一种鸡小肠类器官的培养基及培养方法

    公开(公告)号:CN118360237A

    公开(公告)日:2024-07-19

    申请号:CN202410411251.2

    申请日:2024-04-07

    IPC分类号: C12N5/071

    摘要: 本发明公开了一种鸡小肠类器官的培养基及培养方法,涉及类器官培养技术领域,该培养基主要包括:L‑WNR条件培养基、基础培养基、Wnt通路激活剂R‑Spondin‑1、BMP受体抑制剂Noggin、ROCK抑制剂Y‑27632、p38MAPK抑制剂SB 202190、TGF‑β受体I型(TGF‑βRI)激酶抑制剂LY2157299、Laduviglusib(具有口服活性的GSK‑3α/β抑制剂和Wnt/β‑catenin信号通路激活剂)和Notch信号激活剂Jagged‑1,以及其他特异性添加因子,该方法采用多种抗生素对小肠组织进行清洗,使用EDTA进行消化和涡旋振荡仪来分离小肠中的绒毛和隐窝,获得大量干净且密度高的肠隐窝细胞,大大提高了鸡小肠类器官样本的培养成功率,并减少污染。结合类器官的传代、冻存技术可以在有限时间内获得充足的类器官开展科学研究。

    用于诊断绵羊类绵羊艾美耳球虫感染的粪便标志物、诊断产品及方法

    公开(公告)号:CN118112227A

    公开(公告)日:2024-05-31

    申请号:CN202410241683.3

    申请日:2024-03-04

    摘要: 本发明属于生物检测与诊断技术领域,涉及绵羊类绵羊艾美耳球虫感染,特别是指用于诊断绵羊类绵羊艾美耳球虫感染的粪便标志物、诊断产品及方法。所述粪便标志物选自Metabolic pathways代谢通路,包括2'‑脱氧胞苷和/或N‑(4‑氨基丁基)‑乙酰胺。可用于指示绵羊类绵羊艾美耳球虫感染。本发明创新性的选取粪便样本进行非侵入性生物标志物的临床检测,具有高度特异性和敏感性,并且可用于提供关于绵羊等小反刍动物肠道健康的信息。本发明对绵羊类绵羊艾美耳球虫感染诊断敏感性高,能够检测出球虫感染的绵羊,可以有效避免严重发病时对机体产生不可逆损伤,失去治疗价值的情况。

    基于Lectin基因对部分隐孢子虫种类的分子鉴定方法

    公开(公告)号:CN107881221B

    公开(公告)日:2021-03-02

    申请号:CN201711487999.7

    申请日:2017-12-29

    IPC分类号: C12Q1/6848 C12Q1/6893

    摘要: 本发明公开了一种基于Lectin基因对部分隐孢子虫种类的分子鉴定方法,具体步骤如下:(1)基于SSU rRNA基因对待测样品进行巢式PCR扩增,测序比对,确定待测样品是否为隐孢子虫阳性,以及属于哪一种隐孢子虫种;(2)若待测样品属于C.parvum、C.hominis、C.cuniculus、horse genotype或驴源C.hominis中的一种,则基于Lectin基因对同种隐孢子虫不同分离株的待测样品进行巢式PCR扩增,测序比对,通过待测样品的Lectin基因位点上的连续的CAA三联密码子的个数确定待测样品是否为同种隐孢子虫不同分离株。本发明经序列比对及进化树结果表明,Lectin基因作隐孢子虫鉴定工具用于SSU rRNA序列相近隐孢子虫种的鉴定有更好的区分度,可望为隐孢子虫的分子流行病学、群体遗传分析增添新的分子工具。

    基于FTA卡从粪便中提取隐孢子虫卵囊DNA的方法

    公开(公告)号:CN105907751A

    公开(公告)日:2016-08-31

    申请号:CN201610509281.2

    申请日:2016-06-27

    IPC分类号: C12N15/10

    CPC分类号: C12N15/1006 C12Q2523/308

    摘要: 本发明属于分子生物学领域,涉及一种基于FTA卡提取DNA的方法,具体涉及一种基于FTA卡从粪便中提取隐孢子虫卵囊DNA的方法。提取步骤如下:收集经隐孢子虫卵囊感染成功后的犊牛粪便,获得隐孢子虫卵囊,定量污染粪便;将奶牛粪便涂抹于FTA卡上,常温晾干FTA卡,打孔获得FTA圆片;将获得的FTA圆片分别放入离心管内,去污并清洗,加入FTA卡清洗液,室温孵育后加入1×TE溶液,室温孵育,将清洗后的FTA圆片完全干燥,完成粪便中隐孢子虫卵囊DNA的提取。本发明只需携带FTA卡到养殖场采集粪便样本,经FTA洗脱液和其他有机溶液清洗后,可将FTA卡片用作DNA模板进行PCR扩增,成本低廉,方便快捷。

    采用LAMP技术检测牛无浆体方法

    公开(公告)号:CN104152550A

    公开(公告)日:2014-11-19

    申请号:CN201410332786.7

    申请日:2014-07-14

    IPC分类号: C12Q1/68

    摘要: 采用LAMP技术检测牛无浆体方法,该检测方法包括LAMP引物设计、LAMP反应体系建立以及采用LAMP检测方法,所述的LAMP检测方法是采用特异性检测、敏感性检测和荧光可视化检测,所述的LAMP引物设计利用PrimerExplorerV4软件针对牛无浆体16SrRNA基因的6个位点设计4条LAMP引物,引物包括两条外引物F3和B3、两条内引物FIP和BIP,其中:F3:GGGCATGTAGGTGGTTTGG;B3:GCGTGGACTACCAGGGTAT;FIP:TCTCCCGGACTCCAGTCTGGTAAAGGTGAAATGCCAGGGC;BIP:ATTAGGAGGAACACCAGTGGCGCACGCTTTCGCACCTCAG。该法以牛无浆体16SrRNA为靶基因位点,具有快速、灵敏、高效、低成本等特点,为牛无浆体病的病原检测提供新的技术方法。

    一种诊断绵羊类绵羊艾美耳球虫感染血液生物标志物及其应用

    公开(公告)号:CN118130660A

    公开(公告)日:2024-06-04

    申请号:CN202410282311.5

    申请日:2024-03-13

    摘要: 本发明属于生物检测与诊断技术领域,具体涉及一种诊断绵羊类绵羊艾美耳球虫感染血液生物标志物及其应用。为开发一种用于绵羊类绵羊艾美耳球虫感染早期诊断和治疗的新标志物,本发明基于代谢组学方法筛选得到一种可以区分类球虫感染绵羊与健康绵羊的血液差异代谢物2‑氨基‑3‑甲基‑3H‑咪唑并喹啉,该差异代谢物可用于指示绵羊类绵羊艾美耳球虫的感染,尤其是早期感染,且该差异代谢物对于区分球虫感染绵羊和健康绵羊具有高度特异性和敏感性。因此,本发明通过临床检测血液样本中的这些差异代谢物,即可实现对绵羊类绵羊艾美耳球虫感染的诊断、早期干预和及时治疗,对于促进绵羊产业的健康发展具有重要意义。