公开(公告)号：CN106119355A

公开(公告)日：2016-11-16

申请号：CN201610492725.6

申请日：2016-06-27

Applicant: 河南农业大学

Inventor： 王荣军 ,  张振杰 ,  张龙现 ,  张素梅 ,  王海燕 ,  菅复春 ,  宁长申 ,  胡苏辉

IPC: C12Q1/68 ,  C12N15/10

CPC classification number: Y02A50/451 ,  C12Q1/6893 ,  C12N15/1003 ,  C12Q1/686 ,  C12Q2565/625 ,  C12Q2527/125

Abstract: 本发明属于生物技术领域，涉及一种基于FTA卡检测粪便中隐孢子虫卵囊的方法。步骤如下：纯化收集隐孢子虫卵囊，计数稀释后，定量污染粪便后涂抹于FTA卡上备用；将阳性粪便样品涂抹于FTA卡上备用；用FTA卡收集新鲜粪便备用；在FTA卡上打孔，并洗脱FTA圆片；以清洗好的FTA卡片为DNA模板，以根据隐孢子虫18SrRNA设计的引物进行PCR扩增，然后进行琼脂糖凝胶电泳检测。本发明代替了传统商业化粪便DNA提取试剂盒提取DNA时繁琐的步骤和高昂的价格，具有成本低廉，方便快捷的优点。

公开(公告)号：CN105907751A

公开(公告)日：2016-08-31

申请号：CN201610509281.2

申请日：2016-06-27

Applicant: 河南农业大学

Inventor： 王荣军 ,  张振杰 ,  张龙现 ,  张素梅 ,  王海燕 ,  菅复春 ,  宁长申 ,  胡苏辉

IPC: C12N15/10

CPC classification number: C12N15/1006 ,  C12Q2523/308

Abstract: 本发明属于分子生物学领域，涉及一种基于FTA卡提取DNA的方法，具体涉及一种基于FTA卡从粪便中提取隐孢子虫卵囊DNA的方法。提取步骤如下：收集经隐孢子虫卵囊感染成功后的犊牛粪便，获得隐孢子虫卵囊，定量污染粪便；将奶牛粪便涂抹于FTA卡上，常温晾干FTA卡，打孔获得FTA圆片；将获得的FTA圆片分别放入离心管内，去污并清洗，加入FTA卡清洗液，室温孵育后加入1×TE溶液，室温孵育，将清洗后的FTA圆片完全干燥，完成粪便中隐孢子虫卵囊DNA的提取。本发明只需携带FTA卡到养殖场采集粪便样本，经FTA洗脱液和其他有机溶液清洗后，可将FTA卡片用作DNA模板进行PCR扩增，成本低廉，方便快捷。