公开(公告)号：CN110066829B

公开(公告)日：2023-04-28

申请号：CN201910361106.7

申请日：2019-04-30

Applicant: 江南大学

Inventor： 饶志明 ,  林春 ,  邵明龙 ,  张显 ,  杨套伟 ,  徐美娟

IPC: C12N15/90 ,  C12N1/21 ,  C12R1/32

Abstract: 本发明公开了一种CRISPR/Cas9基因编辑系统及其应用，属于基因工程技术领域以及生物工程技术领域。此系统可达到对新金色分枝杆菌进行基因编辑的目的；此系统使用的pML‑Cas9质粒和pJM‑sgRNA质粒就能够在新金色分枝杆菌中稳定存在、表达，不会随着新金色分枝杆菌的传代丢失，也不会被新金色分枝杆菌自身所存在的保护机制排斥；利用此系统的CRISPR/Cas9基因编辑系统系统对新金色分枝杆菌进行基因编辑，敲除效率较高，可达50％。

公开(公告)号：CN109971789A

公开(公告)日：2019-07-05

申请号：CN201910225056.X

申请日：2019-03-25

Applicant: 江南大学

Inventor： 饶志明 ,  童丽珍 ,  江文慧 ,  李施琼 ,  刘秋林 ,  刘栗彤 ,  林春 ,  邵明龙

IPC: C12N15/90 ,  C12N15/74 ,  C12N1/21 ,  C12R1/32

Abstract: 本发明公开了一种基因编辑系统及其在新金色分枝杆菌中的应用，属于基因工程技术领域以及生物工程技术领域。此系统可达到对新金色分枝杆菌进行基因编辑的目的，其工作机制如下：先将pML‑Cpf1质粒导入新金色分枝杆菌中，使得pML‑Cpf1质粒上的Cpf1基因、编码DNA末端结合蛋白mku的基因以及编码DNA连接酶LigD的基因表达，然后将pJM‑crRNA质粒导入新金色分枝杆菌中，使得pJM‑crRNA质粒转录生成crRNA序列，crRNA序列会与Cpf1基因结合形成复合物，此复合物会靶向并切割需编辑基因使得新金色分枝杆菌中需编辑的基因被敲除。

公开(公告)号：CN110066829A

公开(公告)日：2019-07-30

申请号：CN201910361106.7

申请日：2019-04-30

Applicant: 江南大学

Inventor： 饶志明 ,  林春 ,  邵明龙 ,  张显 ,  杨套伟 ,  徐美娟

IPC: C12N15/90 ,  C12N1/21 ,  C12R1/32

Abstract: 本发明公开了一种CRISPR/Cas9基因编辑系统及其应用，属于基因工程技术领域以及生物工程技术领域。此系统可达到对新金色分枝杆菌进行基因编辑的目的；此系统使用的pML-Cas9质粒和pJM-sgRNA质粒就能够在新金色分枝杆菌中稳定存在、表达，不会随着新金色分枝杆菌的传代丢失，也不会被新金色分枝杆菌自身所存在的保护机制排斥；利用此系统的CRISPR/Cas9基因编辑系统系统对新金色分枝杆菌进行基因编辑，敲除效率较高，可达50％。