公开(公告)号：CN105505793B

公开(公告)日：2019-03-08

申请号：CN201511026721.0

申请日：2015-12-31

申请人： 江南大学

发明人： 史劲松 ,  龚劲松 ,  张荣先 ,  许正宏 ,  李恒 ,  窦文芳 ,  陆震鸣 ,  张旦旦

IPC分类号： C12N1/14 ,  C12N9/58 ,  C11D3/386 ,  C12R1/645

摘要： 本发明公开了一株产角蛋白酶的真菌赤霉菌Gibberella intermedia CA3‑1及其应用方法。经初步发酵优化后真菌角蛋白酶的活力可达109U/mL；该酶对角蛋白和酪蛋白酶活高、对胶原蛋白酶活低，SDS对酶活具有促进作用。所产角蛋白酶可独立完成或协助去污剂完成去除棉布上的污渍，提高洗涤效率。同时，该真菌角蛋白酶可完成对羊皮的脱毛处理。本发明所获得的产真菌角蛋白酶的赤霉菌在洗涤、制革、纺织领域具有良好的应用前景。

公开(公告)号：CN106434609A

公开(公告)日：2017-02-22

申请号：CN201610817209.6

申请日：2016-11-03

申请人： 江南大学

发明人： 史劲松 ,  张荣先 ,  龚劲松 ,  许正宏 ,  李恒 ,  窦文芳 ,  张旦旦 ,  苏畅

IPC分类号： C12N9/52 ,  C12N1/20 ,  C14C1/06 ,  C12R1/01

CPC分类号： C12N9/52 ,  C12R1/01 ,  C14C1/065

摘要： 本发明公开了一种副短短芽孢杆菌Brevibacillus parabrevis CGMCC 10798角蛋白酶的分离纯化方法及应用。通过对一株副短短芽孢杆菌进行发酵培养，并对发酵液上清液采用硫酸铵沉淀和阴离子层析等步骤进行酶纯化，获得了SDS-PAGE电泳均一的副短短芽孢杆菌角蛋白酶，该纯酶的比酶活为6605.48U/mg，纯化倍数为13.18倍。获得的角蛋白酶对表面活性剂耐受性好、对角蛋白活力高、对胶原蛋白无酶活。本工艺特异性高，操作条件温和，步骤简洁，纯化效果好，回收率高，成本低，易于扩大化。本发明所获得副短短芽孢杆菌角蛋白酶在制革脱毛领域和促进药物吸收方面具有良好的应用前景。

公开(公告)号：CN106282210A

公开(公告)日：2017-01-04

申请号：CN201610962251.7

申请日：2016-11-04

申请人： 江南大学

发明人： 史劲松 ,  张荣先 ,  龚劲松 ,  许正宏 ,  李恒

IPC分类号： C12N15/57 ,  C12N9/48 ,  C12N15/63 ,  C12N1/21 ,  C12N1/19 ,  C12N1/15 ,  C14C1/06

CPC分类号： C12N9/48 ,  C14C1/065

摘要： 本发明提供了一种编码角蛋白酶的基因及其重组表达和应用。通过提取来源于副短短芽孢杆菌(Brevibacillus parabrevis CGMCC 10798)的总DNA PCR获得角蛋白酶编码基因kerbp，该基因全长1152个核苷酸，编码383个氨基酸。其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。本发明还公开了一种角蛋白酶的重组表达和分离纯化的方法，以大肠杆菌E.coli为例，将E.coli BL21(DE3)作为表达宿主，实现了角蛋白酶基因的异源表达。重组角蛋白酶的最适作用pH和温度分别是8.0和60℃；Tween 40和Triton X-100对该酶的活性有促进作用。本发明所提供的角蛋白酶能有效对羊皮脱毛，在制革、洗涤、纺织、蛋白废弃物处理等行业有良好的应用前景。

公开(公告)号：CN107828765B

公开(公告)日：2020-05-08

申请号：CN201711058163.5

申请日：2017-11-01

申请人： 江南大学

发明人： 史劲松 ,  许正宏 ,  张荣先 ,  龚劲松 ,  李恒 ,  苏畅

IPC分类号： C12N9/52

摘要： 本发明公开了热稳定性提升的角蛋白酶突变体及其应用，属于工业生物技术领域。将来源于Brevibacillus parabrevis CGMCC No.10798的角蛋白酶第181位天冬酰胺、第218位酪氨酸、第236位丝氨酸进行定点突变改造，并对上述位点进行随机组合制备获得组合突变体。本发明实现了角蛋白酶热稳定性的1～4.09倍的显著提高，具有良好的理论价值和应用前景。

公开(公告)号：CN107916308B

公开(公告)日：2019-09-17

申请号：CN201711173638.5

申请日：2017-11-22

申请人： 江南大学

发明人： 史劲松 ,  龚劲松 ,  张荣先 ,  许正宏 ,  李恒 ,  苏畅

IPC分类号： C14C1/06 ,  C12N9/50 ,  C12N9/26 ,  C12N9/20

摘要： 本发明公开了一种角蛋白酶的复配及在工业生产中的应用，属于工业生物技术领域。本发明提供了一种角蛋白酶单独或者与脂肪酶、淀粉酶进行复配并应用于工业制革脱毛的方法，具有脱毛效率高、作用条件温和、安全性好等优点。采用角蛋白酶可以能够独立完成羊皮脱毛，并对脱毛皮革质量进行表征，脱毛效果与商品酶相同；另外还提供了脂肪酶、淀粉酶与角蛋白酶对羊皮进行复配脱毛，三种酶的结合对羊皮脱毛具有协同作用，可以减少酶的用量，并提高脱毛效率。本发明所获得角蛋白酶及其复配酶制剂在制革领域中具有良好的应用前景。

公开(公告)号：CN107916308A

公开(公告)日：2018-04-17

申请号：CN201711173638.5

申请日：2017-11-22

申请人： 江南大学

发明人： 史劲松 ,  龚劲松 ,  张荣先 ,  许正宏 ,  李恒 ,  苏畅

IPC分类号： C14C1/06 ,  C12N9/50 ,  C12N9/26 ,  C12N9/20

摘要： 本发明公开了一种角蛋白酶的复配及在工业生产中的应用，属于工业生物技术领域。本发明提供了一种角蛋白酶单独或者与脂肪酶、淀粉酶进行复配并应用于工业制革脱毛的方法，具有脱毛效率高、作用条件温和、安全性好等优点。采用角蛋白酶可以能够独立完成羊皮脱毛，并对脱毛皮革质量进行表征，脱毛效果与商品酶相同；另外还提供了脂肪酶、淀粉酶与角蛋白酶对羊皮进行复配脱毛，三种酶的结合对羊皮脱毛具有协同作用，可以减少酶的用量，并提高脱毛效率。本发明所获得角蛋白酶及其复配酶制剂在制革领域中具有良好的应用前景。

公开(公告)号：CN107828765A

公开(公告)日：2018-03-23

申请号：CN201711058163.5

申请日：2017-11-01

申请人： 江南大学

发明人： 史劲松 ,  许正宏 ,  张荣先 ,  龚劲松 ,  李恒 ,  苏畅

IPC分类号： C12N9/52

摘要： 本发明公开了热稳定性提升的角蛋白酶突变体及其应用，属于工业生物技术领域。将来源于Brevibacillus parabrevis CGMCC No.10798的角蛋白酶第181位天冬酰胺、第218位酪氨酸、第236位丝氨酸进行定点突变改造，并对上述位点进行随机组合制备获得组合突变体。本发明实现了角蛋白酶热稳定性的1～4.09倍的显著提高，具有良好的理论价值和应用前景。

公开(公告)号：CN105505793A

公开(公告)日：2016-04-20

申请号：CN201511026721.0

申请日：2015-12-31

申请人： 江南大学

发明人： 史劲松 ,  龚劲松 ,  张荣先 ,  许正宏 ,  李恒 ,  窦文芳 ,  陆震鸣 ,  张旦旦

IPC分类号： C12N1/14 ,  C12N9/58 ,  C11D3/386 ,  C12R1/645

CPC分类号： C12R1/645 ,  C11D3/386 ,  C12N9/58

摘要： 本发明公开了一株产角蛋白酶的真菌赤霉菌Gibberella intermedia CA3-1及其应用方法。经初步发酵优化后真菌角蛋白酶的活力可达109U/mL；该酶对角蛋白和酪蛋白酶活高、对胶原蛋白酶活低，SDS对酶活具有促进作用。所产角蛋白酶可独立完成或协助去污剂完成去除棉布上的污渍，提高洗涤效率。同时，该真菌角蛋白酶可完成对羊皮的脱毛处理。本发明所获得的产真菌角蛋白酶的赤霉菌在洗涤、制革、纺织领域具有良好的应用前景。