公开(公告)号：CN108753746B

公开(公告)日：2021-03-30

申请号：CN201810568782.7

申请日：2018-06-05

申请人： 江南大学

发明人： 吴敬 ,  宿玲恰 ,  陈春 ,  封金云

IPC分类号： C12N9/10 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P19/18 ,  C12P19/12

摘要： 本发明公开了一种热稳定性提高的麦芽寡糖基海藻糖合成酶突变体，属于酶工程以及蛋白质工程技术领域。本发明的麦芽寡糖基海藻糖合成酶突变体是通过将麦芽寡糖基海藻糖合成酶的一个氨基酸位点进行突变，得到了与亲本麦芽寡糖基海藻糖合成酶相比更高的热稳定性。本发明的麦芽寡糖基海藻糖合成酶突变体在50℃的半衰期比野生型增加41h，是野生型的2倍，即本发明的麦芽寡糖基海藻糖合成酶突变体的稳定性较野生型提高了2倍。

公开(公告)号：CN108753746A

公开(公告)日：2018-11-06

申请号：CN201810568782.7

申请日：2018-06-05

申请人： 江南大学

发明人： 吴敬 ,  宿玲恰 ,  陈春 ,  封金云

IPC分类号： C12N9/10 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P19/18 ,  C12P19/12

CPC分类号： C12N9/1051 ,  C12N15/70 ,  C12P19/12 ,  C12P19/18 ,  C12Y204/01245

摘要： 本发明公开了一种热稳定性提高的麦芽寡糖基海藻糖合成酶突变体，属于酶工程以及蛋白质工程技术领域。本发明的麦芽寡糖基海藻糖合成酶突变体是通过将麦芽寡糖基海藻糖合成酶的一个氨基酸位点进行突变，得到了与亲本麦芽寡糖基海藻糖合成酶相比更高的热稳定性。本发明的麦芽寡糖基海藻糖合成酶突变体在50℃的半衰期比野生型增加41h，是野生型的2倍，即本发明的麦芽寡糖基海藻糖合成酶突变体的稳定性较野生型提高了2倍。

公开(公告)号：CN108753747B

公开(公告)日：2021-02-26

申请号：CN201810568791.6

申请日：2018-06-05

申请人： 江南大学

发明人： 吴敬 ,  宿玲恰 ,  陈春 ,  封金云

IPC分类号： C12N9/10 ,  C12N15/54 ,  C12P19/12

摘要： 本发明公开了一种热稳定性和海藻糖产量提高的MTSase突变体，属于酶工程以及蛋白质工程技术领域。本发明的麦芽寡糖基海藻糖合成酶突变体是通过将麦芽寡糖基海藻糖合成酶的一个氨基酸位点进行突变，得到了与亲本麦芽寡糖基海藻糖合成酶相比更高的热稳定性、更低的加酶量以及更高的产海藻糖转化率。本发明的麦芽寡糖基海藻糖合成酶突变体在50℃的半衰期比野生型增加12h，是野生型的1.3倍。

公开(公告)号：CN110055233B

公开(公告)日：2020-09-04

申请号：CN201910318019.3

申请日：2019-04-19

申请人： 江南大学

发明人： 吴敬 ,  宿玲恰 ,  陈春 ,  王子瑞

IPC分类号： C12N9/10 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12P19/18 ,  C12P19/14 ,  C12P19/12

摘要： 本发明公开了一种热稳定性提高的MTSase突变体及其应用，属于酶工程以及蛋白质工程技术领域。本发明的MTSase突变体S361R、S444E、S361R/S444E、S361K/S444E和G415P/S361R/S444E在60℃处理10min后的残余酶活分别为70.3％、50.1％、83.5％、65.9％、以及100％，是野生型的1.6、1.1、1.9、1.5以及2.3倍，其中，S361R/S444E和G415P/S361R/S444E在60℃的半衰期分别是14.9min和90.8min，分别是野生型的3.2和19.7倍，说明本发明的MTSase突变体热稳定性较野生型有了显著的改善。

公开(公告)号：CN111944784B

公开(公告)日：2022-02-01

申请号：CN202010798479.3

申请日：2020-08-11

申请人： 江南大学

发明人： 吴敬 ,  宿玲恰 ,  陈春

IPC分类号： C12N9/26 ,  C12N15/56 ,  C12N15/10 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P19/14 ,  C12P19/12 ,  C12R1/19

摘要： 本发明公开了热稳定性提高的麦芽寡糖基海藻水解酶突变体及其应用，属于基因工程和酶工程技术领域。本发明的麦芽寡糖基海藻糖水解酶突变体是通过将麦芽寡糖基海藻糖水解酶的两个氨基酸位点分别进行突变，得到了与亲本麦芽寡糖基海藻糖水解酶相比更高的热稳定性。本发明的麦芽寡糖基海藻糖水解酶两个突变体在60℃的半衰期半衰期比野生型增加5和8min，分别为是野生型的1.3和1.5倍，同时海藻糖转化率都比野生性提高。

公开(公告)号：CN108753747A

公开(公告)日：2018-11-06

申请号：CN201810568791.6

申请日：2018-06-05

申请人： 江南大学

发明人： 吴敬 ,  宿玲恰 ,  陈春 ,  封金云

IPC分类号： C12N9/10 ,  C12N15/54 ,  C12P19/12

摘要： 本发明公开了一种热稳定性和海藻糖产量提高的MTSase突变体，属于酶工程以及蛋白质工程技术领域。本发明的麦芽寡糖基海藻糖合成酶突变体是通过将麦芽寡糖基海藻糖合成酶的一个氨基酸位点进行突变，得到了与亲本麦芽寡糖基海藻糖合成酶相比更高的热稳定性、更低的加酶量以及更高的产海藻糖转化率。本发明的麦芽寡糖基海藻糖合成酶突变体在50℃的半衰期比野生型增加12h，是野生型的1.3倍。

公开(公告)号：CN108707634A

公开(公告)日：2018-10-26

申请号：CN201810569402.1

申请日：2018-06-05

申请人： 江南大学

发明人： 吴敬 ,  宿玲恰 ,  封金云 ,  陈春

IPC分类号： C12P19/18 ,  C12P19/14 ,  C12P19/12

CPC分类号： C12P19/18 ,  C12P19/12 ,  C12P19/14

摘要： 本发明公开了一种多酶偶联生产海藻糖的方法及其应用，属于酶技术领域。本发明以大米淀粉为底物，利用4‑α糖基转移酶和环糊精葡萄糖基转移酶的歧化活性，采用普鲁兰酶、麦芽寡糖基海藻糖合成酶(MTSase)、麦芽寡糖基海藻糖水解酶(MTHase)、4‑α糖基转移酶(TaAM)以及环糊精葡萄糖基转移酶(CGTase)进行多酶偶联提高底物利用率，从而提高海藻糖的产量。

公开(公告)号：CN113308446B

公开(公告)日：2023-10-03

申请号：CN202110573135.7

申请日：2021-05-25

申请人： 江南大学

发明人： 吴敬 ,  宿玲恰 ,  陈春 ,  夏伟

IPC分类号： C12N9/10 ,  C12N15/54 ,  C12P19/12 ,  C12P19/14 ,  C12P19/16 ,  C12P19/18

摘要： 本发明公开了一种海藻糖转化率提高的麦芽寡糖基海藻糖合成酶突变体及其应用，属于基因工程和酶工程技术领域。本发明的麦芽寡糖基海藻糖合成酶突变体是通过将麦芽寡糖基海藻糖合成酶的氨基酸第47位点进行突变，得到了与亲本麦芽寡糖基海藻糖合成酶海藻糖转化率更高的突变体。本发明的麦芽寡糖基海藻糖合成酶S47P、S47Q、S47D、S47V、S47L、S47N和S47A的海藻糖转化率得到提高，相对野生型分别提高0.9％、1.0％、1.6％、2.1％、3.3％、6.0％和8.0％。

公开(公告)号：CN113308446A

公开(公告)日：2021-08-27

申请号：CN202110573135.7

申请日：2021-05-25

申请人： 江南大学

发明人： 吴敬 ,  宿玲恰 ,  陈春 ,  夏伟

IPC分类号： C12N9/10 ,  C12N15/54 ,  C12P19/12 ,  C12P19/14 ,  C12P19/16 ,  C12P19/18

摘要： 本发明公开了一种海藻糖转化率提高的麦芽寡糖基海藻糖合成酶突变体及其应用，属于基因工程和酶工程技术领域。本发明的麦芽寡糖基海藻糖合成酶突变体是通过将麦芽寡糖基海藻糖合成酶的氨基酸第47位点进行突变，得到了与亲本麦芽寡糖基海藻糖合成酶海藻糖转化率更高的突变体。本发明的麦芽寡糖基海藻糖合成酶S47P、S47Q、S47D、S47V、S47L、S47N和S47A的海藻糖转化率得到提高，相对野生型分别提高0.9％、1.0％、1.6％、2.1％、3.3％、6.0％和8.0％。

公开(公告)号：CN108707634B

公开(公告)日：2021-08-24

申请号：CN201810569402.1

申请日：2018-06-05

申请人： 江南大学

发明人： 吴敬 ,  宿玲恰 ,  封金云 ,  陈春

IPC分类号： C12P19/18 ,  C12P19/14 ,  C12P19/12

摘要： 本发明公开了一种多酶偶联生产海藻糖的方法及其应用，属于酶技术领域。本发明以大米淀粉为底物，利用4‑α糖基转移酶和环糊精葡萄糖基转移酶的歧化活性，采用普鲁兰酶、麦芽寡糖基海藻糖合成酶(MTSase)、麦芽寡糖基海藻糖水解酶(MTHase)、4‑α糖基转移酶(TaAM)以及环糊精葡萄糖基转移酶(CGTase)进行多酶偶联提高底物利用率，从而提高海藻糖的产量。