公开(公告)号：CN107988194B

公开(公告)日：2020-08-04

申请号：CN201711350235.3

申请日：2017-12-15

Applicant: 江南大学

Inventor： 饶志明 ,  张腾辉 ,  张显 ,  杨套伟 ,  徐美娟

IPC: C12N9/88 ,  C12N15/60 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种酶活提高的L‑天冬氨酸α‑脱羧酶突变体及其构建方法，属于基因工程技术领域。本发明的突变体是在SEQ ID NO.2所示的氨基酸的基础上，将第56位谷氨酸突变成丝氨酸。本发明得到的突变体在大肠杆菌中表达，经过对纯酶的酶活测定，突变酶E56S的酶活相对原始酶BsADC提高了55％，并且用水作为溶剂进行的产β丙氨酸实验，可以实现8h产215gβ丙氨酸，且其转化率为94％。本发明表明56位氨基酸残基对酶的催化作用有较大影响，对该酶的催化机理的研究提供了一定的基础，并提高了该酶的工业应用潜力。

公开(公告)号：CN107988194A

公开(公告)日：2018-05-04

申请号：CN201711350235.3

申请日：2017-12-15

Applicant: 江南大学

Inventor： 饶志明 ,  张腾辉 ,  张显 ,  杨套伟 ,  徐美娟

IPC: C12N9/88 ,  C12N15/60 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种酶活提高的L-天冬氨酸α-脱羧酶突变体及其构建方法，属于基因工程技术领域。本发明的突变体是在SEQ ID NO.2所示的氨基酸的基础上，将第56位谷氨酸突变成丝氨酸。本发明得到的突变体在大肠杆菌中表达，经过对纯酶的酶活测定，突变酶E56S的酶活相对原始酶BsADC提高了55％，并且用水作为溶剂进行的产β丙氨酸实验，可以实现8h产215gβ丙氨酸，且其转化率为94％。本发明表明56位氨基酸残基对酶的催化作用有较大影响，对该酶的催化机理的研究提供了一定的基础，并提高了该酶的工业应用潜力。