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公开(公告)号：CN112899239B
公开(公告)日：2024-05-07
申请号：CN202110376120.1
申请日：2021-04-08
Applicant: 河南农业大学
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/577 , G01N33/68 , G01N33/569 , G01N33/58 , G01N33/543
Abstract: 本发明属于生物技术领域，涉及杂交瘤细胞株及其分泌的抗体，特别是指一株抗猪δ冠状病毒（PDCoV）N蛋白抗原表位的单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其分泌的抗体和应用。所述抗原表位的氨基酸序列为326‑QDWEWDDA‑333，杂交瘤细胞株的分类命名为：杂交瘤细胞株PDCoV‑N‑6B7，保藏编号：CCTCC NO：C202178，保藏日：2021.3.26，保藏地址：中国，武汉，武汉大学。6B7单克隆抗体针对的抗原表位保守性强，是线性表位，属于免疫显性表位，有利于待检血清中的抗体结合，因此利用针对该表位的单克隆抗体建立阻断ELISA试剂盒会更加灵敏。
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公开(公告)号：CN117929729A
公开(公告)日：2024-04-26
申请号：CN202410120420.7
申请日：2024-01-29
Applicant: 河南农业大学
IPC: G01N33/569 , G01N33/543
Abstract: 本发明公开了一种快速检测猪δ冠状病毒IgG抗体的免疫磁珠检测试剂盒及其应用，属于生物技术领域。本发明将待检血清样本与试剂盒中的免疫磁珠共同孵育，免疫磁珠将PDCoV‑N蛋白特异性抗体从反应液中精准捕获，HRP标记的羊抗猪多克隆抗体作为检测抗体与免疫磁珠上PDCoV‑N蛋白的特异性抗体结合，于免疫磁珠上形成“PDCoV‑N蛋白‑PDCoV‑N特异性IgG抗体‑酶标记抗体”三聚体复合物，加入TMB底物液发生显色反应，通过颜色变化和吸光度值的测定可直接判定结果。本发明的试剂盒用于临床检测，结果与中和抗体试验的结果一致，灵敏度为92％，特异度为100％。本发明为猪δ冠状病毒的快速检测和防控提供新方法。
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公开(公告)号：CN117305254A
公开(公告)日：2023-12-29
申请号：CN202311499401.1
申请日：2023-11-13
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域，涉及猪δ冠状病毒，特别是指一种猪δ冠状病毒突变体病毒rPDCoV及其拯救方法和应用。本发明利用基因工程方法，对PDCoV野生毒株基因组进行改造，改造的氨基酸位点为病毒S蛋白S173→P和Y179→C，将改造后的病毒基因组克隆到pGF载体上，通过单酶切，体外转录以及电转染LLC‑PK1细胞，成功拯救出猪δ冠状病毒突变体病毒rPDCoV。本发明将PDCoV HNZK‑02株生物基因组分为6个片段，基于酵母转化相关同源重组的方法一步得到感染性克隆，避免了传统反向遗传学技术中需要将病毒基因组各片段逐一连接，也避免了传统的连接方法中酶切连接效率低下的问题，大大提高了连接效率。
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公开(公告)号：CN111955419B
公开(公告)日：2022-08-12
申请号：CN202010894845.5
申请日：2020-08-31
Applicant: 河南农业大学
IPC: A01K67/02
Abstract: 本发明属于家畜流行病领域，涉及猪流行性腹泻病毒（PEDV）与猪δ冠状病毒（PDCoV），特别是指PDCoV和PEDV共感染仔猪发病模型及其建立方法和应用。建立方法步骤如下：PDCoV和PEDV毒株的选择；选用5日龄健康仔猪，通过口服途径接种PDCoV毒株和PEDV毒株细胞的混合液；攻毒后每天测量体重、观察临床症状、并通过荧光定量PCR方法分别检测粪便排毒情况和小肠组织中的病毒载量并进行综合评价，建立PDCoV和PEDV共感染仔猪发病模型。本申请成功建立了PDCoV和PEDV共感染仔猪模型，为后续PDCoV与PEDV协同致病机理研究奠定了基础。
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公开(公告)号：CN118903401A
公开(公告)日：2024-11-08
申请号：CN202411289486.5
申请日：2024-09-14
Applicant: 河南农业大学
IPC: A61K39/295 , A61K39/215 , A61K39/225 , A61K39/39 , A61P31/14 , C07K14/165 , C07K14/17 , C07K1/18 , C12N15/50 , C12N15/866
Abstract: 本发明提供了一种猪流行性腹泻病毒、猪德尔塔冠状病毒和猪传染性胃肠炎病毒三联亚单位疫苗，具体属于疫苗制备技术领域。本发明提供了一种三联亚单位疫苗，包括抗原和免疫佐剂；所述抗原包括猪流行性腹泻病毒SCOE蛋白、猪德尔塔冠状病毒SRBD蛋白和猪传染性胃肠炎病毒SAD蛋白。本发明所述三联亚单位疫苗的抗原免疫原性好，疫苗预防效果好，且本发明制备的三联亚单位疫苗与单苗相比，可减少人工成本、减少疫苗免疫接种次数，简化繁杂的免疫程序，降低因免疫产生的应激性反应，显著减少生产成本，避免了毒素外泄，毒力返强，灭活不彻底等一系列安全隐患。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN118286411A
公开(公告)日：2024-07-05
申请号：CN202311742923.X
申请日：2023-12-18
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明属于生物医药免疫制剂制备技术领域，具体公开了一种基于酵母菌‑金属有机框架的复合微颗粒佐剂及其制备方法和应用。本发明通过生物矿化作用在酵母菌表面原位合成两种金属有机框架结构材料M‑MOF‑74和ZIF‑8，得到复合微颗粒佐剂yMZ，可用于制备预防性生物制品和免疫治疗药物。实验证明，yMZ‑OVA免疫小鼠后能够刺激树突状细胞成熟，诱导CD80和CD86的表达上调，并在DCs中发生溶酶体逃逸引发抗原交叉提呈；yMZ佐剂还能通过激活cGAS‑STING通路，提高抗原的免疫原性。用yMZ佐剂制备的TGEV灭活疫苗免疫小鼠后能够诱导机体产生较高水平的体液免疫和细胞免疫，免疫效果优于常用的铝佐剂。
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公开(公告)号：CN117929728A
公开(公告)日：2024-04-26
申请号：CN202410117422.0
申请日：2024-01-29
Applicant: 河南农业大学
IPC: G01N33/569 , G01N33/543
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种猪传染性胃肠炎病毒IgG抗体的免疫磁珠检测试剂盒及其应用。本发明提供的免疫磁珠包被有TGEV‑N蛋白，能将血清样本中含有的TGEV特异性抗体精准捕获，HRP标记的羊抗猪多克隆抗体作为检测抗体能与免疫磁珠上TGEV‑N蛋白的特异性抗体结合，确保了免疫磁珠的检测特异性。本发明通过调整封闭液组成与反应条件，使封闭液中的蛋白组分充分占据磁珠表面未与TGEV‑N蛋白结合的羧基基团，有效抑制了磁珠表面非特异性吸附的发生，进一步提高了检测灵敏度。本发明为猪传染性胃肠炎病毒的快速检测和防控以及疫苗效果的评价提供了新方法。
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公开(公告)号：CN110904270A
公开(公告)日：2020-03-24
申请号：CN201911179585.7
申请日：2019-11-27
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明属于病毒检测领域，特别是指猪δ冠状病毒、猪流行性腹泻病毒和猪萨佩罗病毒的多重RT-PCR检测方法及应用。设计合成PEDV M基因、PDCoV N基因和PSV 2C基因的保守序列的3对特异性引物，然后对RT-PCR反应条件进行优化，建立了能同时检测猪δ冠状病毒、猪流行性腹泻病毒和猪萨佩罗病毒的多重RT-PCR诊断方法，并对所建立的方法进行特异性、敏感性和重复性分析；结果表明，本申请方法具有很好的特异性和较高的灵敏性，PDCoV的最低检测限量是1.40×102copies/µL、PEDV的最低检测量是1.53×102copies/µL和PSV的最低检测量是1.57×103copies/µL。
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公开(公告)号：CN119661660A
公开(公告)日：2025-03-21
申请号：CN202411837362.6
申请日：2024-12-13
Applicant: 河南农业大学
IPC: C07K14/165 , C12N15/50 , G01N33/569 , G01N33/68 , G01N33/543 , G01N33/58
Abstract: 本发明公开了一种快速检测猪流行性腹泻病毒IgA抗体的间接ELISA试剂盒及其应用，属于免疫学技术领域。本发明提供了一种重组PEDV‑RBD蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。本发明基于重组PEDV‑RBD蛋白构建了一种检测猪流行性腹泻病毒IgA抗体的间接ELISA试剂盒，能够准确捕获猪母乳或血清中的PEDV IgA抗体实现检测，具有高灵敏度和强特异性的优势，为猪流行性腹泻的防控提供了技术手段。
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公开(公告)号：CN119592517A
公开(公告)日：2025-03-11
申请号：CN202411393143.3
申请日：2024-10-08
Applicant: 河南农业大学
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , C07K14/165 , G01N33/569 , G01N33/577 , A61K39/215 , A61P31/14 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种抗猪δ冠状病毒S2亚基的单克隆抗体及其杂交瘤细胞株和应用，属于生物检测技术领域。所述杂交瘤细胞株已保存于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：C2024223。该杂交瘤细胞株能够稳定分泌抗猪δ冠状病毒S2亚基的单克隆抗体，该抗体重链为IgG2a型，轻链为Kappa型，其抗原表位为52‑NSRC‑55，该表位在PDCoV毒株中高度保守。该抗体能够特异性识别PDCoV，与其他常见的猪肠道病毒没有交叉反应，可应用于实验室以及临床检测。本发明为研究PDCoV与宿主细胞的融合过程和开发PDCoV诊断试剂提供了研究工具和材料。
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