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公开(公告)号：CN113462669B
公开(公告)日：2024-03-29
申请号：CN202110839665.1
申请日：2021-07-23
申请人： 浙江工业大学
摘要： 发明涉及基因工程领域，具体涉及谷氨酸棒状杆菌来源的酮泛解酸羟甲基转移酶突变体及其编码基因及其在制备酮泛解酸和D‑泛酸中的应用。本发明通过借助计算机模拟技术，对底物通道及活性口袋周围关键氨基酸位点进行预测和突变，得到了一系列突变体。所述对酮泛解酸羟甲基转移酶突变体是是将SEQ ID NO:1所示氨基酸序列第18位、第20位、第21位、第24位、第25位、第26位、第27位、第49位进行定点突变获得的。最终得到的酮泛解酸羟甲基转移酶突变体中有酶活显著改变的突变体，该突变体相比于野生型酶在催化α‑酮异戊酸产生酮泛解酸时催化活力和底物耐受性大大提高。
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公开(公告)号：CN113462630B
公开(公告)日：2023-05-05
申请号：CN202110839660.9
申请日：2021-07-23
申请人： 浙江工业大学
摘要： 本发明涉及基因工程领域，具体涉及一种高产泛酸基因工程菌及其构建方法，以及其在微生物发酵制备泛酸中的应用。本发明通过突变其基因组中panB基因的关键位点来加强panB基因的表达，有利于提高生物发酵法生产泛酸的效率。本发明得到了一系列对泛酸产率有明显改变的酮泛解酸羟甲基转移酶突变基因工程菌，所得酮泛解酸羟甲基转移酶突变基因工程菌用于发酵法生产D‑泛酸，相较原始基因工程菌株，本发明构建的酮泛解酸羟甲基转移酶突变基因工程菌通过发酵生产D‑泛酸的产率有所提高，具有工业化开发应用前景。
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公开(公告)号：CN113462669A
公开(公告)日：2021-10-01
申请号：CN202110839665.1
申请日：2021-07-23
申请人： 浙江工业大学
摘要： 发明涉及基因工程领域，具体涉及谷氨酸棒状杆菌来源的酮泛解酸羟甲基转移酶突变体及其编码基因及其在制备酮泛解酸和D‑泛酸中的应用。本发明通过借助计算机模拟技术，对底物通道及活性口袋周围关键氨基酸位点进行预测和突变，得到了一系列突变体。所述对酮泛解酸羟甲基转移酶突变体是是将SEQ ID NO:1所示氨基酸序列第18位、第20位、第21位、第24位、第25位、第26位、第27位、第49位进行定点突变获得的。最终得到的酮泛解酸羟甲基转移酶突变体中有酶活显著改变的突变体，该突变体相比于野生型酶在催化α‑酮异戊酸产生酮泛解酸时催化活力和底物耐受性大大提高。
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公开(公告)号：CN117802064A
公开(公告)日：2024-04-02
申请号：CN202410182407.4
申请日：2021-07-23
申请人： 浙江工业大学
摘要： 发明涉及基因工程领域，具体涉及谷氨酸棒状杆菌来源的酮泛解酸羟甲基转移酶突变体及其编码基因及其在制备酮泛解酸和D‑泛酸中的应用。本发明通过借助计算机模拟技术，对底物通道及活性口袋周围关键氨基酸位点进行预测和突变，得到了酶活大幅提高的突变体。所述对酮泛解酸羟甲基转移酶突变体是将SEQ ID NO:1所示氨基酸序列第24位谷氨酰胺突变为丙氨酸、且第27位丝氨酸突变为丙氨酸获得的。最终得到的酮泛解酸羟甲基转移酶突变体中有酶活显著改变的突变体，该突变体相比于野生型酶在催化α‑酮异戊酸产生酮泛解酸时催化活力和底物耐受性大大提高。
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公开(公告)号：CN113462630A
公开(公告)日：2021-10-01
申请号：CN202110839660.9
申请日：2021-07-23
申请人： 浙江工业大学
摘要： 本发明涉及基因工程领域，具体涉及一种高产泛酸基因工程菌及其构建方法，以及其在微生物发酵制备泛酸中的应用。本发明通过突变其基因组中panB基因的关键位点来加强panB基因的表达，有利于提高生物发酵法生产泛酸的效率。本发明得到了一系列对泛酸产率有明显改变的酮泛解酸羟甲基转移酶突变基因工程菌，所得酮泛解酸羟甲基转移酶突变基因工程菌用于发酵法生产D‑泛酸，相较原始基因工程菌株，本发明构建的酮泛解酸羟甲基转移酶突变基因工程菌通过发酵生产D‑泛酸的产率有所提高，具有工业化开发应用前景。
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