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公开(公告)号：CN107299105B
公开(公告)日：2020-09-25
申请号：CN201710687638.0
申请日：2017-08-11
申请人： 河南省农业科学院园艺研究所 , 河南省驻马店农业学校
摘要： 本发明公开了一种西瓜枯萎病菌致病性基因FonAGL3、其缺失DNA片段、缺失突变体及其应用。旨在解决西瓜枯萎病生物防治的技术问题。本发明根据西瓜枯萎病菌T‑DNA插入突变体库分析和筛选发现的一种源于西瓜尖孢镰刀菌的致病性基因FonAGL3，采用基因同源置换原理，用抗性基因潮霉素B（HPH）基因DNA片段替换目的基因FonAGL3的DNA片段，通过构建该基因缺失载体及野生型菌株FON‑11‑06遗传转化获得FonAGL3基因缺失突变体，该FonAGL3突变体菌剂具有良好枯萎病防治效果，且环境友好，防治成本低廉。
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公开(公告)号：CN107299105A
公开(公告)日：2017-10-27
申请号：CN201710687638.0
申请日：2017-08-11
申请人： 河南省农业科学院园艺研究所 , 河南省驻马店农业学校
摘要： 本发明公开了一种西瓜枯萎病菌致病性基因FonAGL3、其缺失DNA片段、缺失突变体及其应用。旨在解决西瓜枯萎病生物防治的技术问题。本发明根据西瓜枯萎病菌T-DNA插入突变体库分析和筛选发现的一种源于西瓜尖孢镰刀菌的致病性基因FonAGL3，采用基因同源置换原理，用抗性基因潮霉素B（ HPH）基因DNA片段替换目的基因FonAGL3的DNA片段，通过构建该基因缺失载体及野生型菌株FON-11-06遗传转化获得FonAGL3基因缺失突变体，该FonAGL3突变体菌剂具有良好枯萎病防治效果，且环境友好，防治成本低廉。
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公开(公告)号：CN104152442B
公开(公告)日：2017-04-05
申请号：CN201410336970.9
申请日：2014-07-16
申请人： 河南省农业科学院园艺研究所
摘要： 本发明涉及一种T‑DNA及其真菌插入位点右臂侧翼基因组序列的扩增引物和鉴定方法。本发明T‑DNA包括左臂、右臂DNA，以及二者之间的多克隆位点和eGFP基因，且该T‑DNA具有SEQ ID NO.9所示的核苷酸序列，本发明公开了其载体及构建方法；该T‑DNA的真菌插入位点右臂侧翼基因组序列的巢式PCR扩增的上游引物对应于eGFP基因的左端序列，下游引物对应于右臂的左端序列；该右臂侧翼基因组序列的鉴定方法包括基因组DNA提取、酶切处理、纯化处理、连接反应、巢式PCR扩增及其产物鉴定、克隆和测序等步骤。本发明引物特异性强，能够快速、准确、高效、稳定、普适性地扩增出T‑DNA的右臂侧翼基因组DNA序列，大大提高鉴定效率。
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公开(公告)号：CN105255715A
公开(公告)日：2016-01-20
申请号：CN201510790922.1
申请日：2015-11-17
申请人： 河南省农业科学院园艺研究所
摘要： 本发明涉及一种高通量、多用途、可调控微生物接种装置及批量接种菌株的方法。本发明旨在解决现有技术中筛选菌株工作量大、污染大、浪费试剂且可视性对比效果差的问题。本发明包括接种器、样品管架及置于该样品管架中的离心管或试管；接种器包括底板及垂直安装于该底板上的接种针阵列，其由以一定方式排列布置的接种针构成，离心管或试管的数量和排列方式与接种针阵列相对应，以使接种针在接种器与样品管架相对接时能没入对应的离心管或试管中。本发明的有益效果在于：单次成批量的培养菌株、结构简单便于实施、节省试剂，能够在培育环境一致的条件状态下进行对比，使试验结果更准确、可靠。
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公开(公告)号：CN104152442A
公开(公告)日：2014-11-19
申请号：CN201410336970.9
申请日：2014-07-16
申请人： 河南省农业科学院园艺研究所
摘要： 本发明涉及一种T-DNA及其真菌插入位点右臂侧翼基因组序列的扩增引物和鉴定方法。本发明T-DNA包括左臂、右臂DNA，以及二者之间的多克隆位点和eGFP基因，且该T-DNA具有SEQIDNO.9所示的核苷酸序列，本发明公开了其载体及构建方法；该T-DNA的真菌插入位点右臂侧翼基因组序列的巢式PCR扩增的上游引物对应于eGFP基因的左端序列，下游引物对应于右臂的左端序列；该右臂侧翼基因组序列的鉴定方法包括基因组DNA提取、酶切处理、纯化处理、连接反应、巢式PCR扩增及其产物鉴定、克隆和测序等步骤。本发明引物特异性强，能够快速、准确、高效、稳定、普适性地扩增出T-DNA的右臂侧翼基因组DNA序列，大大提高鉴定效率。
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公开(公告)号：CN104774905A
公开(公告)日：2015-07-15
申请号：CN201510196186.7
申请日：2015-04-23
申请人： 河南省农业科学院园艺研究所
摘要： 本发明具体涉及一种用于镰刀菌产孢结构的显微分析方法，包括以下步骤：分生孢子获得、分生孢子悬浮液的制备、制备SNA观察平板、接种培养、制备观察玻片、显微观察等。本发明显微观察方法可以直接观察到产孢细胞形态典型特征及其分生孢子的产生方式，可以根据需要，设定不同时间分析点，随时切取培养菌块，直接进行显微观察分析，一次接种，多次观察，可拍摄高质量的产孢细胞及其分生孢子产生方式图片。
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公开(公告)号：CN107365714A
公开(公告)日：2017-11-21
申请号：CN201710687640.8
申请日：2017-08-11
申请人： 河南省农业科学院园艺研究所 , 中国农业科学院郑州果树研究所
摘要： 本发明公开了一种系统创制不同致病力西瓜枯萎病菌菌株及西瓜抗枯萎病的精准鉴定方法。通过对西瓜枯萎病菌有4个生理小种建立枯萎病菌突变体库、获取枯萎病菌遗传转化突变体、鉴定菌株致病力强弱、筛选不同致病力的突变体菌株等技术手段，分别创制出不同致病力的菌株；抗枯萎病的精准鉴定方法是利用上述所得同一生理小种不同致病力的菌株进行同一材料或品种进行定性抗病测定，又可以对同一材料对某一种生理小种抗性强弱定量抗病测定。运用该本发明方法进行西瓜材料或品种抗枯萎病鉴定，步骤简单、结果直观、一致性和重复性强；本发明方法也可用于其它引起维管束病害的病原菌，加速不同枯萎病性寄主材料和品种抗性鉴定及抗病育种进程。
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公开(公告)号：CN104774905B
公开(公告)日：2017-05-24
申请号：CN201510196186.7
申请日：2015-04-23
申请人： 河南省农业科学院园艺研究所
摘要： 本发明具体涉及一种用于镰刀菌产孢结构的显微分析方法，包括以下步骤：分生孢子获得、分生孢子悬浮液的制备、制备SNA观察平板、接种培养、制备观察玻片、显微观察等。本发明显微观察方法可以直接观察到产孢细胞形态典型特征及其分生孢子的产生方式，可以根据需要，设定不同时间分析点，随时切取培养菌块，直接进行显微观察分析，一次接种，多次观察，可拍摄高质量的产孢细胞及其分生孢子产生方式图片。
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公开(公告)号：CN205396879U
公开(公告)日：2016-07-27
申请号：CN201620196896.X
申请日：2016-03-15
申请人： 河南省农业科学院园艺研究所
摘要： 本实用新型公开了一种空间集约型离心管收纳盒，旨在解决现有的离心管存放盒存在的布局不合理、构造复杂、使用不方便、造价成本高的技术问题。其包括管架板和盒盖板，在管架板上设置有用于放置离心管的管孔；在管架板和盒盖板的边缘对应位置处设有相互配合的锁扣。本实用新型的各组成部分是一个有机的整体，可设置于一张长方形透明塑料板上，通过对孔径、排列方式、间距、折盖和上锁方式的优化，实现了科学布局、空间集约、经济适用、简单高效。
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公开(公告)号：CN204211750U
公开(公告)日：2015-03-18
申请号：CN201420517133.1
申请日：2014-09-10
申请人： 河南省农业科学院园艺研究所
摘要： 本实用新型涉及一种用于丝状真菌遗传转化的剪膜器，尤其应用于农杆菌介导的丝状真菌遗传转化。所述剪膜器包括手持部和刀头，所述刀头包括一个由前边、后边和刀刃组成的三角形，且前边与刀刃的夹角为40～50°，后边与刀刃的夹角为25～35°；所述手持部与所述刀头的后边连接，并与所述刀头的前边平行设置。本实用新型剪膜器可一人操作、剪切均匀、应用广泛，劳动强度大大降低，转化效率得到大大提高。
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