公开(公告)号：CN101812513A

公开(公告)日：2010-08-25

申请号：CN200910227637.3

申请日：2009-12-24

申请人： 郑州大学

发明人： 王威 ,  杨永利 ,  周舫 ,  画宝勇 ,  郝长付 ,  姚武 ,  张巧 ,  许东 ,  吴拥军 ,  吴逸明 ,  高彬

IPC分类号： C12Q1/68

摘要： 本发明提供鉴定人MTHFR基因多态性rs2274976的方法，包括以下步骤：提供待测人基因组DNA；使用扩增人MTHFR基因多态性rs2274976位点附近序列的正向引物和反向引物，以待测人基因组DNA为模板，进行PCR扩增反应，获得扩增产物；使用限制性内切酶对扩增产物进行酶切，获得酶切产物；以及对酶切产物进行电泳，以鉴定人MTHFR基因多态性；所述正向引物3’末端倒数第二位碱基为错配碱基C，以便在扩增产物中与多态G等位基因形成CCGG或ACCGGT结构，或者与多态A等位基因形成CCAGT结构，以便于使用相应的内切酶进行酶切鉴定，本发明方法操作简单，成本低，使用范围广。

公开(公告)号：CN102660639B

公开(公告)日：2013-09-04

申请号：CN201210091430.X

申请日：2009-12-24

申请人： 郑州大学

发明人： 杨永利 ,  施念 ,  王威 ,  施学忠 ,  李琳琳 ,  姚武 ,  周舫 ,  画宝勇 ,  郝长付

IPC分类号： C12Q1/68

摘要： 用BsrFI鉴定人MTHFR基因多态性rs2274976的试剂盒，包含：扩增人MTHFR基因多态性rs2274976位点附近序列的正向引物和反向引物，其中，所述正向引物在其3’末端倒数第一位碱基与rs2274976多态碱基相邻，倒数第二位为错配碱基C，以便在扩增产物中与多态G等位基因形成ACCGGT结构，所述的正向引物为SEQ ID NO：1或者SEQ NO：11，反向引物为SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：7或SEQ NO：12；所述的试剂盒还包括选自BsrFI、BsaWI、AgeI的限制性内切酶；并且所述试剂盒还包括用于实施鉴定的说明书。该试剂盒操作简单，成本低，使用范围广。

公开(公告)号：CN101812513B

公开(公告)日：2012-06-27

申请号：CN200910227637.3

申请日：2009-12-24

申请人： 郑州大学

发明人： 王威 ,  杨永利 ,  周舫 ,  画宝勇 ,  郝长付 ,  姚武 ,  张巧 ,  许东 ,  吴拥军 ,  吴逸明 ,  高彬

IPC分类号： C12Q1/68

摘要： 本发明提供鉴定人MTHFR基因多态性rs2274976的方法，包括以下步骤：提供待测人基因组DNA；使用扩增人MTHFR基因多态性rs2274976位点附近序列的正向引物和反向引物，以待测人基因组DNA为模板，进行PCR扩增反应，获得扩增产物；使用限制性内切酶对扩增产物进行酶切，获得酶切产物；以及对酶切产物进行电泳，以鉴定人MTHFR基因多态性；所述正向引物3’末端倒数第二位碱基为错配碱基C，以便在扩增产物中与多态G等位基因形成CCGG或ACCGGT结构，或者与多态A等位基因形成CCAGT结构，以便于使用相应的内切酶进行酶切鉴定，本发明方法操作简单，成本低，使用范围广。