一种高效催化制备假尿苷的全细胞催化剂及其制备和应用

    公开(公告)号:CN117844721B

    公开(公告)日:2025-02-14

    申请号:CN202311698577.X

    申请日:2023-12-11

    Applicant: 湖北大学

    Abstract: 本发明公开了一种高效催化制备假尿苷的全细胞催化剂及其制备方法和应用,所述全细胞催化剂为表达yeiN或yeiN‑102突变体的大肠杆菌基因工程菌,所述yeiN的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,所述yeiN‑102突变体是在yeiN第102位氨基酸残基发生了替代;基于所述全细胞催化剂,本发明开发了全细胞法制备假尿苷的方法,在本发明方法中,可通过提高菌体浓度直接获取假尿苷,无需单独的去磷酸化处理,而且通过反应条件优化,将假尿苷的合成效率提高到了92.96%,本发明对假尿苷的绿色合成具有重要意义。

    基于RPA-PAND的肠道病毒分型检测试剂盒和检测方法

    公开(公告)号:CN118441097B

    公开(公告)日:2024-10-18

    申请号:CN202410521879.8

    申请日:2024-04-28

    Applicant: 湖北大学

    Abstract: 本发明公开了基于RPA‑PAND的肠道病毒分型检测试剂盒和检测方法,其中检测试剂盒包括PfAgo蛋白以及用于特异性检测肠道病毒EV71型、CVA6型、CVA10型、CVA16型以及通用型EVU的gDNA和MB组合。本发明基于PfAgo蛋白介导靶标检测并结合RPA技术成功建立了分型检测常见肠道病毒A型病原EV71、CVA6、CVA10、CVA16以及肠道病毒通用型EVU的RPA‑HFMD‑PAND快速核酸检测方法,该方法具有高灵敏度、高特异性、成本低、位置靶向限制较低、反应体系简便、无气溶胶污染、能够进行多通道核酸检测的优势。本发明为HFMD的临床诊断和流行病学监测提供了新的试剂和途径。

    一种高效催化制备假尿苷的全细胞催化剂及其制备和应用

    公开(公告)号:CN117844721A

    公开(公告)日:2024-04-09

    申请号:CN202311698577.X

    申请日:2023-12-11

    Applicant: 湖北大学

    Abstract: 本发明公开了一种高效催化制备假尿苷的全细胞催化剂及其制备方法和应用,所述全细胞催化剂为表达yeiN或yeiN‑102突变体的大肠杆菌基因工程菌,所述yeiN的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,所述yeiN‑102突变体是在yeiN第102位氨基酸残基发生了替代;基于所述全细胞催化剂,本发明开发了全细胞法制备假尿苷的方法,在本发明方法中,可通过提高菌体浓度直接获取假尿苷,无需单独的去磷酸化处理,而且通过反应条件优化,将假尿苷的合成效率提高到了92.96%,本发明对假尿苷的绿色合成具有重要意义。

    基于RPA-PAND的肠道病毒分型检测试剂盒和检测方法

    公开(公告)号:CN118441097A

    公开(公告)日:2024-08-06

    申请号:CN202410521879.8

    申请日:2024-04-28

    Applicant: 湖北大学

    Abstract: 本发明公开了基于RPA‑PAND的肠道病毒分型检测试剂盒和检测方法,其中检测试剂盒包括PfAgo蛋白以及用于特异性检测肠道病毒EV71型、CVA6型、CVA10型、CVA16型以及通用型EVU的gDNA和MB组合。本发明基于PfAgo蛋白介导靶标检测并结合RPA技术成功建立了分型检测常见肠道病毒A型病原EV71、CVA6、CVA10、CVA16以及肠道病毒通用型EVU的RPA‑HFMD‑PAND快速核酸检测方法,该方法具有高灵敏度、高特异性、成本低、位置靶向限制较低、反应体系简便、无气溶胶污染、能够进行多通道核酸检测的优势。本发明为HFMD的临床诊断和流行病学监测提供了新的试剂和途径。

    一种寨卡病毒核酸检测试剂盒和检测方法

    公开(公告)号:CN117487966A

    公开(公告)日:2024-02-02

    申请号:CN202311537812.5

    申请日:2023-11-15

    Applicant: 湖北大学

    Abstract: 本发明公开了一种寨卡病毒核酸检测试剂盒和检测方法,所述检测试剂盒包括PfAgo蛋白、序列如SEQ ID NO.1~3所示的gDNAs以及序列如SEQ ID NO.4所示的分子信标。本发明建立了一种新型的核酸检测系统,该系统基于PfAgo介导的核酸检测,靶向寨卡病毒基因组的非结构蛋白5区域。本发明方法在PCR预扩增的情况下,MDC约为10nM;而引入扩增步骤后,MDC可大幅降至8.3aM;此外,ZIKV‑PAND临床模拟样本的诊断结果显示与qRT‑PCR检测的一致性达到100%,这将有助于ZIKV感染的临床诊断和流行病学调查的分子检测。

    PfAgo蛋白介导的B19病毒核酸检测试剂盒及检测方法

    公开(公告)号:CN114703328A

    公开(公告)日:2022-07-05

    申请号:CN202210440583.4

    申请日:2022-04-25

    Applicant: 湖北大学

    Abstract: 本发明属于B19病毒检测技术领域,公开了一种PfAgo蛋白介导的B19病毒核酸检测试剂盒及检测方法,检测试剂盒包括三条或单条引导PfAgo靶向B19病毒ns1基因的gDNA,其序列SEQ ID NO:1~3所示;gDNA引导PfAgo特异性切割B19病毒ns1基因片段,进而生成靶向荧光分子信标的gn‑DNA进行第二轮切割,实现对B19病毒特异性和灵敏性检测。相对于现有的B19病毒检测方法,本发明不仅检测成本低,灵敏度高且特异性强,具有重要的实际应用价值。

    PfAgo蛋白介导的B19病毒核酸检测试剂盒及检测方法

    公开(公告)号:CN114703328B

    公开(公告)日:2023-12-19

    申请号:CN202210440583.4

    申请日:2022-04-25

    Applicant: 湖北大学

    Abstract: 本发明属于B19病毒检测技术领域,公开了一种PfAgo蛋白介导的B19病毒核酸检测试剂盒及检测方法,检测试剂盒包括三条或单条引导PfAgo靶向B19病毒ns1基因的gDNA,其序列SEQ ID NO:1~3所示;gDNA引导PfAgo特异性切割B19病毒ns1基因片段,进而生成靶向荧光分子信标的gn‑DNA进行第二轮切割,实现对B19病毒特异性和灵敏性检测。相对于现有的B19病毒检测方法,本发明不仅检测成本低,灵敏度高且特异性强,具有重要的实际应用价值。

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