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公开(公告)号：CN113980991B
公开(公告)日：2024-03-26
申请号：CN202111297649.0
申请日：2021-11-04
摘要： 本发明公开了大肠杆菌‑芽孢杆菌穿梭质粒载体及其构建方法和应用，该穿梭质粒载体包括pTC、pBE、pTN和pTK中的任意一种，序列分别如SEQ ID NO.1‑4所示。本发明从PUC19出发获得大肠杆菌复制起点和氨苄青霉素抗性的基因片段，从pMarA出发获得芽孢杆菌温敏复制起点和卡那霉素抗性和红霉素抗性的基因片段，从pBEST502和pSG1164中分别获得新霉素抗性基因和氯霉素抗性基因，经过酶切和酶链接构建了大肠杆菌芽孢杆菌穿梭质粒载体。本发明中的四个质粒载体可在不同芽孢杆菌中穿梭、共存以及消除，避免质粒发生漂移对环境产生污染，可潜在应用于外源蛋白的表达，实现对芽孢杆菌基因组DNA的编辑。
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公开(公告)号：CN112625986B
公开(公告)日：2023-01-31
申请号：CN202011472978.X
申请日：2020-12-15
IPC分类号： C12N1/21 , C12N15/75 , C07K11/02 , C12P21/04 , A61K35/742 , A61K48/00 , A61P31/14 , C12R1/07
摘要： 本发明公开了一种高产表面活性素的基因工程菌及其构建方法和应用，所述基因工程菌以解淀粉芽孢杆菌CPLK1314为出发菌株，敲除或者失活菌株基因组中负调控ComQ基因所得。本发明失活ComQ的基因工程菌在优化的培养基和发酵条件下用于生产表面活性素产量是野生型菌株的5倍，在5L发酵罐40‑50h可稳定生产表面活性素5‑6g/L。该表面活性素高产基因工程菌及其构建方法为加速表面活性素的产业化提供原材料，同时高产表面活性素的基因工程菌可用于制备猪腹泻病毒的防治生物试剂。
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公开(公告)号：CN113980991A
公开(公告)日：2022-01-28
申请号：CN202111297649.0
申请日：2021-11-04
摘要： 本发明公开了大肠杆菌‑芽孢杆菌穿梭质粒载体及其构建方法和应用，该穿梭质粒载体包括pTC、pBE、pTN和pTK中的任意一种，序列分别如SEQ ID NO.1‑4所示。本发明从PUC19出发获得大肠杆菌复制起点和氨苄青霉素抗性的基因片段，从pMarA出发获得芽孢杆菌温敏复制起点和卡那霉素抗性和红霉素抗性的基因片段，从pBEST502和pSG1164中分别获得新霉素抗性基因和氯霉素抗性基因，经过酶切和酶链接构建了大肠杆菌芽孢杆菌穿梭质粒载体。本发明中的四个质粒载体可在不同芽孢杆菌中穿梭、共存以及消除，避免质粒发生漂移对环境产生污染，可潜在应用于外源蛋白的表达，实现对芽孢杆菌基因组DNA的编辑。
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公开(公告)号：CN114292864B
公开(公告)日：2023-08-08
申请号：CN202111677296.7
申请日：2021-12-31
摘要： 本发明公开了高产表面活性素的贝莱斯芽孢杆菌突变株及其构建方法和应用，所述贝莱斯芽孢杆菌突变株以贝莱斯芽孢杆菌HCK2为出发菌株，利用同源重组原理，敲除或者失活贝莱斯芽孢杆菌HCK2基因组中负调控RapF、SerA基因所得。本发明构建的单基因敲除突变株ΔSerA、ΔRapF和双基因突变株ΔRapF+SerA在发酵条件下用于高效生产表面活性素产量，其中RapF+SerA突变株在优化的培养基和发酵条件下用于生产表面活性素产量是贝莱斯芽孢杆菌HCK2的5倍，在5L发酵罐40‑50h可稳定生产表面活性素约16.5g/L。该表面活性素高产基因突变株及其构建方法为加速表面活性素的产业化提供原材料。
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公开(公告)号：CN114292864A
公开(公告)日：2022-04-08
申请号：CN202111677296.7
申请日：2021-12-31
摘要： 本发明公开了高产表面活性素的贝莱斯芽孢杆菌突变株及其构建方法和应用，所述贝莱斯芽孢杆菌突变株以贝莱斯芽孢杆菌HCK2为出发菌株，利用同源重组原理，敲除或者失活贝莱斯芽孢杆菌HCK2基因组中负调控RapF、SerA基因所得。本发明构建的单基因敲除突变株ΔSerA、ΔRapF和双基因突变株ΔRapF+SerA在发酵条件下用于高效生产表面活性素产量，其中RapF+SerA突变株在优化的培养基和发酵条件下用于生产表面活性素产量是贝莱斯芽孢杆菌HCK2的5倍，在5L发酵罐40‑50h可稳定生产表面活性素约16.5g/L。该表面活性素高产基因突变株及其构建方法为加速表面活性素的产业化提供原材料。
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公开(公告)号：CN112625986A
公开(公告)日：2021-04-09
申请号：CN202011472978.X
申请日：2020-12-15
IPC分类号： C12N1/21 , C12N15/75 , C07K11/02 , C12P21/04 , A61K35/742 , A61K48/00 , A61P31/14 , C12R1/07
摘要： 本发明公开了一种高产表面活性素的基因工程菌及其构建方法和应用，所述基因工程菌以解淀粉芽孢杆菌CPLK1314为出发菌株，敲除或者失活菌株基因组中负调控ComQ基因所得。本发明失活ComQ的基因工程菌在优化的培养基和发酵条件下用于生产表面活性素产量是野生型菌株的5倍，在5L发酵罐40‑50h可稳定生产表面活性素5‑6g/L。该表面活性素高产基因工程菌及其构建方法为加速表面活性素的产业化提供原材料，同时高产表面活性素的基因工程菌可用于制备猪腹泻病毒的防治生物试剂。
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公开(公告)号：CN110540949A
公开(公告)日：2019-12-06
申请号：CN201910778607.5
申请日：2019-08-22
申请人： 淮阴工学院 , 淮安市水产技术指导站
IPC分类号： C12N1/20 , C12P21/02 , A61K35/742 , A23K10/18 , A23K50/80 , A61P31/04 , A61P31/12 , A61P37/04 , C12R1/07
摘要： 本发明公开了一种贝莱斯芽孢杆菌突变株及应用，贝莱斯芽孢杆菌突变株命名为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)HCK2，保藏编号为CCTCC NO：M2019396，是从保藏编号为CCTCC NO：M2017658的贝莱斯芽孢杆菌CPLK1314进行N离子突变而来。本发明贝莱斯芽孢杆菌突变株能够高产罗克霉素，提高克氏原螯虾的抵抗力，减少白斑综合症病毒拷贝数，降低克氏原螯虾的病发率；能够抑制有害细菌在水体中繁殖速率，净化水体环境，在水产养殖中具有广阔的利用前景。
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公开(公告)号：CN116024147A
公开(公告)日：2023-04-28
申请号：CN202211083996.8
申请日：2022-09-06
申请人： 淮阴工学院
摘要： 本发明公开了采用关键酶SrfAD和YbdT协同提高芽孢杆菌高产表面活性素的基因工程菌，所述基因工程菌以贝莱斯芽孢杆菌突变株ΔRapF+SerA为出发菌株，将SrfAD和/或YbdT关键限速酶基因的转化到贝莱斯芽孢杆菌突变株ΔRapF+SerA所得。本发明构建得到基因工程菌ΔRapF+SerA+SrfAD和ΔRapF+SerA+SrfAD+YbdT在发酵条件下用于高效生产表面活性素产量，两个关键限速酶基因的组成型表达，成功地将表面活性素进一步提高，在最佳培养基条件下，在5L发酵罐40‑50h可稳定生产表面活性素约18.2g/L与19.6g/L，该基因工程菌为加速表面活性素的产业化提供原材料。
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公开(公告)号：CN111411053B
公开(公告)日：2023-02-17
申请号：CN202010193730.3
申请日：2020-03-17
申请人： 淮阴工学院 , 淮安市水产技术指导站
IPC分类号： C12N1/20 , C12N1/02 , C12P17/02 , C12P21/02 , A61K35/742 , A61P31/04 , A23K50/80 , A23K10/18 , A01K61/13 , C12R1/125
摘要： 本发明公开了一株协同产三种抗细菌代谢产物枯草芽孢杆菌JCL16及其筛选和应用，该协同产三种抗细菌代谢产物菌株JCL16，经鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)，已保藏于中国典型微生物保藏中心，保藏时间为2018年06月01日，保藏编号为CCTCC NO:M2018336。本发明的枯草芽孢杆菌JCL16可以产生三种抗细菌代谢产物分别为：表面活性素Surfactin、溶杆菌素Bacilysin、和SubtilosinA；对加州鲈鱼的病害具有优异的防治效果，尤其是鰤鱼诺卡氏菌导致的加州鲈鱼病害，可用于制成相关的生物制剂和饲料。
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公开(公告)号：CN110540949B
公开(公告)日：2023-01-31
申请号：CN201910778607.5
申请日：2019-08-22
申请人： 淮阴工学院 , 淮安市水产技术指导站
IPC分类号： C12N1/20 , C12P21/02 , A61K35/742 , A23K10/18 , A23K50/80 , A61P31/04 , A61P31/12 , A61P37/04 , C12R1/07
摘要： 本发明公开了一种贝莱斯芽孢杆菌突变株及应用，贝莱斯芽孢杆菌突变株命名为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)HCK2，保藏编号为CCTCC NO：M2019396，是从保藏编号为CCTCC NO：M2017658的贝莱斯芽孢杆菌CPLK1314进行N离子突变而来。本发明贝莱斯芽孢杆菌突变株能够高产罗克霉素，提高克氏原螯虾的抵抗力，减少白斑综合症病毒拷贝数，降低克氏原螯虾的病发率；能够抑制有害细菌在水体中繁殖速率，净化水体环境，在水产养殖中具有广阔的利用前景。
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