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公开(公告)号:CN117070567A
公开(公告)日:2023-11-17
申请号:CN202310795095.X
申请日:2023-06-30
申请人: 江苏省农业科学院 , 韩国首尔国立大学 , 兽用生物制品(泰州)国泰技术创新中心
发明人: 谢星 , 冯志新 , 宋錞燮 , 陈蓉 , 郝飞 , 徐路路 , 廉旻珠 , 林鍾佑 , 张磊 , 甘源 , 赵龙 , 李文良 , 熊祺琰 , 刘永杰 , 刘蓓蓓 , 于岩飞 , 白昀 , 邵国青
摘要: 本发明提供一种兼用于猪呼吸道和消化道的病毒载体递送系统及其应用,属于生物技术领域。该病毒载体递送系统,包括骨架质粒和辅助质粒:所述骨架质粒是在pUC57质粒中插入了B型猪肠道病毒全长cDNA后得到的;所述辅助质粒是将绿色荧光蛋白编码基因插入质粒pCAG‑T7‑polymerase中所得。本发明病毒载体递送系统,建效率高,感染细胞后能够快速产生细胞病变,病毒滴度可达到107.75 TCID50/mL,且保持稳定性高。在骨架质粒中插入猪呼吸道和消化道病原表位,无致病性,稳定性好,病毒滴度高,接种猪只后,具有较好的免疫效果。因此,本发明病毒载体递送系统可用于构建多种猪呼吸道和消化道疫苗候选毒株。
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公开(公告)号:CN116769941A
公开(公告)日:2023-09-19
申请号:CN202310719274.5
申请日:2023-06-16
申请人: 江苏省农业科学院 , 兽用生物制品(泰州)国泰技术创新中心
IPC分类号: C12Q1/689 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/35
摘要: 本发明的提供用于检测支原体的组合物和试剂盒,属于生物技术领域。用于检测支原体的组合物,其特征在于是含有引物M‑F、引物M‑R和探针M‑P的水溶液;所述M‑F的序列如SEQ ID NO:1所示;M‑R的序列如SEQ ID NO:2所示;探针M‑P的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示,5’端连接有荧光基团FAM,3’端连接有淬灭基团BHQ1。采用本发明组合物检测支原体,灵敏度高、特异性强、检测范围广。
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公开(公告)号:CN117843737B
公开(公告)日:2024-05-03
申请号:CN202410240804.2
申请日:2024-03-04
申请人: 江苏省农业科学院
摘要: 本发明提供一种猪鼻支原体抗原含量检测试剂盒及其应用,属于生物工程技术领域。所述猪鼻支原体抗原含量检测试剂盒,包括抗猪鼻支原体单克隆抗体6D5和兔抗猪鼻支原体P37蛋白多克隆抗体;所述抗猪鼻支原体单克隆抗体6D5是由杂交瘤细胞株6D5分泌的,所述杂交瘤细胞株6D5的保藏编号为CCTCC NO:C2022375。本发明试剂盒用于检测猪鼻支原体抗原含量时,费时短、准确性高、能直接反映猪鼻支原体抗原含量,可以用于灭活疫苗及成品疫苗的有效抗原含量检测。
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公开(公告)号:CN117843737A
公开(公告)日:2024-04-09
申请号:CN202410240804.2
申请日:2024-03-04
申请人: 江苏省农业科学院
摘要: 本发明提供一种猪鼻支原体抗原含量检测试剂盒及其应用,属于生物工程技术领域。所述猪鼻支原体抗原含量检测试剂盒,包括抗猪鼻支原体单克隆抗体6D5和兔抗猪鼻支原体P37蛋白多克隆抗体;所述抗猪鼻支原体单克隆抗体6D5是由杂交瘤细胞株6D5分泌的,所述杂交瘤细胞株6D5的保藏编号为CCTCC NO:C2022375。本发明试剂盒用于检测猪鼻支原体抗原含量时,费时短、准确性高、能直接反映猪鼻支原体抗原含量,可以用于灭活疫苗及成品疫苗的有效抗原含量检测。
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公开(公告)号:CN111218433A
公开(公告)日:2020-06-02
申请号:CN201911308111.8
申请日:2019-12-18
申请人: 江苏省农业科学院
摘要: 本发明提供猪肺炎支原体毒力因子NADH黄素氧化还原酶及其应用,属于生物技术领域。该猪肺炎支原体毒力因子NADH黄素氧化还原酶的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示,编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。本发明首次发现了未知功能的猪肺炎支原体蛋白NADH黄素氧化还原酶的毒力因子功能,包括结合纤溶酶原及纤连酶原的能力,对猪支气管上皮细胞具有黏附能力,诱导宿主细胞的氧化应激、释放乳酸脱氢酶和凋亡,因此猪肺炎支原体蛋白NADH黄素氧化还原酶能够应用于制备猪支原体肺炎新型疫苗和药物。
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公开(公告)号:CN108094315A
公开(公告)日:2018-06-01
申请号:CN201711362236.X
申请日:2017-12-18
申请人: 江苏省农业科学院
摘要: 本发明提供构建猪肺炎支原体小鼠发病模型的方法及鉴别强弱毒株的方法,属于动物模型领域。构建方法是对小鼠进行两次攻毒,第一次攻毒后13‑15天,获得小鼠发病模型;第二次攻毒是在第一次攻毒后42‑54小时进行的;每次攻毒时,向每只小鼠的左右鼻孔各滴入至少25μL 109CCU/ml的猪肺炎支原体培养物,然后对每只小鼠腹腔注射至少50μL 109CCU/ml的猪肺炎支原体培养物。鉴别强弱毒株的方法是构建小鼠发病模型,通过对小鼠肺脏病变进行评分等鉴别强弱毒株。本发明弥补了猪肺炎支原体体外细胞模型不能模拟体内环境的缺陷,也解决了多株猪肺炎支原体菌株在本体动物猪上进行试验的成本和场地等饲养环境的制约。
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公开(公告)号:CN111929438B
公开(公告)日:2024-04-05
申请号:CN202010806738.2
申请日:2020-08-12
IPC分类号: G01N33/569 , G01N33/558 , G01N33/58 , G01N33/543 , G01N33/533
摘要: 本发明提供一种检测非洲猪瘟病毒抗体的量子点微球免疫层析试纸条及其应用,属于兽医生物诊断制品的生产和技术领域。该试纸条包括底板,所述底板上依次设有样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫;结合垫上包被有量子点微球标记的重组蛋白P30V和重组多肽串联蛋白R10;硝酸纤维素膜上设有检测线和质控线,检测线处包被有羊抗猪IgG多抗,检测线靠近所述结合垫一侧设置;质控线处包被有非洲猪瘟病毒P30单抗,质控线靠近所述吸水垫一侧设置。配合所述试纸条使用的样本稀释液,是含有BSA和Tween20的PBS缓冲液。本发明检测方法,可用于非洲猪瘟病毒抗体的快速、高特异性、高灵敏度的定性或定量检测。
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公开(公告)号:CN111912984B
公开(公告)日:2024-04-05
申请号:CN202010806185.0
申请日:2020-08-12
IPC分类号: G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/558 , G01N33/58 , G01N33/543 , G01N33/52
摘要: 本发明提供一种检测非洲猪瘟病毒CD2v与MGF360黏膜抗体的试纸条及其应用,属于兽医生物诊断制品的生产和技术领域。该试纸条包括设有检测线和质控线的硝酸纤维素膜,检测线处包被有鼠抗猪SC蛋白单克隆抗体;质控线处包被有非洲猪瘟阳性血清的纯化蛋白。样本稀释液含有量子点微球标记的重组蛋白MGF360和重组蛋白CD2v;重组蛋白MGF360的序列如SEQ ID NO:4;重组蛋白CD2v的序列如SEQ ID NO:2。采用本发明试纸条和样本稀释液检测非洲猪瘟病毒CD2v与MGF360黏膜抗体,可用于非洲猪瘟感染的早期检测,且特异性强,灵敏度高,稳定性好。
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公开(公告)号:CN112485423A
公开(公告)日:2021-03-12
申请号:CN202011277555.2
申请日:2020-11-16
申请人: 江苏省农业科学院
IPC分类号: G01N33/569 , G01N33/543
摘要: 本发明提供一种通用的猪支原体抗原含量快速检测试剂盒及其应用,属于生物工程技术领域。该试剂盒包括采用猪支原体抗原包被的酶标板和兔抗EF‑Tu血清;所述兔抗EF‑Tu血清是采用重组EF‑Tu蛋白免疫新西兰兔,采血分离血清后所得,所述重组EF‑Tu蛋白的序列如SEQ ID NO:4所示。本发明试剂盒,该方法耗时短、准确性高、能检测灭活疫苗中猪支原体抗原含量。
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公开(公告)号:CN107338225B
公开(公告)日:2020-08-28
申请号:CN201710556520.4
申请日:2017-07-10
申请人: 江苏省农业科学院
摘要: 本发明提供猪支气管上皮细胞系、制备方法及其应用,属于生物技术领域。猪支气管上皮细胞系hTERT‑PBEC,保藏编号为CCTCC NO:C201749。该细胞系hTERT‑PBEC的制备方法,包括构建携带绿色荧光蛋白基因和人端粒酶逆转录酶基因的真核表达载体pEGFP‑hTERT;利用Lipofectamin 3000将真核表达载体pEGFP‑hTERT转染猪原代支气管上皮细胞,通过G418筛选得到猪支气管上皮细胞系hTERT‑PBEC。本发明通过巧妙的方法,显著提高了筛选效率,得到的猪支气管上皮细胞系,能够稳定传代至60代以上,且保留有原代细胞的特性,能够应用于研究猪呼吸道病原感染致病机理中。
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