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公开(公告)号：CN112111468A
公开(公告)日：2020-12-22
申请号：CN202011006299.3
申请日：2020-09-23
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种γ‑谷氨酰胺转肽酶突变体及其应用，属于基因工程领域；本发明在天然γ‑谷氨酰胺转肽酶的基础上，通过定点突变生物技术改造γ‑谷氨酰胺转肽酶分子结构，本发明所提供的突变体T401P、T422S，其转肽酶活较原始菌株分别提高了32.3％、41.8％；比酶活分别提高了近4.5倍、5.1倍，本发明表明401位点及422位点残基对于GGT催化苦味氨基酸具有重要影响，可用于改善含苦味氨基酸产品的口感与品质，这对于γ‑谷氨酰胺转肽酶在医药和食品行业的应用具有重要意义。
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公开(公告)号：CN112111506B
公开(公告)日：2022-03-25
申请号：CN202011006379.9
申请日：2020-09-23
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种RBS优化提高γ‑谷氨酰胺转肽酶表达量的方法，属于基因工程领域。起始的翻译速率对于外源蛋白的表达影响很大，通过对RBS序列进行改造，优化RBS，可以进一步提高翻译速率从而很大程度上提高目的蛋白表达量，本发明对表达载体pMA5的RBS序列进行改造，提高了酶的翻译效率，从而提高了酶活，采用本发明提供的载体pMA5‑RBS361和pMA5‑RBS362构建的重组枯草芽孢杆菌中，使目的基因γ‑谷氨酰胺转肽酶的酶活得到了提高；其表达量较原始pMA5‑ggt/B.subtilis 168分别提高了1.51倍和1.62倍。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN112080503B
公开(公告)日：2022-02-01
申请号：CN202011006160.9
申请日：2020-09-23
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种优化启动子提高γ‑谷氨酰胺转肽酶表达量的方法，属于基因工程领域。本发明实现了B.pumilus ML413来源的γ‑谷氨酰转肽酶基因在枯草芽孢杆菌168中的高效表达，采用本发明所提供的优化后的核苷酸序列如SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.2所示的启动子，构建的基因工程菌对γ‑谷氨酰转肽酶的表达量，较采用未优化的启动子构建的基因工程菌对γ‑谷氨酰转肽酶的表达量，分别提高了30％、63％。
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公开(公告)号：CN112111468B
公开(公告)日：2022-01-11
申请号：CN202011006299.3
申请日：2020-09-23
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种γ‑谷氨酰胺转肽酶突变体及其应用，属于基因工程领域；本发明在天然γ‑谷氨酰胺转肽酶的基础上，通过定点突变生物技术改造γ‑谷氨酰胺转肽酶分子结构，本发明所提供的突变体T401P、T422S，其转肽酶活较原始菌株分别提高了32.3％、41.8％；比酶活分别提高了近4.5倍、5.1倍，本发明表明401位点及422位点残基对于GGT催化苦味氨基酸具有重要影响，可用于改善含苦味氨基酸产品的口感与品质，这对于γ‑谷氨酰胺转肽酶在医药和食品行业的应用具有重要意义。
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公开(公告)号：CN112111506A
公开(公告)日：2020-12-22
申请号：CN202011006379.9
申请日：2020-09-23
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种RBS优化提高γ‑谷氨酰胺转肽酶表达量的方法，属于基因工程领域。起始的翻译速率对于外源蛋白的表达影响很大，通过对RBS序列进行改造，优化RBS，可以进一步提高翻译速率从而很大程度上提高目的蛋白表达量，本发明对表达载体pMA5的RBS序列进行改造，提高了酶的翻译效率，从而提高了酶活，采用本发明提供的载体pMA5‑RBS361和pMA5‑RBS362构建的重组枯草芽孢杆菌中，使目的基因γ‑谷氨酰胺转肽酶的酶活得到了提高；其表达量较原始pMA5‑ggt/B.subtilis 168分别提高了1.51倍和1.62倍。
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公开(公告)号：CN112080503A
公开(公告)日：2020-12-15
申请号：CN202011006160.9
申请日：2020-09-23
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种优化启动子提高γ‑谷氨酰胺转肽酶表达量的方法，属于基因工程领域。本发明实现了B.pumilus ML413来源的γ‑谷氨酰转肽酶基因在枯草芽孢杆菌168中的高效表达，采用本发明所提供的优化后的核苷酸序列如SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.2所示的启动子，构建的基因工程菌对γ‑谷氨酰转肽酶的表达量，较采用未优化的启动子构建的基因工程菌对γ‑谷氨酰转肽酶的表达量，分别提高了30％、63％。
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公开(公告)号：CN110982773A
公开(公告)日：2020-04-10
申请号：CN201911392421.2
申请日：2019-12-30
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了重组枯草芽孢杆菌及其在生产2,3-丁二醇中的应用，属于生物技术领域。本发明提供了一种可高产2,3-丁二醇的重组枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis/PMA5-Pspac-gdh-tdh，将此重组枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis/PMA5-Pspac-gdh-tdh接种至发酵培养基中发酵60h，即可使发酵液中2,3-丁二醇的产量、2,3-丁二醇的生产强度以及糖酸转化率分别高达43.15g/L、0.719g/L·h和0.43g/g，分别较野生型枯草芽孢杆菌168提高了22.5％、29.08％和30.3％。
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