一种乳酸克鲁维基因组多位点编辑和高效筛选方法

    公开(公告)号:CN118389516A

    公开(公告)日:2024-07-26

    申请号:CN202410662454.9

    申请日:2024-05-27

    摘要: 本发明公开了一种乳酸克鲁维基因组多位点编辑和高效筛选方法,属于基因编辑技术领域。本发明提供了一种基于CRISPR/Cas9的乳酸克鲁维酵母基因编辑系统,具体地,通过对gRNA靶点进行筛选,发现在以TGG为目的基因的PAM序列设计gRNA时,总编辑效率以及同源重组编辑效率均有所提升,并进一步从供体DNA同源臂长度、供体DNA浓度、基因表达框串并联方式等方面进行同源重组编辑效率的优化。将该编辑系统用于基因组的整合表达时大大提升了该物质的表达水平,在乳酸克鲁维酵母相关研究中具有巨大潜力。