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公开(公告)号：CN111057715A
公开(公告)日：2020-04-24
申请号：CN201911233116.9
申请日：2019-12-05
申请人： 河南牧业经济学院
摘要： 本发明属于反向遗传学技术领域，具体涉及一种基于双启动子拯救猪塞尼卡病毒的反向遗传操作系统及其建立方法。本发明分别通过构建SVA通用型反向载体和SVA全基因组重组反向载体，然后基于T7 RNA聚合酶和RNA聚合酶II双转录系统，利用无缝克隆和重叠PCR技术，并在病毒序列两端引入HamRz 和HDVRz序列，建立的高效精确的通用型SVA反向遗传操作系统。该操作系统能够高效精确的实现猪塞尼卡病毒的拯救，获得的重组毒株均未发生突变，遗传稳定性好。
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公开(公告)号：CN117512218A
公开(公告)日：2024-02-06
申请号：CN202311646612.3
申请日：2023-12-04
申请人： 河南牧业经济学院
IPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
摘要： 本发明提供了一种PRV快速可视化检测的crRNA引物、LAMP引物及应用，属于分子生物检测技术领域。本发明通过提供一种猪伪狂犬病毒crRNA检测引物以及一种猪伪狂犬病毒检测引物组，为猪伪狂犬病毒防控提供了有效途径。本发明采用LAMP反应将PRV结构基因信号放大，利用crRNA和Cas12a组装的复合物识别LAMP反应产物中的特征序列，对两端带有荧光基团和淬灭集团的单链DNA荧光报告探针进行切割，释放荧光基团从而产生荧光信号。经过优化后，可在不到1个小时的较短时间内完成对PRV的快速、高灵敏度、高特异性、可视化的检测。
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公开(公告)号：CN112143713A
公开(公告)日：2020-12-29
申请号：CN202011061204.8
申请日：2020-09-30
申请人： 河南牧业经济学院
IPC分类号： C12N7/01 , C12N15/861 , C12R1/93
摘要： 本发明公开了表达猪δ冠状病毒S1基因的重组腺病毒及其制备方法，所述重组腺病毒包含猪δ冠状病毒S1基因，所述重组腺病毒感染AD293细胞后能够稳定表达猪δ冠状病毒S1蛋白，制备步骤为：获取猪δ冠状病毒的总RNA；反转录S1基因并进行鉴定；获取S1基因的cDNA模板；设计引物，扩增S1基因并纯化回收；构建pDC315/S1重组质粒；扩增S14获得的pDC315/S1重组质粒；将S15获得的pDC315/S1重组质粒进行病毒包装，获得含有pDC315/S1重组质粒的重组腺病毒，包装成功了重组腺病毒，该重组腺病毒感染AD293细胞后能够大量准确的表达S1蛋白，为疫苗的制备奠定基础。
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公开(公告)号：CN112111465A
公开(公告)日：2020-12-22
申请号：CN202011000501.1
申请日：2020-09-22
申请人： 河南牧业经济学院
IPC分类号： C12N7/01 , C12N15/861 , A61K39/215 , A61P31/14 , C12R1/93
摘要： 本发明公开了一种稳定表达猪德尔塔冠状病毒的重组腺病毒、构建方法和应用，所述重组腺病毒包含猪Delta冠状病毒N基因，并且能够稳定表达猪Delta冠状病毒N蛋白，其构建方法包括以下步骤：(1)猪Delta冠状病毒N基因的扩增；(2)双酶切N基因与pDC315；(3)N基因与pDC315连接；(4)转化感受态细胞；(5)pDC315/N重组质粒的提取；(6)AD293细胞的培养；(7)重组腺病毒的包装。本发明重组腺病毒具有较高滴度，表达蛋白量大，同时是真核表达，免疫原性好，且腺病毒具有较好的激活免疫系统的功能，具有制作诊断试剂和疫苗的广阔应用前景。
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公开(公告)号：CN117512219A
公开(公告)日：2024-02-06
申请号：CN202311646614.2
申请日：2023-12-04
申请人： 河南牧业经济学院
IPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
摘要： 本发明提供了一种PEDV可视化检测的crRNA引物、LAMP引物及应用，属于分子生物检测技术领域。本发明通过提供一种猪流行性腹泻病毒crRNA检测引物以及一种猪流行性腹泻病毒检测引物组，为猪流行性腹泻病毒防控提供了有效途径。本发明利用具备高灵敏性的LAMP反应放大PEDV结构基因M基因，结合CRISPR/Cas12a系统中crRNA的高特异性，有效保证病毒特征序列核酸检测的高准确性。本发明提供的猪流行性腹泻病毒检测方法能够实现可视化检测，并且具有高灵敏度、高特异性的优点。
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公开(公告)号：CN115363051B
公开(公告)日：2023-06-09
申请号：CN202211035256.7
申请日：2022-08-26
申请人： 河南牧业经济学院
摘要： 本申请公开了一种黑曲霉在蜱虫防控中的应用，旨在解决蜱虫的化学防控存在药物残留及易产生抗药性的技术问题。本发明研究表明，黑曲霉对长角血蜱幼虫有致死作用；以黑曲霉对蜱虫进行生物防控，效果好，易实施，将其制成含有黑曲霉孢子的蜱虫防控生物制剂，防效持久、无药物残留，不存在环境污染，操作简便、防治成本低，易于推广实施。
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公开(公告)号：CN109055588A
公开(公告)日：2018-12-21
申请号：CN201811124461.4
申请日：2018-09-26
申请人： 河南牧业经济学院
CPC分类号： C12Q1/689 , C12Q1/686 , C12Q2565/125
摘要： 本发明公开了一对检测伯杰氏菌属的特异性引物、试剂盒及PCR检测方法，该引物包括上游引物Bergeyella‑F：5’‑TTGAAAGCTCCGGCGGATAG‑3’和下游引物Bergeyella‑R：5’‑ACCCTCACGAGAGTAGGTTT‑3’。本发明从GenBank数据库中下载链球菌、猪丹毒杆菌、多杀性巴氏杆菌、沙门氏菌、副猪嗜血杆菌、传染性胸膜肺炎放线杆菌、嗜麦芽窄食单胞菌、猪伯杰氏菌、动物溃疡伯杰氏菌16S rRNA基因序列，通过MEGA 5.05软件进行序列比对，寻找伯杰氏菌16S rRNA特异性序列，然后利用Primer‑BLAST设计仅能扩增伯杰氏菌一对特异性引物，建立一种伯杰氏菌属PCR快速检测方法，能够鉴定伯杰氏菌。本发明的方法具有快速、简便、灵敏度高、特异性强的优点。
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公开(公告)号：CN113111289A
公开(公告)日：2021-07-13
申请号：CN202110412713.9
申请日：2021-04-16
申请人： 河南牧业经济学院
IPC分类号： G06F16/958 , G06F21/34 , G06Q10/02 , G06Q50/10 , H04L29/12
摘要： 本申请实施例公开了一种用于兽医站的宠物信息管理方法、装置、设备及存储介质，属于宠物服务技术领域，该方法包括:确定主人用户，进行宠物信息和主人信息录入；生成唯一标识，将宠物信息和主人信息进行存储管理；进行宠物服务选择；确定宠物服务提供的服务信息，发送服务列表清单到后台终端进行存储管理；宠物信息包括宠物年龄、宠物体表颜色、宠物肢体特征、宠物叫声特征、宠物唯一标识；主人信息包括主人姓名、主人电话号码、与宠物唯一标识对应的主人唯一标识；基于服务列表清单判断当前用户选择的宠物服务类别，并进行存储管理,本申请即能够帮助兽医站做到更好的维护客户关系，又能够方便宠物主人快捷方便的进行宠物服务预约。
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公开(公告)号：CN115363051A
公开(公告)日：2022-11-22
申请号：CN202211035256.7
申请日：2022-08-26
申请人： 河南牧业经济学院
摘要： 本申请公开了一种黑曲霉在蜱虫防控中的应用，旨在解决蜱虫的化学防控存在药物残留及易产生抗药性的技术问题。本发明研究表明，黑曲霉对长角血蜱幼虫有致死作用；以黑曲霉对蜱虫进行生物防控，效果好，易实施，将其制成含有黑曲霉孢子的蜱虫防控生物制剂，防效持久、无药物残留，不存在环境污染，操作简便、防治成本低，易于推广实施。
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公开(公告)号：CN111057715B
公开(公告)日：2021-10-01
申请号：CN201911233116.9
申请日：2019-12-05
申请人： 河南牧业经济学院
摘要： 本发明属于反向遗传学技术领域，具体涉及一种基于双启动子拯救猪塞尼卡病毒的反向遗传操作系统及其建立方法。本发明分别通过构建SVA通用型反向载体和SVA全基因组重组反向载体，然后基于T7 RNA聚合酶和RNA聚合酶II双转录系统，利用无缝克隆和重叠PCR技术，并在病毒序列两端引入HamRz和HDVRz序列，建立的高效精确的通用型SVA反向遗传操作系统。该操作系统能够高效精确的实现猪塞尼卡病毒的拯救，获得的重组毒株均未发生突变，遗传稳定性好。
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