公开(公告)号：CN102559737A

公开(公告)日：2012-07-11

申请号：CN201110413170.9

申请日：2011-12-13

Applicant: 江南大学

Inventor： 陈伟 ,  郑海军 ,  于明磊 ,  陆源 ,  郁心 ,  邬敏辰 ,  吴静

IPC: C12N15/81 ,  C12N15/23 ,  C12N1/19 ,  C12P21/02 ,  C07K14/57 ,  C07K1/18 ,  C07K1/16 ,  C12R1/84

Abstract: 本发明提供了一种重组人白细胞介素29(hIL-29)变异体的制备方法及表达重组hIL-29变异体的毕赤酵母工程菌。本发明的具体制备方法包括以下步骤：1)人工合成引物；2)从健康人外周血单个核细胞经反转录PCR得到hIL-29变异体的编码基因；3)构建含有hIL-29变异体编码基因的重组真核表达载体，融合于毕赤酵母表达调控元件获得重组毕赤酵母工程菌；4)培养重组毕赤酵母工程菌，于培养液添加甲醇诱导毕赤酵母工程菌表达重组hIL-29变异体；5)采用离子交换层析和分子筛层析从培养液上清纯化重组hIL-29变异体。本发明构建的重组毕赤酵母工程菌可进行高密度培养并且分泌型表达重组hIL-29变异体，适用于工业化制备重组人白细胞介素29变异体。

公开(公告)号：CN102533840A

公开(公告)日：2012-07-04

申请号：CN201110413183.6

申请日：2011-12-13

Applicant: 江南大学

Inventor： 陈伟 ,  郑海军 ,  于明磊 ,  郁心 ,  邬敏辰 ,  吴静

IPC: C12N15/81 ,  C12N1/19 ,  C12N15/23 ,  C12P21/02 ,  C07K14/57 ,  C07K1/18 ,  C07K1/16 ,  C12R1/84

Abstract: 本发明提供了一种人白细胞介素29(hIL-29)成熟肽的制备方法及表达hIL-29成熟肽的毕赤酵母工程菌。本发明的具体制备方法包括以下步骤：1)人工合成引物；2)从健康人外周血单个核细胞经反转录PCR得到hIL-29成熟肽的编码基因；3)构建含有hIL-29成熟肽编码基因的重组真核表达载体，融合于毕赤酵母表达调控元件获得重组毕赤酵母工程菌；4)培养重组毕赤酵母工程菌，于培养液添加甲醇诱导毕赤酵母工程菌表达hIL-29成熟肽；5)采用离子交换层析和分子筛层析从培养液上清纯化hIL-29成熟肽。本发明构建的重组毕赤酵母工程菌可进行高密度培养并且分泌型表达天然型hIL-29成熟肽，适用于工业化制备人白细胞介素29。