一种改性硅藻土固定化含有葡萄糖异构酶细胞的方法

    公开(公告)号:CN111440785A

    公开(公告)日:2020-07-24

    申请号:CN202010126502.4

    申请日:2020-02-28

    Abstract: 本发明涉及一种改性硅藻土固定化含有葡萄糖异构酶细胞的方法,所述方法是将含葡萄糖异构酶基因的基因工程菌经发酵培养获得的湿菌体经缓冲液悬浮,制成菌悬液;向菌悬液中添加改性硅藻土,搅拌混匀,加入聚乙烯亚胺,然后再加入戊二醛进行交联,15~35℃搅拌交联0.5~5h后抽滤,滤饼用蒸馏水洗涤后,粉碎成粒,得到含葡萄糖异构酶的固定化葡萄糖异构酶制剂;本发明所提供的固定化方法具有固定化材料成本低,操作简单,机械强度高,制备的固定化产葡萄糖异构酶重组大肠杆菌全细胞用于催化D-葡萄糖生产D-果糖,在60℃条件下,分批次反应重复使用40批次后,仍具有86%以上的残余酶活力;连续反应603h,时空产率为3.8kg/L/d,平均转化率大于42%,具有良好的工业化应用前景。

    一种葡萄糖异构酶、突变体及其编码基因与应用

    公开(公告)号:CN113151240B

    公开(公告)日:2022-11-04

    申请号:CN202110559008.1

    申请日:2021-05-21

    Abstract: 本发明涉及一种葡萄糖异构酶及其突变体,以及其编码基因,以及其在微生物催化D‑葡萄糖异构化制备高果糖浆F‑55中的应用。本发明提供的高效表达耐高温葡萄糖异构酶的重组大肠杆菌,解决了一般的耐高温葡萄糖异构酶生产高果糖浆F‑55反应温度过高的问题;应用该菌种生产葡萄糖异构酶具有产量高、工艺简单、周期短、便于工业化应用等优点,该菌株可直接用于高果糖浆F‑55的生产,而不需要细胞破碎;发酵培养结束后在80℃条件下对D‑葡萄糖的总酶活达到606.8U/g,D‑葡萄糖的转化率达到67.3%,80℃下保温24h残余酶活为75%,反应平衡时间为2.5h,这为高果糖浆F‑55的工业化大规模生产提供了良好的技术支持。

    一种改性硅藻土固定化含有葡萄糖异构酶细胞的方法

    公开(公告)号:CN111440785B

    公开(公告)日:2022-07-15

    申请号:CN202010126502.4

    申请日:2020-02-28

    Abstract: 本发明涉及一种改性硅藻土固定化含有葡萄糖异构酶细胞的方法,所述方法是将含葡萄糖异构酶基因的基因工程菌经发酵培养获得的湿菌体经缓冲液悬浮,制成菌悬液;向菌悬液中添加改性硅藻土,搅拌混匀,加入聚乙烯亚胺,然后再加入戊二醛进行交联,15~35℃搅拌交联0.5~5h后抽滤,滤饼用蒸馏水洗涤后,粉碎成粒,得到含葡萄糖异构酶的固定化葡萄糖异构酶制剂;本发明所提供的固定化方法具有固定化材料成本低,操作简单,机械强度高,制备的固定化产葡萄糖异构酶重组大肠杆菌全细胞用于催化D‑葡萄糖生产D‑果糖,在60℃条件下,分批次反应重复使用40批次后,仍具有86%以上的残余酶活力;连续反应603h,时空产率为3.8kg/L/d,平均转化率大于42%,具有良好的工业化应用前景。

    一种葡萄糖异构酶、突变体及其编码基因与应用

    公开(公告)号:CN113151240A

    公开(公告)日:2021-07-23

    申请号:CN202110559008.1

    申请日:2021-05-21

    Abstract: 本发明涉及一种葡萄糖异构酶及其突变体,以及其编码基因,以及其在微生物催化D‑葡萄糖异构化制备高果糖浆F‑55中的应用。本发明提供的高效表达耐高温葡萄糖异构酶的重组大肠杆菌,解决了一般的耐高温葡萄糖异构酶生产高果糖浆F‑55反应温度过高的问题;应用该菌种生产葡萄糖异构酶具有产量高、工艺简单、周期短、便于工业化应用等优点,该菌株可直接用于高果糖浆F‑55的生产,而不需要细胞破碎;发酵培养结束后在80℃条件下对D‑葡萄糖的总酶活达到606.8U/g,D‑葡萄糖的转化率达到67.3%,80℃下保温24h残余酶活为75%,反应平衡时间为2.5h,这为高果糖浆F‑55的工业化大规模生产提供了良好的技术支持。

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