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公开(公告)号：CN117224663A
公开(公告)日：2023-12-15
申请号：CN202210642696.2
申请日：2022-06-08
申请人： 浙江海隆生物科技有限公司
IPC分类号： A61K39/245 , A61P31/22 , C12N15/38 , C12N15/85
摘要： 本发明公开了一种猪伪狂犬病病毒亚单位的疫苗组合物及其制备方法和应用，所述疫苗组合物包含哺乳动物细胞表达系统表达的猪伪狂犬病病毒结构蛋白gD和猪伪狂犬病病毒结构蛋白gB、以及药学上可以接受的佐剂。本发明的疫苗组合物具有免疫原性强、安全性好、无免疫干扰的优点；且能有效预防和保护猪免受猪伪狂犬病的感染。
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公开(公告)号：CN112142851B
公开(公告)日：2023-05-05
申请号：CN201910577765.4
申请日：2019-06-28
申请人： 浙江海隆生物科技有限公司
IPC分类号： C07K19/00 , C12N15/62 , C12N15/85 , A61K39/205 , A61P31/14
摘要： 本发明提供了一种狂犬病毒表面的亚单位融合蛋白tG及其制备方法和应用，所述制备方法包括：1)将如SEQ ID NO.4所示的基因序列克隆到真核表达载体中，得到含有融合蛋白tG编码基因的重组质粒；2)再将含有融合蛋白tG编码基因的重组质粒转染至表达细胞中；3)通过培养、筛选、驯化步骤2)中所述表达细胞，得到高度表达的细胞株；4)发酵培养步骤3)中所述细胞株，纯化后，得到亚单位融合蛋白tG。本发明能够在大量可溶性表达tG，蛋白稳定，克服了现有技术中狂犬病毒表面G蛋白不能大规模表达等诸多问题，且制备方法简单、成本低。
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公开(公告)号：CN111607001B
公开(公告)日：2023-04-25
申请号：CN201910142648.5
申请日：2019-02-26
申请人： 浙江海隆生物科技有限公司
摘要： 本发明公开了一种重组的非洲猪瘟病毒p72亚单位可溶性融合蛋白及其制备方法和应用，所述非洲猪瘟病毒p72亚单位可溶性融合蛋白包括OPTI‑p72蛋白和一种伴侣蛋白，其中所述OPTI‑p72蛋白的核苷酸序列为经优化后的序列OPTI‑p72如SEQ ID NO.1所示。本发明能够在大肠杆菌中直接可溶性表达P72，克服了现有技术中的诸多问题，且制备方法简单、成本低。
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公开(公告)号：CN111378017A
公开(公告)日：2020-07-07
申请号：CN201811628457.1
申请日：2018-12-28
申请人： 浙江海隆生物科技有限公司
IPC分类号： C07K14/12 , C12N15/45 , C12N15/85 , A61K39/155 , A61P31/14 , G01N33/569
摘要： 本发明属于动物疫苗与兽用生物制品技术领域，特别涉及一种小反刍兽疫病毒的亚单位F蛋白及其制备方法和应用，所述亚单位F蛋白的氨基酸序列为：①如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列；②由SEQ ID NO.1经过取代、缺失或添加一个或几个氨基酸得到的具有免疫原性的衍生的氨基酸序列。本发明的亚单位F蛋白主要通过构建重组质粒、重组质粒转染细胞株、筛选高表达的细胞株、纯化小反刍兽疫病毒的亚单位F蛋白制备而成，能较好的适用于小反刍兽疫病毒的亚单位疫苗或诊断试剂中，具有分泌表达高效、蛋白纯度高、易于纯化、生产成本降低、安全性能高等特点。
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公开(公告)号：CN117618546A
公开(公告)日：2024-03-01
申请号：CN202210985480.6
申请日：2022-08-16
申请人： 浙江海隆生物科技有限公司
IPC分类号： A61K39/155 , A61K39/39 , A61P31/14
摘要： 本发明公开了一种小反刍兽疫病毒亚单位的疫苗组合物及其制备方法和应用，所述疫苗组合物包含哺乳动物细胞表达系统表达的小反刍兽疫病毒的亚单位F蛋白和小反刍兽疫病毒的亚单位H蛋白、以及药学上可以接受的佐剂。本发明的疫苗组合物具有免疫原性强、安全性好、无免疫干扰、中和抗体效价高的优点；且能有效预防和保护羊免受小反刍兽疫病毒的感染。
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公开(公告)号：CN116655751A
公开(公告)日：2023-08-29
申请号：CN202310532636.X
申请日：2017-06-02
申请人： 浙江海隆生物科技有限公司
IPC分类号： C07K14/18 , C12N15/40 , C12N15/85 , A61K39/187 , A61K39/39 , A61P31/14 , G01N33/569
摘要： 本发明公开了重组猪瘟E2蛋白及其亚单位疫苗的制备方法和应用，所述重组猪瘟E2蛋白的制备方法包括下列步骤：1)将猪瘟E2蛋白编码基因克隆到真核表达载体中得到含有猪瘟E2蛋白编码基因的重组质粒；2)再将含有猪瘟E2蛋白编码基因的重组质粒转染至CHO细胞株中；3)通过培养、筛选、驯化2)中所述的CHO细胞株得到高度表达的细胞株；以及4)发酵培养3)中所述的细胞株，纯化后得到重组猪瘟E2蛋白。本发明提供的方法能够从细胞培养上清中收获目的蛋白，且产量高达1g/L，不仅缩短蛋白纯化时间和简化疫苗生产步骤，也大大降低疫苗生产成本。
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公开(公告)号：CN109810983B
公开(公告)日：2022-08-23
申请号：CN201711158126.1
申请日：2017-11-20
申请人： 浙江海隆生物科技有限公司
摘要： 本发明公开了一种猪IFN‑γ的优化基因和采用该优化基因制备猪IFN‑γ的方法及其注射液和应用，所述猪IFN‑γ的优化基因的基因序列如SEQ ID NO.1所示，所述制备方法包括：1)将权利要求1所述的基因序列克隆到真核表达载体中，得到重组真核表达载体；2)将步骤1)中所述重组真核表达载体转染CHO细胞，通过培养、筛选和驯化，得到高效表达猪IFN‑γ的CHO细胞株；以及3)将步骤2)中所述CHO细胞株进行发酵培养，从发酵培养上清中纯化得到猪IFN‑γ。所述注射液包括60μg猪IFN‑γ与70佐剂。使用优化后的基因序列在CHO细胞中制备猪IFN‑γ蛋白时具有产量高、易纯化、成本低、质控容易，且具有良好的活性，可以作为免疫增强剂和治疗药品使用。
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公开(公告)号：CN107973841B
公开(公告)日：2022-03-25
申请号：CN201611208261.8
申请日：2016-12-23
申请人： 浙江海隆生物科技有限公司
摘要： 本发明公开了一种CHO细胞表达的重组牛病毒性腹泻病毒E2蛋白及亚单位疫苗的制备方法和应用，属于动物疫苗与兽用生物制品技术领域。其目的在于提供一种可大规模工业化生产牛病毒性腹泻病毒重组亚单位疫苗的制备方法。本发明提供的重组亚单位疫苗制备方法包括以下步骤：1)克隆包含E2蛋白编码基因的真核表达载体；2)转染CHO细胞，通过选择、筛选和驯化的方式得到悬浮稳定高效表达E2蛋白的CHO细胞株；3)发酵培养2)中所述的细胞株，纯化后得到重组E2蛋白；4)将重组E2蛋白与ISA 201 VG充分混匀得到重组亚单位疫苗。本发明提供的方法能够从细胞培养上清中收获目的蛋白，且产量高达500mg/L，不仅缩短蛋白纯化时间和简化疫苗生产步骤，也大大降低疫苗生产成本。
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公开(公告)号：CN111658768A
公开(公告)日：2020-09-15
申请号：CN201910176519.8
申请日：2019-03-08
申请人： 浙江海隆生物科技有限公司
摘要： 本发明公开了一种非洲猪瘟的多组分亚单位疫苗及其制备方法和应用，属于动物疫苗与兽用生物制品技术领域，所述多组分亚单位疫苗包括非洲猪瘟病毒表面囊膜蛋白CD2V和至少选自非洲猪瘟病毒P72蛋白、非洲猪瘟病毒P30蛋白、非洲猪瘟病毒P54膜结构蛋白中一种蛋白，以及药学上可以接受的佐剂；其中，所述非洲猪瘟病毒表面囊膜蛋白CD2V为除去跨膜区的非洲猪瘟病毒CD2V蛋白、或非洲猪瘟病毒CD2V胞外区蛋白与猪抗体Fc的融合蛋白CD2V-Fc。本发明的多组分亚单位疫苗具有免疫原性强、安全性好、且疫苗能够显著诱导体液免疫反应。
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公开(公告)号：CN109810983A
公开(公告)日：2019-05-28
申请号：CN201711158126.1
申请日：2017-11-20
申请人： 浙江海隆生物科技有限公司
摘要： 本发明公开了一种猪INF-γ的优化基因和采用该优化基因制备猪INF-γ的方法及其注射液和应用，所述猪INF-γ的优化基因的基因序列如SEQ ID NO.1所示，所述制备方法包括：1)将权利要求1所述的基因序列克隆到真核表达载体中，得到重组真核表达载体；2)将步骤1)中所述重组真核表达载体转染CHO细胞，通过培养、筛选和驯化，得到高效表达猪INF-γ的CHO细胞株；以及3)将步骤2)中所述CHO细胞株进行发酵培养，从发酵培养上清中纯化得到猪INF-γ。所述注射液包括60μg猪INF-γ与70佐剂。使用优化后的基因序列在CHO细胞中制备猪INF-γ蛋白时具有产量高、易纯化、成本低、质控容易，且具有良好的活性，可以作为免疫增强剂和治疗药品使用。
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