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公开(公告)号：CN116875562A
公开(公告)日：2023-10-13
申请号：CN202310864470.1
申请日：2023-07-14
Applicant: 河南农业大学
IPC: C12N7/00 , A61K39/215 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一株猪δ冠状病毒传代致弱毒株及其应用，属于生物医药技术领域。该弱毒株的保藏编号为CCTCC NO:V202363。该弱毒株是在猪肾上皮细胞上传代后经克隆纯化而得的传代致弱毒株。该毒株随着体外传代次数的增加，其在细胞上的敏感性和适应性逐渐增强，而其毒力显著降低，感染新生仔猪无明显临床症状。经序列分析，与强毒株相比，致弱毒株存在多个基因突变，且集中在S1蛋白。蛋白结构预测结果表明，部分突变可能改变了S蛋白的结构进而影响其致病性。致弱毒株和强毒株对仔猪肠道菌群的影响具有显著性差异，致弱毒株的感染会引起大量有益菌的丰度增加。该弱毒株生物安全风险较低，是具有较高安全性的疫苗候选弱毒株。
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公开(公告)号：CN115975011B
公开(公告)日：2025-04-29
申请号：CN202310055518.4
申请日：2023-01-16
Applicant: 河南农业大学
IPC: C07K16/08 , C12N15/13 , C12N15/85 , G01N33/569
Abstract: 本发明属于抗体制备技术领域，具体涉及一种针对p72蛋白的抗非洲猪瘟病毒的抗体。该抗体属于一种仅包括重链可变区VH与轻链可变区VL的单链抗体。本申请中，基于现有成熟噬菌体抗体库筛选技术，筛选获得了一个对非洲猪瘟病毒衣壳蛋白p72蛋白具有高亲和力的特异性scFv‑Fc抗体。初步实验结果表明，该单链抗体较好保留了对抗原的亲和活性，可以特异性的识别并结合衣壳蛋白p72；而且由于其分子量小、穿透力强，因此易于通过基因工程技术手段借助于原核或真核表达系统进行大量制备，可为非洲猪瘟病毒的检测、预防和治疗药物的开发奠定一定技术基础。
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公开(公告)号：CN115975011A
公开(公告)日：2023-04-18
申请号：CN202310055518.4
申请日：2023-01-16
Applicant: 河南农业大学
IPC: C07K16/08 , C12N15/13 , C12N15/85 , G01N33/569
Abstract: 本发明属于抗体制备技术领域，具体涉及一种针对p72蛋白的抗非洲猪瘟病毒的抗体。该抗体属于一种仅包括重链可变区VH与轻链可变区VL的单链抗体。本申请中，基于现有成熟噬菌体抗体库筛选技术，筛选获得了一个对非洲猪瘟病毒衣壳蛋白p72蛋白具有高亲和力的特异性scFv‑Fc抗体。初步实验结果表明，该单链抗体较好保留了对抗原的亲和活性，可以特异性的识别并结合衣壳蛋白p72；而且由于其分子量小、穿透力强，因此易于通过基因工程技术手段借助于原核或真核表达系统进行大量制备，可为非洲猪瘟病毒的检测、预防和治疗药物的开发奠定一定技术基础。
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公开(公告)号：CN109735505A
公开(公告)日：2019-05-10
申请号：CN201811602393.8
申请日：2018-12-26
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明涉及病毒技术领域，特别是指一株犬细小病毒毒株及其基因序列的扩增和应用。所述毒株的保藏号为CCTCC NO：V201873，保藏单位为中国典型培养物保藏中心，犬细小病毒毒株基因序列的全长5052bp。所述犬细小病毒毒株对1%猪红细胞产生的凝集效价为1:256，犬细小病毒毒株的TCID50为10-4.85/0.1mL。所述的犬细小病毒毒株基因序列的扩增，所述犬细小病毒毒株基因序列的扩增分段进行，包括Y型发卡结构扩增、U型发卡结构扩增和编码区序列扩增。本研究为河南CPV的流行、遗传进化等研究提供理论数据，同时为CPV的感染机制研究奠定基础。
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公开(公告)号：CN110904270A
公开(公告)日：2020-03-24
申请号：CN201911179585.7
申请日：2019-11-27
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明属于病毒检测领域，特别是指猪δ冠状病毒、猪流行性腹泻病毒和猪萨佩罗病毒的多重RT-PCR检测方法及应用。设计合成PEDV M基因、PDCoV N基因和PSV 2C基因的保守序列的3对特异性引物，然后对RT-PCR反应条件进行优化，建立了能同时检测猪δ冠状病毒、猪流行性腹泻病毒和猪萨佩罗病毒的多重RT-PCR诊断方法，并对所建立的方法进行特异性、敏感性和重复性分析；结果表明，本申请方法具有很好的特异性和较高的灵敏性，PDCoV的最低检测限量是1.40×102copies/µL、PEDV的最低检测量是1.53×102copies/µL和PSV的最低检测量是1.57×103copies/µL。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN119757752A
公开(公告)日：2025-04-04
申请号：CN202411989265.9
申请日：2024-12-31
Applicant: 河南农业大学
IPC: G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/535 , G01N33/531
Abstract: 本申请属于动物医学检测技术领域，具体涉及一种基于磁性纳米粒子的猪流行性腹泻病毒检测方法。该方法属于一种利用双探针竞争性ELISA检测方法，包括备板、加样、检测、显色、判定等步骤。本申请以磁性微球作为介质，将其与PEDV的N蛋白偶联后制备了磁性纳米粒子性的MNPs‑N探针。进一步结合McAb‑HRP探针的制备，建立了一种针对PEDV的双探针竞争性酶联免疫吸附方法。通过对相关检测参数和实验条件优化，可实现对PEDV的快速检测。相关实验结果表明，本申请检测方法可在50分钟内得出准确结果，而且具有极佳的批间和批内重现性。这一效果对于PED的即时检测判断和进一步的预防控制具有十分重要的技术意义。
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公开(公告)号：CN117723368A
公开(公告)日：2024-03-19
申请号：CN202311729822.9
申请日：2023-12-15
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种用于类器官回收固定的石蜡切片包埋方法，涉及组织病理学与生物技术领域。该包埋方法包括以下步骤：通过溶解基质胶，将类器官释放于多聚甲醛(PFA)固定液中，得到类器官的PFA悬液；对所述类器官的PFA悬液进行脱水处理后，再经透明处理，之后离心得到类器官沉淀；在所述类器官沉淀中加入融化的石蜡快速重悬，之后进行浸蜡处理，然后吸弃上清，用融化的石蜡再次快速重悬，转移至柱模中，之后凝固，脱模，得到柱形蜡块；将所述柱形蜡块放入模具中，利用石蜡进行包埋，脱模以及切片处理，得到所述石蜡切片。该包埋方法可以实现类器官的高效、高速和高质量回收固定及石蜡包埋，为类器官的切片技术提供最佳手段与前期保障。
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公开(公告)号：CN111955419B
公开(公告)日：2022-08-12
申请号：CN202010894845.5
申请日：2020-08-31
Applicant: 河南农业大学
IPC: A01K67/02
Abstract: 本发明属于家畜流行病领域，涉及猪流行性腹泻病毒（PEDV）与猪δ冠状病毒（PDCoV），特别是指PDCoV和PEDV共感染仔猪发病模型及其建立方法和应用。建立方法步骤如下：PDCoV和PEDV毒株的选择；选用5日龄健康仔猪，通过口服途径接种PDCoV毒株和PEDV毒株细胞的混合液；攻毒后每天测量体重、观察临床症状、并通过荧光定量PCR方法分别检测粪便排毒情况和小肠组织中的病毒载量并进行综合评价，建立PDCoV和PEDV共感染仔猪发病模型。本申请成功建立了PDCoV和PEDV共感染仔猪模型，为后续PDCoV与PEDV协同致病机理研究奠定了基础。
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公开(公告)号：CN116875562B
公开(公告)日：2024-06-14
申请号：CN202310864470.1
申请日：2023-07-14
Applicant: 河南农业大学
IPC: C12N7/00 , A61K39/215 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一株猪δ冠状病毒传代致弱毒株及其应用，属于生物医药技术领域。该弱毒株的保藏编号为CCTCC NO:V202363。该弱毒株是在猪肾上皮细胞上传代后经克隆纯化而得的传代致弱毒株。该毒株随着体外传代次数的增加，其在细胞上的敏感性和适应性逐渐增强，而其毒力显著降低，感染新生仔猪无明显临床症状。经序列分析，与强毒株相比，致弱毒株存在多个基因突变，且集中在S1蛋白。蛋白结构预测结果表明，部分突变可能改变了S蛋白的结构进而影响其致病性。致弱毒株和强毒株对仔猪肠道菌群的影响具有显著性差异，致弱毒株的感染会引起大量有益菌的丰度增加。该弱毒株生物安全风险较低，是具有较高安全性的疫苗候选弱毒株。
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公开(公告)号：CN116183927A
公开(公告)日：2023-05-30
申请号：CN202211087923.6
申请日：2022-09-07
Applicant: 河南农业大学
IPC: G01N33/68 , G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/58 , C12N15/34
Abstract: 本申请属于非洲猪瘟病毒检测技术领域，具体涉及一种基于p30蛋白的检测血清中抗非洲猪瘟抗体的双抗原夹心ELISA方法。该方法包括：抗原包被、封闭、加样和加入酶标抗原、显色和检测判定等步骤。本申请以特定重组p30蛋白为基础，以血清为检测样品，以非洲猪瘟抗体为检测对象，所构建的双抗原夹心ELISA法具有特异性好、成本低、可重复性强、可批量化检测应用的技术优点，可为预防和控制ASF的流行奠定一定的检测技术基础。
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