公开(公告)号：CN105779439A

公开(公告)日：2016-07-20

申请号：CN201610242701.5

申请日：2016-04-19

申请人： 武汉生命之美科技有限公司

发明人： 张翼 ,  余凤云 ,  乔明 ,  陈栋

IPC分类号： C12N15/10 ,  C12Q1/68 ,  C40B50/06

CPC分类号： C12N15/1096 ,  C12Q1/6806 ,  C40B50/06 ,  C12Q2531/113 ,  C12Q2525/191 ,  C12Q2521/319 ,  C12Q2535/122

摘要： 本发明属于基因组学技术领域，具体涉及一种能特异性获取5’ CAP序列信息的微量CAGE?seq文库构建方法，运用T4 PNK和TEX酶的组合作用，消除了总 RNA中5’端没有5’帽结构的RNA，保留了所有带有5’帽结构的RNA,设计相应的RT 引物和TS引物，在逆转录和模板置换过程中，富集RNA 5’端的信息，再通过PCR，引入测序引物和barcode序列。该方法避免繁琐的半抑制PCR过程，缩短建库时间，简化了实验流程；起始RNA用量较低，约100ng?1ug；是研究基因表达的有力方式，适用与基因调控网络研究。