公开(公告)号：CN118726218A

公开(公告)日：2024-10-01

申请号：CN202411027714.1

申请日：2024-07-30

Applicant: 江南大学

Inventor： 徐美娟 ,  宋云海 ,  饶志明 ,  杨凤玉 ,  张显

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/77 ,  C12N15/60 ,  C12N15/54 ,  C12N15/31 ,  C12P13/00 ,  C12R1/15

Abstract: 本发明涉及一种重组谷氨酸棒杆菌及其以葡萄糖为原料发酵生产亚精胺的方法。本发明先在谷氨酸棒杆菌的基因组中敲除了snaA基因，构建了敲除菌株SP‑1。以大肠杆菌和谷氨酸棒杆菌之间的穿梭质粒pEC‑XK99E和pXMJ19质粒为表达载体，将来源于Escherichia coli中的亚精胺转运蛋白基因簇，S‑腺苷甲硫氨酸合成酶、亚精胺合酶、鸟氨酸脱羧酶，S‑腺苷甲硫氨酸脱羧酶在先前构建的敲除菌株SP‑1中表达。本发明的重组谷氨酸棒杆菌可以直接利用葡萄糖直接进行亚精胺的生产。在不依赖外源添加甲硫氨酸的情况下，250mL摇瓶72h发酵可以积累2.61g/L亚精胺。5L发酵罐通过流加底物亚精胺产量可以达到45.2g/L。

公开(公告)号：CN114774342A

公开(公告)日：2022-07-22

申请号：CN202210540955.0

申请日：2022-05-17

Applicant: 江南大学

Inventor： 徐美娟 ,  饶志明 ,  杨凤玉 ,  宋云海 ,  杨套伟 ,  张显

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/77 ,  C12N15/61 ,  C12N15/60 ,  C12N15/54 ,  C12N15/55 ,  C12N9/12 ,  C12N9/78 ,  C12N9/88 ,  C12N9/90 ,  C12P13/00 ,  C12R1/15

Abstract: 本发明公开了一种利用木糖及含木糖水解液发酵生产1，4‑丁二胺的方法，属于基因工程技术领域。本发明通过采用大肠杆菌和钝齿棒杆菌之间的穿梭质粒pEC‑XK99E，将来源于Escherichia coli K‑12的木糖异构酶和木酮糖激酶编码基因簇在先前构建的1,4‑丁二胺高产菌株PC0中表达。摇瓶发酵结果表明，原始菌PC0不具有代谢利用木糖的能力，而重组钝齿棒杆菌具有此能力，可以直接利用木糖及含木糖水解液直接进行1,4‑丁二胺的生产。最终在5‑L发酵罐72h发酵可以积累33.4g·L‑11,4‑丁二胺。本发明方法生产1,4‑丁二胺，具有效率高、副产物L‑精氨酸、胍基丁胺和其他杂酸含量低的优点，后期对于产物1,4‑丁二胺的分离纯化更加容易。

公开(公告)号：CN114774342B

公开(公告)日：2023-07-25

申请号：CN202210540955.0

申请日：2022-05-17

Applicant: 江南大学

Inventor： 徐美娟 ,  饶志明 ,  杨凤玉 ,  宋云海 ,  杨套伟 ,  张显

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/77 ,  C12N15/61 ,  C12N15/60 ,  C12N15/54 ,  C12N15/55 ,  C12N9/12 ,  C12N9/78 ,  C12N9/88 ,  C12N9/90 ,  C12P13/00 ,  C12R1/15

Abstract: 本发明公开了一种利用木糖及含木糖水解液发酵生产1，4‑丁二胺的方法，属于基因工程技术领域。本发明通过采用大肠杆菌和钝齿棒杆菌之间的穿梭质粒pEC‑XK99E，将来源于Escherichia coli K‑12的木糖异构酶和木酮糖激酶编码基因簇在先前构建的1,4‑丁二胺高产菌株PC0中表达。摇瓶发酵结果表明，原始菌PC0不具有代谢利用木糖的能力，而重组钝齿棒杆菌具有此能力，可以直接利用木糖及含木糖水解液直接进行1,4‑丁二胺的生产。最终在5‑L发酵罐72h发酵可以积累33.4g·L‑11,4‑丁二胺。本发明方法生产1,4‑丁二胺，具有效率高、副产物L‑精氨酸、胍基丁胺和其他杂酸含量低的优点，后期对于产物1,4‑丁二胺的分离纯化更加容易。

公开(公告)号：CN113735282B

公开(公告)日：2022-11-22

申请号：CN202111103840.7

申请日：2021-09-18

Applicant: 江南大学

Inventor： 徐美娟 ,  饶志明 ,  张杰 ,  朱宜纯 ,  宋云海 ,  杨套伟 ,  张显

IPC: C02F3/34 ,  C02F101/22

Abstract: 本发明公开了一种老黄酶OYE2蛋白及其在铬污染中的应用，属于重金属防治领域。本发明以Corynebacterium crenatum SYPA 5‑5中的老黄酶OYE2蛋白作为还原Cr(VI)的有效成分，其具有六价铬还原酶的活性，该铬还原酶对Cr(VI)具有较强的还原作用，能快速去除废水中Cr(VI)的作用。采用本发明的方法，在未添加本发明的六价铬还原酶的废水中，Cr(VI)浓度未发生明显变化，加入本发明的六价铬还原酶的废水中Cr(VI)浓度降到62mg/L，还原率达38％，能快速有效地去除废水中的六价铬。因此，利用这类酶中的一种或多种制成六价铬还原酶处理含Cr(VI)废水具有工业化应用潜力。

公开(公告)号：CN113735282A

公开(公告)日：2021-12-03

申请号：CN202111103840.7

申请日：2021-09-18

Applicant: 江南大学

Inventor： 徐美娟 ,  饶志明 ,  张杰 ,  朱宜纯 ,  宋云海 ,  杨套伟 ,  张显

IPC: C02F3/34 ,  C02F101/22

Abstract: 本发明公开了一种老黄酶OYE2蛋白及其在铬污染中的应用，属于重金属防治领域。本发明以Corynebacterium crenatum SYPA 5‑5中的老黄酶OYE2蛋白作为还原Cr(VI)的有效成分，其具有六价铬还原酶的活性，该铬还原酶对Cr(VI)具有较强的还原作用，能快速去除废水中Cr(VI)的作用。采用本发明的方法，在未添加本发明的六价铬还原酶的废水中，Cr(VI)浓度未发生明显变化，加入本发明的六价铬还原酶的废水中Cr(VI)浓度降到62mg/L，还原率达38％，能快速有效地去除废水中的六价铬。因此，利用这类酶中的一种或多种制成六价铬还原酶处理含Cr(VI)废水具有工业化应用潜力。