一种无血清培养基的添加剂及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN112725269A

    公开(公告)日:2021-04-30

    申请号:CN202110220798.0

    申请日:2021-02-26

    IPC分类号: C12N5/0775

    摘要: 本发明属于细胞培养技术领域,具体的,本发明涉及一种无血清培养基的添加剂及其制备方法和应用。本发明的无血清培养基的添加剂,通过三种组分的协同配比,可以取代血清、血小板裂解液等动物源成分,添加剂的成分明确、不同批次之间重复性好、临床安全性高,满足脂肪、骨髓、脐带、脐血、胎盘等不同来源的间充质干细胞体外培养的需求。进一步地,本发明的无血清培养基的添加剂为冻干粉剂,能够长期保存、稳定性高,各组分的活性不易丧失,适于长期保藏、运输。

    CD317蛋白在预防和治疗病毒感染中的应用

    公开(公告)号:CN111514278A

    公开(公告)日:2020-08-11

    申请号:CN202010426429.2

    申请日:2020-05-19

    发明人: 孙振华 徐献毅

    IPC分类号: A61K38/17 A61K45/06 A61P31/22

    摘要: 本发明公开了CD317在预防和/或治疗人疱疹病毒6型(human herpes virus 6,HHV‑6)感染中的用途。通过构建表达人源CD317基因的表达载体并进一步构建CD317表达上调的宿主细胞,将HHV‑6病毒株感染CD317表达上调的宿主细胞,然后检测立早期蛋白IE1的表达水平和病毒生产力的变化,发现与Control组相比,CD317表达上调可以显著降低立早期蛋白IE1的表达和降低病毒总产量,说明CD317蛋白可以显著抑制HHV‑6病毒增殖和减少HHV‑6病毒入侵感染宿主细胞,具有显著的抗HHV‑6病毒活性,可用于制备预防和/或治疗HHV‑6感染的药物。

    一种用于NK细胞体外扩增的培养基体系及NK细胞体外扩增的方法

    公开(公告)号:CN109294985A

    公开(公告)日:2019-02-01

    申请号:CN201811250648.9

    申请日:2018-10-25

    IPC分类号: C12N5/0783

    摘要: 本发明涉及一种用于NK细胞体外扩增的培养基体系及NK细胞体外扩增的方法。本发明利用固化的anti-CD137和RetroNectin直接培养Ficoll分离的PBMC,采用OK-432作为生物效应剂,在GM-CSF、IL-4、IL-2、IL-15、IL-21共同作用下体外活化和扩增自然杀伤细胞,创建了一种高效的NK细胞体外扩增方法;该方法制备的NK细胞CD3-CD16+/CD56+细胞表达率高达92.5%以上,经过14天培养,NK细胞可扩增1000~2000倍,体外杀瘤活性强。

    一种无血清培养基的添加剂及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN112725269B

    公开(公告)日:2022-11-22

    申请号:CN202110220798.0

    申请日:2021-02-26

    IPC分类号: C12N5/0775

    摘要: 本发明属于细胞培养技术领域,具体的,本发明涉及一种无血清培养基的添加剂及其制备方法和应用。本发明的无血清培养基的添加剂,通过三种组分的协同配比,可以取代血清、血小板裂解液等动物源成分,添加剂的成分明确、不同批次之间重复性好、临床安全性高,满足脂肪、骨髓、脐带、脐血、胎盘等不同来源的间充质干细胞体外培养的需求。进一步地,本发明的无血清培养基的添加剂为冻干粉剂,能够长期保存、稳定性高,各组分的活性不易丧失,适于长期保藏、运输。

    一种微载体培养细胞计数方法
    6.
    发明公开

    公开(公告)号:CN112485179A

    公开(公告)日:2021-03-12

    申请号:CN202011465983.8

    申请日:2020-12-14

    摘要: 本发明属于细胞培养技术领域,涉及一种微载体培养细胞计数方法,包括:取样离心:取适量微载体培养细胞得到混悬液,离心后去上清获得沉淀物;释放重悬:所述沉淀物加适量溶解剂,和洗涤剂混液重悬后静置;染色计数:加染色剂染色后混匀计数。本发明中将难溶于水的微载体,在引入溶解剂和洗涤剂的情况下,微载体可以快速和细胞分离并且溶解,并且溶解剂和洗涤剂破坏细胞膜后使染色剂快速对细胞核染色。该计数方法原料成本低,方法温和,计数结果准确过程快捷,在微载体计数方面有极大应用前景。

    一种基于FcγRⅢa的嵌合基因及其用途

    公开(公告)号:CN105647946B

    公开(公告)日:2019-09-20

    申请号:CN201610156775.7

    申请日:2016-03-18

    发明人: 孙振华

    摘要: 本发明涉及一种基于FcγRⅢa的嵌合基因及其用途,所述嵌合基因包括依次串联的FcγRⅢa信号肽、FcγRⅢa细胞外区域、CD8α跨膜区域和胞内信号传导结构域,所述FcγRⅢa细胞外区域直接与CD8α跨膜区域连接;本发明通过将FcγRⅢa细胞外结构域直接与CD8α跨膜区连接,删除了常规嵌合抗原受体(CAR)分子设计中的CD8α铰合区,使得该种FcγRⅢa‑CAR分子更有利于激活效应细胞,显著提高了FcγRⅢa‑CAR分子对肿瘤细胞的杀伤能力;该种设计的FcγRⅢa‑CAR分子与单克隆抗体药物联合可通用于多种肿瘤的细胞治疗。

    一种无血清培养基及其制备方法

    公开(公告)号:CN112961825B

    公开(公告)日:2022-11-22

    申请号:CN202110219914.7

    申请日:2021-02-26

    IPC分类号: C12N5/0775

    摘要: 本发明属于细胞培养技术领域,具体的,本发明涉及一种无血清培养基及其制备方法。本发明的无血清培养基,以成分无血清培养及的添加剂代替血清、血小板裂解液等动物源成分,无血清培养基的成分来源明确、批次间重复性好、临床安全性高,能够提供间充质干细胞快速生长、增殖所需的各类物质成分,并保持其干细胞特性,满足脂肪、骨髓、脐带、脐血、胎盘等不同来源的间充质干细胞体外培养的需求。

    一种用于NK细胞体外扩增的培养基体系及NK细胞体外扩增的方法

    公开(公告)号:CN109294985B

    公开(公告)日:2022-02-18

    申请号:CN201811250648.9

    申请日:2018-10-25

    发明人: 孙振华 曹晖

    IPC分类号: C12N5/0783

    摘要: 本发明涉及一种用于NK细胞体外扩增的培养基体系及NK细胞体外扩增的方法。本发明利用固化的anti‑CD137和RetroNectin直接培养Ficoll分离的PBMC,采用OK‑432作为生物效应剂,在GM‑CSF、IL‑4、IL‑2、IL‑15、IL‑21共同作用下体外活化和扩增自然杀伤细胞,创建了一种高效的NK细胞体外扩增方法;该方法制备的NK细胞CD3‑CD16+/CD56+细胞表达率高达92.5%以上,经过14天培养,NK细胞可扩增1000~2000倍,体外杀瘤活性强。