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公开(公告)号：CN101502650A
公开(公告)日：2009-08-12
申请号：CN200910025821.X
申请日：2009-03-10
摘要： 本发明涉及一种密码子优化的乙型肝炎病毒核酸疫苗。本发明经分析乙型肝炎表面抗原(HBs)基因序列(adr亚型)，找出其密码子使用偏好与哺乳动物密码子使用偏好不同的密码子位点，对HBs基因序列的密码子进行替换，得到表面抗原基因，再将该基因序列合成，经扩增得到经密码子优化的MHBs，Pst I、BamH I，双酶切MHBs基因和载体pSW3891质粒，配制10ul的连接体系，得到中蛋白基因。本发明解决了原核生物与真核生物在密码子使用偏好上存在差异，导致外源基因在哺乳动物宿主体内不能有效表达，不能产生较好免疫保护作用的缺陷。本发明显著提高了外源基因在哺乳动物宿主体内的蛋白表达量，有效的刺激了宿主的免疫系统，使之产生较好的体液免疫反应和细胞免疫反应。
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公开(公告)号：CN101502650B
公开(公告)日：2011-12-28
申请号：CN200910025821.X
申请日：2009-03-10
摘要： 本发明涉及一种密码子优化的乙型肝炎病毒核酸疫苗。本发明经分析乙型肝炎表面抗原(HBs)基因序列(adr亚型)，找出其密码子使用偏好与哺乳动物密码子使用偏好不同的密码子位点，对HBs基因序列的密码子进行替换，得到表面抗原基因，再将该基因序列合成，经扩增得到经密码子优化的MHBs，PstI、BamHI，双酶切MHBs基因和载体pSW3891质粒，配制10ul的连接体系，得到中蛋白基因。本发明解决了原核生物与真核生物在密码子使用偏好上存在差异，导致外源基因在哺乳动物宿主体内不能有效表达，不能产生较好免疫保护作用的缺陷。本发明显著提高了外源基因在哺乳动物宿主体内的蛋白表达量，有效的刺激了宿主的免疫系统，使之产生较好的体液免疫反应和细胞免疫反应。
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公开(公告)号：CN101885760B
公开(公告)日：2012-12-05
申请号：CN201010126144.3
申请日：2010-03-16
摘要： 本发明属于生物医药技术领域，涉及密码子优化的HIV-1gp120基因共有序列及gp120核酸疫苗。本发明应用多序列比对分析，获得中国HIV-1流行病毒株(A/E重组亚型、B/C重组亚型和ThB亚型)包膜蛋白gp120共有氨基酸序列；应用人工合成的方法制备编码共有氨基酸序列的gp120基因片段，该基因经密码子优化，兼顾了哺乳动物细胞和大肠杆菌密码子使用偏好；在此基础上，构建了由gp120基因和真核表达载体pJW4303组成的HIV-1gp120核酸疫苗。该核酸疫苗可以应用于动物和人体免疫，也可以应用于gp120蛋白的表达和生产。
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公开(公告)号：CN101892248B
公开(公告)日：2012-04-18
申请号：CN201010158886.4
申请日：2010-04-29
摘要： 本发明属于生物技术领域，公开了禽流感H5HA抗原的单克隆抗体。本发明提供了序列为SEQ ID NO.1的密码子优化的H5-VN HA基因，并利用该序列通过DNA免疫制备了禽流感H5-VNHA抗原的单克隆抗体3B2IIG8F6和4B10IIH4G12，以及分泌这两种单抗的杂交瘤细胞CGMCC No.3648和CGMCC No.3649。本发明所提供的密码子优化的H5-VN HA基因将可以提高HA基因的表达。此外，序列优化也使得mRNA更稳定，基因更易于进行转录和翻译。本发明制备得到的H5HA抗原的单克隆抗体，为禽流感病毒的研究和临床应用提供有利的工具。
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公开(公告)号：CN101886084A
公开(公告)日：2010-11-17
申请号：CN201010126142.4
申请日：2010-03-17
摘要： 本发明属于医药生物技术领域，涉及一种密码子优化的H3HA/XJ3-07基因及其核酸疫苗。本发明根据马A型流感病毒A/Equine/Xinjiang/3/07(H3N8)的HA蛋白序列，经密码子优化后化学合成能够表达相应蛋白的H3HA/XJ3-07基因片段，并将该片段克隆到核酸疫苗载体pJW4303中构建了马流感H3HA核酸疫苗；进一步对HA基因进行修改，以人tPA信号肽取代H3-XJ HA天然信号肽或切除部分HA的基因片段使之只表达HA蛋白的胞外域。实验结果显示三种H3HA核酸疫苗均可在293T细胞中高效表达，并能够在新西兰白兔体内诱导产生特异性抗H3HA抗体。
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公开(公告)号：CN101885760A
公开(公告)日：2010-11-17
申请号：CN201010126144.3
申请日：2010-03-16
摘要： 本发明属于生物医药技术领域，涉及密码子优化的HIV-1gp120基因共有序列及gp120核酸疫苗。本发明应用多序列比对分析，获得中国HIV-1流行病毒株(A/E重组亚型、B/C重组亚型和ThB亚型)包膜蛋白gp120共有氨基酸序列；应用人工合成的方法制备编码共有氨基酸序列的gp120基因片段，该基因经密码子优化，兼顾了哺乳动物细胞和大肠杆菌密码子使用偏好；在此基础上，构建了由gp120基因和真核表达载体pJW4303组成的HIV-1gp120核酸疫苗。该核酸疫苗可以应用于动物和人体免疫，也可以应用于gp120蛋白的表达和生产。
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公开(公告)号：CN101851631A
公开(公告)日：2010-10-06
申请号：CN201010126145.8
申请日：2010-03-16
摘要： 本发明属于医药生物技术领域，公开了一种密码子优化的EV71 VP1基因及其核酸疫苗。该EV71 VP1基因兼顾了哺乳动物细胞和大肠杆菌密码子使用偏好，序列为SEQ IDNO.1。在此基础上，将该基因插入到真核表达载体中，构建了核酸疫苗Vector/VP1、Vector/tPA-VP1及Vector/VP1-tandem，三种VP1 DNA疫苗经真核细胞表达和动物免疫验证，均能够较好的表达VP1蛋白，并刺激产生了特异性抗体，体现了良好的免疫原性。
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公开(公告)号：CN102590515A
公开(公告)日：2012-07-18
申请号：CN201210011666.8
申请日：2012-01-13
摘要： 本发明属于生物技术领域，公开了艰难梭菌外毒素A检测试剂盒及组成该试剂盒的单克隆抗体。一种检测艰难梭菌外毒素A的试剂盒，包含两种抗艰难梭菌外毒素A羧基端抗原的单克隆抗体，分别为保藏号为CGMCC No.4979的杂交瘤细胞产生的抗艰难梭菌外毒素A羧基端抗原的单克隆抗体以及辣根过氧化物酶标记的由保藏号为CGMCC No.4980的杂交瘤细胞系产生的抗艰难梭菌外毒素A羧基端抗原的单克隆抗体。本发明提供的艰难梭菌外毒素检测试剂盒，通过使用两株高亲和力的配对单抗，使检测艰难梭菌的灵敏度有了显著提高。
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公开(公告)号：CN102181457B
公开(公告)日：2012-07-04
申请号：CN201110067499.4
申请日：2011-03-21
摘要： 本发明属于生物医药技术领域，涉及密码子优化的艰难梭菌外毒素B氨基端基因序列及其核酸疫苗。该密码子优化基因序列兼顾了哺乳动物细胞和大肠杆菌密码子使用偏好，所涉及的艰难梭菌疫苗由密码子优化的外毒素B氨基端基因序列和真核表达载体pJW4303组成。经密码子优化后的艰难梭菌外毒素B氨基端基因序列，不但可以用于构建核酸疫苗，在免疫哺乳动物后有效地刺激了宿主的免疫系统，产生了特异的体液免疫反应，而且体内、体外模型显示这些特异性抗体具有良好的保护效应；而且也适用于在大肠杆菌中对其进行蛋白的原核表达，为以后该蛋白的大量获取奠定了基础。
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公开(公告)号：CN102199611B
公开(公告)日：2013-01-09
申请号：CN201110067603.X
申请日：2011-03-21
摘要： 本发明属于生物医药技术领域，涉及密码子优化的艰难梭菌外毒素A羧基端基因片段及其核酸疫苗。该密码子优化基因序列兼顾了哺乳动物细胞和大肠杆菌密码子使用偏好，所涉及的艰难梭菌疫苗由密码子优化的外毒素A羧基端基因序列和真核表达载体pJW4303组成。经密码子优化后的艰难梭菌外毒素A羧基端基因片段，不但可以用于构建核酸疫苗，在免疫哺乳动物后有效地刺激了宿主的免疫系统，产生了较好的体液免疫反应，而且也适用于在大肠杆菌中对其进行蛋白的原核表达，为以后该蛋白的大量获取奠定了基础。
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