公开(公告)号：CN101270359B

公开(公告)日：2012-05-23

申请号：CN200810025285.9

申请日：2008-04-30

Applicant: 江苏省原子医学研究所

Inventor： 俞惠新 ,  张莉 ,  谭成 ,  陆春雄 ,  林秀峰 ,  陈波 ,  宋翠翠 ,  曹国宪 ,  张荣军 ,  黄群 ,  徐希杰

IPC: C12N15/12 ,  C12N15/70 ,  C07K14/47 ,  A61K38/17 ,  A61P25/28 ,  G01N33/68

Abstract: 一种重组人淀粉样蛋白Aβ42的制备方法及应用，属于融合蛋白技术领域。本发明根据人淀粉样蛋白前体蛋白APP的序列和克隆载体pGEX-4T-1多克隆位点，设计人淀粉样蛋白Aβ42的PCR上游引物P1，引入BamHI酶切位点，下游引物P2，引入SalI酶切位点及终止密码子TAG。利用RT-PCR技术，以人SH-SY5Y细胞cDNA为模板进行PCR扩增，产物片断长度为147bp，编码人APP从672到713的Aβ42片段。将Aβ42基因片段序列重组于原核表达载体pGEX-4T-1，构建表达人Aβ42的原核表达质粒pGEX-4T-1/Aβ42。将pGEX-4T-1/Aβ42转化入大肠杆菌BL21(DE3)中，经诱导表达、分离和酶切，得到纯化的有活性的重组人淀粉样蛋白Aβ42。

公开(公告)号：CN101270359A

公开(公告)日：2008-09-24

申请号：CN200810025285.9

申请日：2008-04-30

Applicant: 江苏省原子医学研究所

Inventor： 俞惠新 ,  张莉 ,  谭成 ,  陆春雄 ,  林秀峰 ,  陈波 ,  宋翠翠 ,  曹国宪 ,  张荣军 ,  黄群 ,  徐希杰

IPC: C12N15/12 ,  C12N15/70 ,  C07K14/47 ,  A61K38/17 ,  A61P25/28 ,  G01N33/68

Abstract: 一种重组人淀粉样蛋白Aβ42的制备方法及应用，属于融合蛋白技术领域。本发明根据人淀粉样蛋白前体蛋白APP的序列和克隆载体pGEX－4T－1多克隆位点，设计人淀粉样蛋白Aβ42的PCR上游引物P1，引入BamHI酶切位点，下游引物P2，引入SalI酶切位点及终止密码子TAG。利用RT－PCR技术，以人SH－SY5Y细胞cDNA为模板进行PCR扩增，产物片断长度为147bp，编码人APP从672到713的Aβ42片段。将Aβ42基因片段序列重组于原核表达载体pGEX－4T－1，构建表达人Aβ42的原核表达质粒pGEX－4T－1/Aβ42。将pGEX－4T－1/Aβ42转化入大肠杆菌BL21(DE3)中，经诱导表达、分离和酶切，得到纯化的有活性的重组人淀粉样蛋白Aβ42。