公开(公告)号：CN118389516A

公开(公告)日：2024-07-26

申请号：CN202410662454.9

申请日：2024-05-27

申请人： 江南大学 ,  嘉兴未来食品研究院

发明人： 张国强 ,  李江华 ,  廖灵通 ,  陈坚 ,  堵国成

IPC分类号： C12N15/113 ,  C12N15/81 ,  C12N15/55 ,  C12N1/19 ,  C12R1/645

摘要： 本发明公开了一种乳酸克鲁维基因组多位点编辑和高效筛选方法，属于基因编辑技术领域。本发明提供了一种基于CRISPR/Cas9的乳酸克鲁维酵母基因编辑系统，具体地，通过对gRNA靶点进行筛选，发现在以TGG为目的基因的PAM序列设计gRNA时，总编辑效率以及同源重组编辑效率均有所提升，并进一步从供体DNA同源臂长度、供体DNA浓度、基因表达框串并联方式等方面进行同源重组编辑效率的优化。将该编辑系统用于基因组的整合表达时大大提升了该物质的表达水平，在乳酸克鲁维酵母相关研究中具有巨大潜力。

公开(公告)号：CN116731135A

公开(公告)日：2023-09-12

申请号：CN202211642607.0

申请日：2022-12-20

申请人： 江南大学

发明人： 张国强 ,  李江华 ,  沈秀茹 ,  陈坚 ,  堵国成 ,  廖灵通

IPC分类号： C07K14/39 ,  C12N15/31 ,  C12N1/19 ,  C12N15/81 ,  C12N1/06 ,  C12Q1/527 ,  G01N33/68 ,  C12R1/645

摘要： 本发明公开了一种乳酸克鲁维酵母裂解工程菌及其应用，属于生物工程技术。本发明提供了甘露糖蛋白在促进乳酸克鲁维酵母菌胞内物质释放方面的新用途，通过敲除甘露糖蛋白编码基因，提高乳酸克鲁维酵母对裂解酶Lyticase的敏感性，可使构建的乳酸克鲁维酵母工程菌裂解时间较短，30min内几乎可使细胞完全裂解。本发明的乳酸克鲁维酵母裂解方法操作简便，在酶活检测、蛋白鉴定等方面有广阔的应用前景。