利用原生质体转化构建黑根霉CPR基因工程菌的方法

    公开(公告)号:CN103695455B

    公开(公告)日:2016-04-13

    申请号:CN201310316876.2

    申请日:2013-07-24

    摘要: 本发明提供了一种利用原生质体转化技术对黑根霉(Rhizopus nigericans)进行外源基因的遗传转化方法:利用真菌细胞壁降解酶对黑根霉(Rhizopus nigericans)的细胞壁进行处理,得到原生质体并进行纯化,以潮霉素B作为选择标记,首次将来自米根霉NADPH-细胞色素P450还原酶CYPOR(缩写:CPR基因)基因采用原生质体转化方法导入黑根霉中,获得工程菌。本发明的有益效果体现在:可以用于黑根霉的分子生物学研究,如研究该菌P450酶系基因对甾体化合物羟化作用的分子机制等;可以用来对黑根霉实施基因工程从而进行遗传改良育种,提高黑根霉对甾体底物羟化转化率。

    利用原生质体转化构建黑根霉CPR基因工程菌的方法

    公开(公告)号:CN103695455A

    公开(公告)日:2014-04-02

    申请号:CN201310316876.2

    申请日:2013-07-24

    摘要: 本发明提供了一种利用原生质体转化技术对黑根霉(Rhizopus nigericans)进行外源基因的遗传转化方法:利用真菌细胞壁降解酶对黑根霉(Rhizopus nigericans)的细胞壁进行处理,得到原生质体并进行纯化,以潮霉素B作为选择标记,首次将来自米根霉NADPH-细胞色素P450还原酶CYPOR(缩写:CPR基因)基因采用原生质体转化方法导入黑根霉中,获得工程菌。本发明的有益效果体现在:可以用于黑根霉的分子生物学研究,如研究该菌P450酶系基因对甾体化合物羟化作用的分子机制等;可以用来对黑根霉实施基因工程从而进行遗传改良育种,提高黑根霉对甾体底物羟化转化率。

    一种从生物催化液中提取制备5-甲基四氢叶酸钙的方法

    公开(公告)号:CN118027037A

    公开(公告)日:2024-05-14

    申请号:CN202410187415.8

    申请日:2024-02-20

    摘要: 本发明涉及有机化学领域,尤其涉及一种从生物催化液中提取制备5‑甲基四氢叶酸钙的方法,包括如下步骤:(1)将生物催化法制备5‑甲基四氢叶酸得到的生物催化液过滤,得到5‑甲基四氢叶酸滤液;(2)将5‑甲基四氢叶酸滤液利用离子交换层析得到5‑甲基四氢叶酸洗脱液;(3)将5‑甲基四氢叶酸洗脱液处理后,用于制备5‑甲基四氢叶酸钙。本发明利用过滤先筛出部分杂质,再利用5‑甲基四氢叶酸的带电性质,采用离子交换层析的方法对5‑甲基四氢叶酸进行选择性分离。同时,由于离子交换层析可以提供高纯度的分离效果,因此可用于制备高纯度的5‑甲基四氢叶酸钙。

    一种高纯度柑橘黄酮糖苷的制备方法

    公开(公告)号:CN117925756A

    公开(公告)日:2024-04-26

    申请号:CN202410076699.3

    申请日:2024-01-18

    摘要: 本发明公开了一种高纯度柑橘黄酮糖苷的制备方法,采用环糊精糖基转移酶催化柑橘黄酮与糊精之间的糖基转移过程,之后采用糖化酶选择性降解多糖基柑橘黄酮至单糖基柑橘黄酮,随后采用β‑糖苷酶选择性降解反应液中未转化的柑橘黄酮原料,最后通过大孔吸附树脂吸附分离溶液中的单糖基柑橘黄酮。通过该方法制备得到的柑橘黄酮糖苷如葡萄糖基橙皮苷和葡萄糖基柚皮苷,具有较高的纯度,纯度可以达到95%以上。

    一种井冈霉素的分离纯化方法

    公开(公告)号:CN111995646B

    公开(公告)日:2022-03-18

    申请号:CN201910447719.2

    申请日:2019-05-27

    IPC分类号: C07H15/22 C07H1/06

    摘要: 本发明公开了一种井冈霉素的分离纯化方法,所述分离纯化方法为:(1)将井冈霉素粗品溶于去离子水中,并采用盐酸调节pH至3.0‑4.2之间,得到井冈霉素水溶液;(2)采用两隔室电渗析装置,阳膜和阴膜采用合金离子交换膜,在淡水室通入步骤(1)获得的井冈霉素水溶液,浓水室通入纯水,启动电渗析装置进行分离纯化,使井冈霉素H留在淡水室,其他主要成分进入浓水室;(3)采用两隔室电渗析装置,阳膜和阴膜采用均相膜,在淡水室通入步骤(2)获得的浓水室溶液,浓水室通入纯水,启动电渗析装置进行分离纯化;(4)将步骤(3)处理得到的淡水室中物料进行喷雾干燥,获得井冈霉素。本发明方法收率高,产品纯度高,分离时间短,用水量大幅减少。

    一种甘油葡萄糖苷晶体的制备方法

    公开(公告)号:CN109762033A

    公开(公告)日:2019-05-17

    申请号:CN201910072965.4

    申请日:2019-01-25

    IPC分类号: C07H15/04 C07H1/06 C12P19/44

    摘要: 本发明公开了一种甘油葡萄糖苷晶体的制备方法:将质量浓度8-10%甘油葡萄糖苷水溶液在50-60℃、-0.02~-0.04MPa的条件下浓缩至甘油葡萄糖苷质量浓度为50-55%,获得浓缩液;向浓缩液中加入4-6倍体积的含有体积浓度1-7%石油醚的有机溶剂,在70-80℃下回流反应50-80min后,缓慢降温至45-55℃,趁热加入分子筛或浓硫酸,室温放置40-48h,4-8℃冰箱中冷却结晶2-8天,在相对湿度为10-20%的条件下抽滤,滤饼真空干燥,获得甘油葡萄糖苷晶体;采用本发明方法最终可以得到GG的晶体,且适于GG的大规模生产,收率达到51%,纯度达到86%。