高密度悬浮培养的BHK21细胞克隆株

    公开(公告)号:CN106834209B

    公开(公告)日:2020-07-03

    申请号:CN201710046840.5

    申请日:2017-01-22

    摘要: 本发明提供高密度悬浮培养的BHK21细胞克隆株,所述高密度悬浮培养的BHK21细胞克隆株保藏于中国典型培养物保藏中心,分类命名:叙利亚仓鼠肾细胞BHK21‑XF‑C13,保藏编号为:C2016147。本发明通过单细胞克隆培养和筛选,得到了一株高密度悬浮培养的BHK21克隆株(培养物名称:叙利亚仓鼠肾细胞BHK21‑XF‑C13,保藏编号C2016147),为BHK21细胞敏感病毒的研究和疫苗生产提供高密度悬浮培养的细胞株。

    全悬浮培养型Marc-145细胞系的驯化方法

    公开(公告)号:CN105950544B

    公开(公告)日:2020-07-03

    申请号:CN201610325906.X

    申请日:2016-05-17

    IPC分类号: C12N5/073 C12N1/36

    摘要: 本发明提供全悬浮培养型Marc‑145细胞系的驯化方法,步骤如下:(1)贴壁培养型Marc‑145细胞的培养;(2)低血清贴壁培养型Marc‑145细胞系的驯化;(3)低血清全悬浮培养型Marc‑145细胞的驯化;(4)无血清全悬浮培养型Marc‑145细胞的驯化。应用本发明的细胞驯化方法能够得到悬浮培养的Marc‑145细胞,该细胞适应低血清和无血清全悬浮培养,在7.5L的反应器按无血清培养密度可达8×106/ml,至少可得到4.4×1010的细胞,相当于80‑90个15L滚瓶或18‑20个40层细胞工厂收获的细胞数量,发明效果明显。

    无血清悬浮培养型MDCK细胞株及其应用

    公开(公告)号:CN109852580A

    公开(公告)日:2019-06-07

    申请号:CN201910238103.4

    申请日:2019-03-27

    IPC分类号: C12N5/071 C12N7/00

    摘要: 本发明公开了一种无血清悬浮培养型MDCK细胞株及其应用,所述无血清悬浮培养型MDCK细胞株保藏于中国典型培养物保藏中心,分类命名:犬肾细胞MDCK-XF02,保藏编号为:CCTCC NO:C2018190;所述无血清悬浮培养型MDCK细胞株可应用于流感疫苗和禽流感疫苗的生产。本发明通过无血清适应培养和悬浮培养驯化,得到了无血清悬浮培养型MDCK-XF02细胞株,犬肾细胞MDCK-XF02细胞在无血清培养基悬浮培养活力高、结团少且均一性好,完全适应在无血清培养基中进行悬浮培养,为我国开展流感和禽流感疫苗的相关研究和生产提供了无血清悬浮培养型细胞株。

    一种过表达SV40-LT基因的人胚肺细胞系及其应用

    公开(公告)号:CN118207168A

    公开(公告)日:2024-06-18

    申请号:CN202410254674.8

    申请日:2024-03-06

    摘要: 本发明提供过表达SV40‑LT基因的人胚肺细胞系MU‑SVL1,其保藏编号为CCTCC No:C202374。本发明还提供其构建方法以及在培养病毒中的应用。本发明的MU‑SVL1细胞是利用过表达SV40‑LT的慢病毒感染人胚肺细胞MU‑L1(P24),经0.6μg/mL的嘌呤霉素筛选出稳转细胞系。本发明的MU‑SVL1细胞按1:4比例传代,在原有代次基础上已培养至P90代,P70代时增殖能力仍较快。本发明的MU‑SVL1细胞染色体数目主要分布为2n=46,为二倍体核型;随细胞代次的增加,有多倍体发生。本发明的MU‑SVL1细胞均无成瘤性,对脑心肌炎病毒具有敏感性。

    一株高产流感病毒的MDCK细胞株及其应用

    公开(公告)号:CN116574686A

    公开(公告)日:2023-08-11

    申请号:CN202310249250.8

    申请日:2023-03-15

    摘要: 本发明提供一株高产流感病毒的MDCK细胞株,具体为USP1敲低稳转MDCK细胞株。本发明还提供上述MDCK细胞株在流感病毒增殖培养中的应用。本发明首次将由慢病毒介导的RNAi技术沉默的USP1基因导入MDCK细胞中,并进行流感病毒增殖检测。应用野生型MDCK细胞(CCL‑34),通过RNAi技术成功构建USP1敲低稳转细胞株,并通过检测细胞中流感病毒效价、血凝效价及NP基因表达,筛选出最佳感染条件为胰酶浓度2μg/ml,病毒感染moi=0.01,病毒液收获时间为60小时。本发明的USP1敲低细胞株与野生型MDCK细胞相比,获得的流感病毒滴度更高,有望应用于流感疫苗生产研发。

    人肺胚细胞系及其应用
    8.
    发明公开

    公开(公告)号:CN115627252A

    公开(公告)日:2023-01-20

    申请号:CN202211272408.5

    申请日:2022-10-18

    摘要: 本发明提供人胚肺细胞系MU‑L1,其保藏编号为CCTCC No:C2022196。本发明还提供其扩大培养方法以及在培养病毒中的应用。本发明的人胚肺细胞来源清晰;形态呈典型的成纤维样,长满单层后呈漩涡状生长;生长时对培养基营养成分要求低,含8%~10%新生牛血清的MEM培养基即生长良好。本发明的人胚肺细胞按1:4分种率传代,可传67代;经液氮冻存复苏后细胞活率均可保持在90%以上,且生长良好。本发明的人胚肺细胞未经发现细菌、真菌、支原体及内外源病毒因子污染;符合《中国药典》三部(2020版)人二倍体细胞染色体要求;裸鼠成瘤性试验结果为阴性,无成瘤性,且对水痘病毒较现用的MRC‑5细胞敏感。

    无血清悬浮培养型MDCK细胞株及其应用

    公开(公告)号:CN109929796A

    公开(公告)日:2019-06-25

    申请号:CN201910237651.5

    申请日:2019-03-27

    IPC分类号: C12N5/071 C12N7/00

    摘要: 本发明公开了一种无血清悬浮培养型MDCK细胞株及其应用,所述无血清悬浮培养型MDCK细胞株保藏于中国典型培养物保藏中心,分类命名:犬肾细胞MDCK-XF03,保藏编号为:CCTCC NO:C2018191;所述无血清悬浮培养型MDCK细胞株可应用于流感疫苗和禽流感疫苗的生产。本发明通过无血清适应培养和悬浮培养驯化,得到了无血清悬浮培养型MDCK-XF03细胞株,犬肾细胞MDCK-XF03细胞在无血清培养基悬浮培养活力高、结团少且均一性较好,完全适应在无血清培养基中进行悬浮培养,为我国开展流感和禽流感疫苗的相关研究和生产提供了无血清悬浮培养型细胞株。

    Vero悬浮细胞系及其驯化方法和应用

    公开(公告)号:CN117660298A

    公开(公告)日:2024-03-08

    申请号:CN202311426480.3

    申请日:2023-10-31

    摘要: 本发明提供Vero悬浮细胞系的驯化方法,包括以下步骤:(1)用含体积百分比2%NBS的M199培养基培养Vero贴壁细胞,离心取沉淀后,接种悬浮培养基进行低血清悬浮适应培养;所述悬浮培养基为含体积百分比2%NBS的Vero602悬浮培养基,或含体积百分比2%NBS的Vero602:Vero‑S等体积混合悬浮培养基;(2)将步骤(1)的Vero细胞进行无血清悬浮培养驯化,得到Vero悬浮细胞系。本发明的驯化方法能够很好地将Vero贴壁细胞驯化成无血清全悬浮培养型细胞,从而获得Vero悬浮细胞系Vero‑XF,且在驯化前期适应过程中不需要补加新的贴壁细胞,细胞活率和细胞密度一直持在较高水平。