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公开(公告)号：CN106148453B
公开(公告)日：2019-05-17
申请号：CN201610554590.1
申请日：2016-07-14
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种利用地黄毛状根生产毛蕊花糖苷的方法，属于生物培养技术领域。该方法包括以下步骤：即将地黄毛状根置于含水杨酸的培养液中诱导培养，即可。方法原理为：经水杨酸处理的地黄毛状根能够在短时间(12～24h)内提高毛蕊花糖苷生物合成关键酶基因的表达，如苯丙氨酸解氨酶(PAL)、4‑香豆酰‑辅酶A连接酶(4CL)、肉桂酸羟化酶(C4H)、香豆酸羟化酶(C3H)、铜胺氧化酶(CuAO)和酪氨酸脱羧酶(TyDC)，从而完成毛蕊花糖苷的积累，并进一步提高其产量，该方法操作简便、培养周期短，便于进行产业化、规模化和标准化实施，对推进毛蕊花糖苷大规模生产具有重要意义。
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公开(公告)号：CN114214332A
公开(公告)日：2022-03-22
申请号：CN202111657700.4
申请日：2021-12-31
Applicant: 河南农业大学
IPC: C12N15/29
Abstract: 本发明提供一种天目地黄花青素相关基因RcMYB1及其应用，首次从天目地黄花冠中克隆得到一条正调控花青素的MYB转录因子RcMYB1的cDNA序列，推测获得了其编码的氨基酸序列，其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示；其氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。在地黄中异源表达RgMYB1可明显地提高地黄叶、块根和花中的花青素含量，从而确定其参与正调控植物花青素合成的功能。
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公开(公告)号：CN103468739A
公开(公告)日：2013-12-25
申请号：CN201310448326.6
申请日：2013-09-27
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明属于植物生物技术领域，特别涉及一种农杆菌介导的怀地黄遗传转化方法。以怀地黄无菌苗初展开叶片去叶脉后剪成的叶盘作为根癌农杆菌感染的受体，经农杆菌侵染、共培养、抗性愈伤诱导、抗性芽分化、抗性芽生根，最终获得地黄的转基因植株。本发明方法简单，培养周期短，转化效率高，成功实现了怀地黄的遗传转化，为外源基因在怀地黄中稳定表达奠定了基础，对地黄的遗传改良和分子生物学研究有十分重要的意义。
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公开(公告)号：CN114214332B
公开(公告)日：2023-06-30
申请号：CN202111657700.4
申请日：2021-12-31
Applicant: 河南农业大学
IPC: C12N15/29
Abstract: 本发明提供一种天目地黄花青素相关基因RcMYB1及其应用，首次从天目地黄花冠中克隆得到一条正调控花青素的MYB转录因子RcMYB1的cDNA序列，推测获得了其编码的氨基酸序列，其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示；其氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。在地黄中异源表达RgMYB1可明显地提高地黄叶、块根和花中的花青素含量，从而确定其参与正调控植物花青素合成的功能。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN112210618A
公开(公告)日：2021-01-12
申请号：CN202011127365.2
申请日：2020-10-20
Applicant: 河南农业大学 , 焦作市玖道种苗繁育有限公司
IPC: C12Q1/6895 , C12N15/11 , C12N15/29
Abstract: 本发明公开了适用于天目地黄的qRT‑PCR内参基因及其应用。本发明基于天目地黄花的5个不同发育时期和叶转录组数据中筛选出6个表达量相对稳定的候选内参基因，并利用qRT‑PCR技术，通过GeNorm、NormFinder和Bestkeeper 3种不同算法对候选参考基因的稳定性进行分析。结果表明，针对天目地黄花和叶组织的最佳内参基因数目为两个，为RcTIP41和Rc18S；其中，RcTIP41基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，Rc18S基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明确定了天目地黄花和叶qRT‑PCR的最适内参基因，并提供了内参基因的特异性引物，为天目地黄中相关基因表达的精确定量分析提供了重要参考。
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公开(公告)号：CN113355337A
公开(公告)日：2021-09-07
申请号：CN202110397674.X
申请日：2021-04-14
Applicant: 河南农业大学 , 焦作市玖道种苗繁育有限公司
Abstract: 本发明涉及一种创制地黄杂合突变体的方法和应用，属于分子生物学技术领域，本发明所述的CRISPR/Cas9系统靶向地黄RgPDS1基因，RgPDS1基因的编码区核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，靶位点序列如SEQ ID NO.2所示，本发明根据靶序列合成一对互补的上下游引物；引物退火形成双链后通过酶切连接法插入CRISPR/Cas9植物表达载体pKSE401，进一步筛选出构建成功的重组质粒；将重组质粒转化根癌农杆菌，采用叶盘法遗传转化技术侵染地黄外植体并获得杂合突变体植株。首次实现了利用CRISPR/Cas9基因编辑体系在地黄中创制杂合突变体，为加速地黄分子育种进程，品种改良及种质资源的创新提供新的研究手段，还有利于进一步研究一些关键调控基因的功能。
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公开(公告)号：CN106148453A
公开(公告)日：2016-11-23
申请号：CN201610554590.1
申请日：2016-07-14
Applicant: 河南农业大学
CPC classification number: C12P19/44
Abstract: 本发明公开了一种利用地黄毛状根生产毛蕊花糖苷的方法，属于生物培养技术领域。该方法包括以下步骤：即将地黄毛状根置于含水杨酸的培养液中诱导培养，即可。方法原理为：经水杨酸处理的地黄毛状根能够在短时间(12～24h)内提高毛蕊花糖苷生物合成关键酶基因的表达，如苯丙氨酸解氨酶(PAL)、4‑香豆酰‑辅酶A连接酶(4CL)、肉桂酸羟化酶(C4H)、香豆酸羟化酶(C3H)、铜胺氧化酶(CuAO)和酪氨酸脱羧酶(TyDC)，从而完成毛蕊花糖苷的积累，并进一步提高其产量，该方法操作简便、培养周期短，便于进行产业化、规模化和标准化实施，对推进毛蕊花糖苷大规模生产具有重要意义。
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公开(公告)号：CN113355337B
公开(公告)日：2023-06-20
申请号：CN202110397674.X
申请日：2021-04-14
Applicant: 河南农业大学 , 焦作市玖道种苗繁育有限公司
Abstract: 本发明涉及一种创制地黄杂合突变体的方法和应用，属于分子生物学技术领域，本发明所述的CRISPR/Cas9系统靶向地黄RgPDS1基因，RgPDS1基因的编码区核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，靶位点序列如SEQ ID NO.2所示，本发明根据靶序列合成一对互补的上下游引物；引物退火形成双链后通过酶切连接法插入CRISPR/Cas9植物表达载体pKSE401，进一步筛选出构建成功的重组质粒；将重组质粒转化根癌农杆菌，采用叶盘法遗传转化技术侵染地黄外植体并获得杂合突变体植株。首次实现了利用CRISPR/Cas9基因编辑体系在地黄中创制杂合突变体，为加速地黄分子育种进程，品种改良及种质资源的创新提供新的研究手段，还有利于进一步研究一些关键调控基因的功能。
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公开(公告)号：CN113099996A
公开(公告)日：2021-07-13
申请号：CN202110428503.9
申请日：2021-04-21
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明提供的一种消减地黄连作障碍的方法和应用，属于农业种植技术领域。本发明提供的消减地黄连作障碍的方法，包括如下步骤：将畜禽粪便进行厌氧发酵，得到沼液；将沼液灌溉农田；将灌溉后的农田用薄膜覆盖并培育；揭开薄膜，进行晾晒；晾晒后，向农田中施入微生物菌剂；采用常规方法种植地黄。本发明提供的消减地黄连作障碍的方法可显著提高地黄的成活率、地黄上部和下部的生物量以及产量，可有效消减地黄连作障碍问题。
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