：在(R)‑转氨酶、(S)‑转氨酶、氨基受体和氨基供体的存在下，使D,L‑草铵膦转化为L‑草铵膦。本申请的方法能够实现高浓度D,L‑草铵膦的高效拆分来制备L‑草铵膦。
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公开(公告)号：CN113969269A
公开(公告)日：2022-01-25
申请号：CN202110475247.9
申请日：2021-04-29
申请人： 永农生物科学有限公司 , 华东理工大学 , 宁夏永农生物科学有限公司
摘要： 本申请涉及D‑氨基酸氧化酶突变体及其在制备L‑草铵膦中的应用。所述D‑氨基酸氧化酶突变体当与包含SEQ ID NO.1所示序列的D‑氨基酸氧化酶的氨基酸序列比对时，所述D‑氨基酸氧化酶突变体的氨基酸序列包含对应于第62位和/或第226位的氨基酸残基的替换，所述第62位和第226位是参照SEQ ID NO.1限定的，并且所述D‑氨基酸氧化酶突变体的氨基酸序列与SEQ ID NO.1所示序列具有至少90％的同一性。
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